为什么跑PCR要用CDNA，而不用本身的DNA
那要看你想要扩增的是什么基因片段了。cDNA是由RNA反转录而来。
有直接用基因组DNA跑PCR，为了是得到基因组本身的DNA片段或做DNA检测等；
而用cDNA扩增是为了得到基因的外显子片段或者检测目的基因是否表达等，这样制备的DNA片段还可用于目的基因的过表达等。
cDNA易于从文库中获取，目的性强，且不含DNA中的非编码区和内含子序列，经过扩增后既可以导入原核细胞也可以导入真核细胞，而DNA必须导入真核细胞，否则无法转录。
你做的是不是RT-PCR， 这个就是以反转录得到的cDNA为模板的。我们做的时候一般是提取植物总的RNA，然后采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，主要是获得目的基因或检测基因表达，判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话，并不能证明该基因在其他细胞体内进行表达，通过这种方法可以克服假阳性。仅供参考。
在PCR技术中CG代表什么?
第一，PCR中，C是 胞嘧啶，G是鸟嘌呤。第二，PCR中如果GC含量过高，就会导致退火温度过高，容易导致PCR不成功，设计PCR时候应该考虑GC含量。
为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA呢
那要看你想要扩增的是什么基因片段了。cDNA是由RNA反转录而来。有直接用基因组DNA跑PCR，为了是得到基因组本身的DNA片段或做DNA检测等；而用cDNA扩增是为了得到基因的外显子片段或者检测目的基因是否表达等，这样制备的DNA片段还可用于目的基因的过表达等。
定量PCR探针设计中,为什么需要碱基C的含量要明显高于G的含量?
G含量高会降低反应效率，它是反应效率最低，非特异结合率最高的一种碱基。请问需要我说其他原则么？http:\/\/shiyan.ebioe.com\/67110.htm
pcr中引物设计为什么不能有过多的c和d
引物中包含过多的C和G碱基对会导致一些问题，例如：1、引物中过多的C和G碱基对会导致引物间形成二聚体或多聚体。这种情况下，引物会在PCR反应开始前就互相结合，形成引物二聚体或多聚体，而不是与模板DNA结合。这将导致PCR反应效率的下降或完全失败。2、引物中过多的A和T碱基对会导致非特异性扩增...
轮胎PCR规格中205\/65R15C,其中这个C是什么意思?
代表轮胎的载重上线
何谓PCR?PCR引物设计时有哪些注意事项(注:要考虑退火温度)?一条PCR引物...
② GC含量，一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%，一对引物的GC含量和Tm值应该协调。若是引物存在严重的GC倾向或AT倾向则可以在引物5’端加适量的A、T或G、C尾巴。③ 退火温度 退火温度需要比解链温度低5℃，如果引物碱基数较少，可以适当提高退火温度，这样可以使PCR的特异性增加；如果碱基数较多...
pcrc入会条件
Pcrc超跑俱乐部每年为全球会员提供数百场超跑相关的兴趣和社交活动。它通过专业的品牌运营，整合内外商业资源，为会员长期谋求难得的特权和利益，搭建对称的网络和利益平台，打通会员的人脉，为会员提供独特的核心价值。PCRC吸的目的是爱超跑和改装。超跑不只是名利场的工具。希望俱乐部会员能够理解并珍惜超跑...
什么是PCR技术PCR的基本原理是什么
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度...
PCR引物设计怎么做 啊?跪求!
在标准PCR反应体系中，用2U Taq DNA聚合酶和800μmol\/L dNTP（四种dNTP各200μmol\/L）以质粒（103拷贝）为模板，按95℃，25s；55℃，25s；72℃，1min的循环参数扩增HIV-1 gag基因区的条件下，引物3′端错配对扩增产物的影响是有一定规律的。A∶A错配使产量下降至1\/20，A∶G和C∶C错七下降...
pcr,cDNA引物的问题
"所以做PCR，用反转录得到的cDNA做引物"你这个理解是不对的，cDNA就是是作PCR模板用的；mRNA反转录的时候，是会有片段断裂或者不完整，但是，mRNA的拷贝数有几十万甚至几千万个，不会每个mRNA拷贝在你扩增的目的基因处都断裂或者降解掉的。另外，提取RMA的时候，一般情况不会有DNA污染的，就算有，我们...
