以cdna为模板进行什么扩增

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cdna名词解释生物化学
与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)的作用而合成。并且在合成单链cDNA后,在用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶的作用合成双链cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA,在遗传工程...

反转录的cDNA是单链还是双链?
RNA反转录的cDNA是单链的,最终形成双链。cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成。并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或...

qpcr设计引物以mrna为模板还是以cdna为模板
当然是cDNA了,mRNA还没有被剪切就有可能有内含子,如果你的基因没有内含子的话,DNA,cDNAmRNA都是无所谓的

cdna是什么意思
cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由依赖RNA的DNA聚合酶(反转录酶)作用而合成,并且在合成单链cDNA后,再用碱处理除去与其对应的RNA以后,以单链cDNA为模板,由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶作用合成双链cDNA。在这种...

某一同学克隆了一个基因的编码cDNA序列,为了研究其性质,欲构建其表达...
1.根据实验需要选择合适的表达载体。要考虑的问题:使用什么样的启动子?要不要与报告基因组成融合蛋白?有没有纯化蛋白的考虑?2.根据表达载体的多克隆位点选择合适的限制性内切酶位点,确保cDNA序列中没有这些位点。3.设计带有这些酶切位点的PCR引物,以cDNA为模板,扩增其编码序列(从起始密码子到终止...

如何通过已知的目的蛋白肽段序列设计引物来获取目的基因
2.由于扩增Coding sequence对引物的位置要求严格(从ATG到TGA)因此设计的引物的评分通常较低(已形成引物二聚体或者有较为严重的错配),有时这会影响目标产物的扩增。我有时会先设计一对引物,这对引物分别在5'和3'UTR区域,用软件设计,要保证引物好用;这样以cDNA为模板进行扩增后,再以此产物为...

qRT-PCR和RT-PCR是一种吗?
qRT-PCR和RT-PCR当然不是一种,一般qRT-PCR就是你后边提到的那一串英文,中文叫做实时定量PCR,这个不是半定量,southern杂交和Northern杂交才属于半定量。而RT-PCR通常指的是反转录PCR,英文是reverse transcription PCR,就是先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增。半定量:半...

胁迫处理过植物的RNA反转的cDNA用作模板做PCR,产物经测序正确能否做转基...
可以做转基因。但是你的初始植株就应该是盐胁迫后的植株,而不是你的初始植株,可能会有不同的结果。但是如果你取消盐胁迫的话,待植株恢复正常之后,我觉得应该也没有问题。因为盐胁迫的条件只是让植株出现应急反映,促使一些基因表达,一些基因关闭。条件恢复,植株也会趋于正常。

以cDNA第一链为模板的PCR是以什么设计引物的
一般以mRNA为模板设计引物扩增目的片段.

关于PCR中用cDNA做模板扩基因的最优体系
如果仅仅是摸一个比较适合的退火温度的话,用一个通用的tag buffer体系就行,退火温度的确定主要考虑的是引物的GC含量及目的基因的Tm值

众伏18665696784问: 什么叫反转录聚合酶链式反应 -
万宁市复方回答:[答案] 就是RT-PCR.也就是说先用RNA反转录为cDNA,然后以cDNA为模板进行PCR扩增的过程.

众伏18665696784问: 以mRNA序列设计的引物扩增以cDNA为模板的序列得到的是什么?得到的序列是和mRNA一样的是吧? -
万宁市复方回答:[答案] 没有内含子的cDNA序列

众伏18665696784问: 何为原位PCR? -
万宁市复方回答: 原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进.此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法.

众伏18665696784问: 什么是反转录 - 套式聚合酶链反应(RT - nPCR)?
万宁市复方回答: RT-nPCR实际叫做反转录-巢式PCR, 反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进...

众伏18665696784问: 合成cDNA第二条链的U3 - R - U5 - PBS序列时,PBS序列是怎么合成的,以什么为模板 -
万宁市复方回答:[答案] 合成cDNA的第二条链肯定是设计引物后以cDNA第一链为模板进行扩增啊.cDNA第一链是通过RNA逆转录而来.所以实验顺序是:RNA提取——第一链cDNA合成——第二链cDNA合成.

众伏18665696784问: 什么是反转录 -
万宁市复方回答: 反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程,是DNA生物合成的一种特殊方式.区分:反转录与逆转录不等同.反转录是进行基因工程过程中,人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA,并以之为模板人工合成DNA的过程;逆转录是RNA类病毒自主行为,在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程.二者虽同为RNA→DNA的过程,但地点不同,相对性的来说,反转录在体外,逆转录在体内.

众伏18665696784问: 如何做RT - PCR实验 -
万宁市复方回答:[答案] RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术.首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段.RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RN...

众伏18665696784问: 分不清反转录和反转录PCR,希望能人帮我解释一下 -
万宁市复方回答: 个人理解..反转录是指从RNA到cDNA的这一步.RT-PCR是指从RNA反转合成cDNA第一链,然后以cDNA 为模板扩增目的片断,已达到检测目标基因是否表达等目的.....

众伏18665696784问: pcr技术扩增 -
万宁市复方回答: PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能...

众伏18665696784问: PCR,RT - PCR,实时荧光定量PCR的区别与联系 -
万宁市复方回答:[答案] 你所说的PCR应该就是最常规的PCR,以DNA为模板,通过上下游引物,实现DNA的扩增 RT-PCR一般情况下是指反转录PCR(reverse transcription),尽管有些资料上说实时荧光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也简称RT-...


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