以cdna为模板普通pcr
...普通的基因吗?不是特殊基因吧。用该基因设计引物,以CDNA为模板...
是普通基因，
cDNA定义
cDNA，全称为互补脱氧核糖核酸，是一种特殊的DNA分子，其碱基序列与特定的信使RNA (mRNA) 链互补。它是由依赖于RNA的DNA聚合酶（反转录酶）以mRNA为模板合成的单链DNA。在合成过程中，先形成单链cDNA，随后通过碱处理去除对应的RNA，接着以单链cDNA为模板，由依赖DNA或RNA的DNA聚合酶进一步合成双链...
什么是cdna
并且在合成单链cDNA后，在用碱处理除去与其对应的RNA以后，以单链cDNA为模板，由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。cdna重组：①借助于末端转移酶的3’—OH端合成均聚物的能力，双链cDNA和线性化载体DNA的3’—OH端分别加上均聚核苷酸链。②双链cDNA和线性化载体DNA分别用...
以cDNA第一链为模板的PCR是以什么设计引物的
一般以mRNA为模板设计引物扩增目的片段。
请教各位,定量PCR是不是一定要以cDNA作模板,可不可以直接拿总DNA作模板...
定量PCR的模版既可以使总DNA，也可以是cDNA，但两种做法的用途不同。如果用总DNA做模版，你检测的就是总DNA的拷贝数。如果以cDNA为模版，你检测的就是某个基因的表达水平。
什么是cDNA,有什么作用
中文名称： 互补DNA 英文名称： cDNA, complementary DNA 学科分类： 遗传学 注 释： 信使RNA(mRNA)分子的双链DNA拷贝。构成基因的双链DNA分子用一条单链作为模板，转录产生与其序列互补的信使RNA分子,然后在反转录酶的作用下,以mRNA分子为模板,合成一条与mRNA序列互补的单链DNA,最后再以单链DNA为...
RT-PCR的原理是什么?有何用途?
原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。RT- PCR（Reverse Transcription-Polymerase ...
逆转录原理
cDNA的合成是RT-PCR 的重要环节。以mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，随机引物、oligo(dT)或基因特异性引物的引导下合成互补的DNA(complementary DNA，cDNA)，再按照普通PCR的方法用两条引物以cDNA为模板，则可扩增出不含内含子的可编码完整基因的序列。逆转录PCR 重要参数 不同mRNA拷贝成cDNA的效率不...
为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA
你做的是不是RT-PCR， 这个就是以反转录得到的cDNA为模板的。我们做的时候一般是提取植物总的RNA，然后采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，主要是获得目的基因或检测基因表达，判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话，并不能证明该...
定量PCR是不是一定要以cDNA作模板,可不可以直接拿总DNA作模板直接做定 ...
定量PCR的模版既可以使总DNA,也可以是cDNA,但两种做法的用途不同.如果用总DNA做模版,你检测的就是总DNA的拷贝数.如果以cDNA为模版,你检测的就是某个基因的表达水平.
灵台县丙酸回答： 你的引物是设计到这个基因编码区的什么位置的?你考虑下是不是cDNA的降解问题. 还有你试验的时候降低退火温度,不要提高.提高更扩不出来了.
谷唐13215519441问： 请教各位,定量PCR是不是一定要以cDNA作模板,可不可以直接拿总DNA作模板直接做定量? - ？
灵台县丙酸回答：定量PCR的模版既可以使总DNA,也可以是cDNA,但两种做法的用途不同.如果用总DNA做模版,你检测的就是总DNA的拷贝数.如果以cDNA为模版,你检测的就是某个基因的表达水平.
谷唐13215519441问： “RT - PCR扩增目的基因cDNA”需要注意的事项有哪些? - ？
灵台县丙酸回答： RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术.首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段.RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平...
谷唐13215519441问： 反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗? - ？
灵台县丙酸回答： pcr扩增是由两条引物向中间扩增,得到两条引物之间的序列,所以引物必须是上游和下游一起,才能得到自己想要的目的片段
谷唐13215519441问： 以cDNA第一链为模板的PCR是以什么设计引物的 - ？
灵台县丙酸回答：[答案] 一般以mRNA为模板设计引物扩增目的片段.
谷唐13215519441问： 请教各位,可以用反转录得到的cDNA作模板,普通PCR的特异性引物来跑PCR吗? - ？
灵台县丙酸回答： PCR是一种技术,不是东西. 可以通过PCR把一条DNA模版链合成另一条DNA链.再把合成的DNA链加上引物合成第三条链.
谷唐13215519441问： 基因克隆实验 - ？
灵台县丙酸回答： 目的基因是动物的相关基因片段PCR扩增的吗?你采用mRNA还是DNA啊?是扩增16SrDNA?不然怎么会显示杆菌的片段?BLAST比对如此奇怪?应该不会插入错误16组,估计实验操作的问题,或者使用NCBI比对生物信息时有误.说的够概况的,不太清楚,也很好奇,能不能步骤表述详细点?一个好办法,克隆的菌落可以甘油保藏后直接送去测序,但是要告诉测序公司是甘油管样品.这样就可以看看是不是你前面的步骤有误或污染了.
谷唐13215519441问： 反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?cDNA不是只有一条链吗,是不是只需要一条引物?求详解. - ？
灵台县丙酸回答：[答案] 不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.
谷唐13215519441问： 能否直接用pcr技术在基因组里合成cDNA?可以给我一个详细的回答吗?万分感谢 - ？
灵台县丙酸回答： 用反转录后的CDNA做模板,和合成的引物一起做PCR扩增实验,得到PCR扩增产物后才通过核酸电泳来检测扩增产物.
谷唐13215519441问： 我想问什么是反转录PCR? - ？
灵台县丙酸回答： 反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增...