冀发莫匹： 两者都可以用于PCR.cDNA是以mRNA为模板反转录形成的,以其为模板PCR可以获得目的基因或检测基因表达.
察哈尔右翼后旗18229872606： cDNA是双链么real time PCR为何用cDNA 而不是用直接提取的DNA做 - ？
冀发莫匹：[答案] 你知道real time PCR用cDNA和用DNA的目的区别在哪儿吗?用DNA的一般是检测基因组中目的片段的数量的用cDNA的一般是检测目的基因表达量的,这当然就需要检测mRNA的量,但是RNA太容易被分解,难以检测,故而用反转录而成的c...
察哈尔右翼后旗18229872606： 为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA呢 - ？
冀发莫匹： 你做的是不是RT-PCR哦 这个就是以反转录得到的cDNA为模板的
察哈尔右翼后旗18229872606： 为什么基因克隆时用cDNA文库而不用基因组文库? - ？
冀发莫匹： (1)基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性.(2)cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因.(3)对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是经过剪接、去除了内含子的cDNA.
察哈尔右翼后旗18229872606： 为什么通常要用cDNA而不用基因组DNA - ？
冀发莫匹： cDNA是没有内含子的编码蛋白的基因组序列,直接翻译为起作用的蛋白,基因组DNA又叫gDNA,由外显子和内含子组成,需特殊的酶剪切掉内含子,才能翻译成蛋白.
察哈尔右翼后旗18229872606： 为什么不用mRNA作为实时荧光定量pcr的模板 - ？
冀发莫匹： RNA分子怎么能作为PCR模板呢?PCR的酶是DNA聚合酶,需要用DNA为模板!因此需要mRNA逆转录为cDNA,再以cDNA为模板才能进行PCR反应.
察哈尔右翼后旗18229872606： 为什么有的实验提DNA有的提RNA来做PCR - ？
冀发莫匹： 实验目的不一样.如果验证基因是否表达,要提取RNA做RTPCR,因为只有基因转录为mRNA才能表达.如果是验证该基因是否存在,或者验证某一保守序列,提DNA就可以了.此外,有的物种用RNA做遗传物质,比如流感病毒,那么也要提RNA来做实验.
察哈尔右翼后旗18229872606： 荧光定量PCR引物为什么要跨内含子设计?？
冀发莫匹： 避免基因组DNA的影响. 荧光定量PCR的扩增区段比较小,也就200bp左右,而且一般以cDNA为模板.如果不注意引物设计的话,很可能落在同一个外显子内.此时,无论cDNA还是基因组DNA都会给出同样的信号,也就是说定量会出现误差.如果引物跨内含子,则cDNA会给出信号,而基因组DNA由于引物无法完全配对而没有信号,也就避免了基因组DNA的影响.
察哈尔右翼后旗18229872606： 请教各位,定量PCR是不是一定要以cDNA作模板,可不可以直接拿总DNA作模板直接做定量? - ？
冀发莫匹：定量PCR的模版既可以使总DNA,也可以是cDNA,但两种做法的用途不同.如果用总DNA做模版,你检测的就是总DNA的拷贝数.如果以cDNA为模版,你检测的就是某个基因的表达水平.
察哈尔右翼后旗18229872606： 一般是用DNA做微卫星,为什么不用RNA - ？
冀发莫匹： 首先,DNA也就是基因组的信息量大,含有的微卫星位点丰富.RNA是DNA转录的产物,并不是所有的DNA都能转录出RNA,所以微卫星位点会变少. 其次,做微卫星检测是要用PCR技术,因此,要检测RNA里的微卫星的话,也要把它反转录成cDNA才行,事实上没人会这么麻烦的去做,RNA中存在的微卫星位点必定会存在于对应的DNA里. 只要确定微卫星序列,设计特异引物以基因组为模板就可以检测特异的微卫星位点.
