cdna浓度多少适合pcr
乙醇沉淀DNA的浓度是多少最好
除去了蛋白质的核酸溶液,必须再进一步沉淀和浓缩。最常用的方法是酒精沉淀法。就是将含有Na+的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。如果出现的丝状物较少,可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分。浓缩后的...
琼脂糖凝胶浓度的选择与dna片段大小之间的关系
一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1...
血清\/血浆dna提取试剂盒浓度一般多少
血清\/血浆DNA提取试剂盒浓度跟样本量、洗脱体积有关，一般来说用Qiagen、BIOG方法得率都差不多，50微升洗脱体积可以用Qbit测到5-20ng\/ul的读数，浓度稍低也没关系，关键还是看pcr检测结果，毕竟浓度太低测到的读书也没有参考意义，还是要以pcr检测结果为准。
琼脂糖凝胶电泳实验中DNA的浓度会产生什么影响?最低能够检测到多大含量...
决定凝胶中琼脂糖的百分含量；一般情况下，可参考下表：琼脂糖的含量（%） 分离线状DNA分子的有效范围（Kb）0.3 60-5 0.6 20-1 0.7 10-0.8 0.9 7-0.5 1.2 6-0.4 1.5 4-0.2 2.0 3-0.1 琼脂糖凝胶的浓度一般从0.5%到~2都可以，1%最常用，这里单位是g\/100mL。
大鼠粪便dna的浓度一般是多少
20μg\/mL。大鼠粪便中微生物基因组DNA抽提和浓度均一化：收集粪便样本，提取基因组DNA，应用核酸蛋白分析仪确定浓度，调整待测样本浓度为20μg\/mL。
DNA 正常值
三.HBV DNA浓度越高表明病毒复制越活跃，无论HBV-DNA阳性还是阴性，都只是代表了乙肝病毒的复制和传染性强弱，HBV-DNA值的多少和肝损伤的程度没有直接的关系。HBV-DNA阳性的乙肝病毒携带者不一定需要治疗，还要结合转氨酶（ALT）水平。一般来说，只有当转氨酶大于正常值的2倍时，才应考虑治疗。个人建议你...
切胶回收dna浓度大约多少
0.03pmol\/ul。根据回收片段的长度决定用胶的浓度，长度约大胶浓度可以越小，胶回收产物浓度在0.03pmol\/ul浓度属于正常。切胶机的主要功能是可以把天然的橡胶或者是橡胶的胶块切割成小的胶块以便于加工使用。
HBVDNA正常值是多少
HBVDNA浓度越高表明病毒复制越活跃。因此，HBV DNA为阳性的乙肝小三阳会传染，如果转氨酶高，很可能是乙肝病毒变异引起的，传染性较强。HBV DNA阴性的乙肝小三阳也会传染，只是传染性弱。推荐阅读：乙肝小三阳DNA阳性什么意思 在HBVDNA定量检查中，HBVDNA正常值为小于1*10的3次方，即HBVDNA检查值小于...
如何选择琼脂糖凝胶的浓度来分离DNA
总体原则是：分子量大的DNA，电泳时使用浓度较小的凝胶反之亦反。胶浓度越大，电泳速度越小；若胶浓度偏高，可能跑不动，条带缩在一起；若胶浓度过低，可能跑得太快，同样分不开。可参考下面的对应关系：凝胶浓度（%） 线性DNA长度（bp）0.5 1000～30000 0.7 800～12000 1.0 500...
测dna浓度260\/280为什么是1.8-1.9
这个范围基本正常呀 DNA： OD260\/OD28大约等于1.8， 如果大于1.9,表明有RNA污染；小于1.6，表明有蛋白质、酚等污染；RNA： OD260\/OD28在1.7——2.0,如果小于1.7，表明有蛋白质或酚污染；大于2.0，表明可能有异硫氰酸残存
广水市阿端回答： 这个没有明确的规定,一般用的最多的是1-100ng/ul(工作浓度).浓度太低和太好都会影响扩增效率,但并不是绝对的.因为有一些基因表达水平极低,有一些在特殊情况下又极高.qPCR很多时候仅仅反映的是几个样品之间的趋势,而不是绝对值.
孟谢14767229564问： ffpe 提取dna 一般浓度和纯度是多少 - ？
广水市阿端回答： rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千.如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系. 纯度需要用仪器测一下.260/280理论值应该有2.0以上,260/...
孟谢14767229564问： 模板的浓度对PCR有什么影响,一般要多大浓度? - ？
广水市阿端回答： 那要看你用的是什么模板了. pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来了.一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以了,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加.
孟谢14767229564问： “RT - PCR扩增目的基因cDNA”需要注意的事项有哪些? - ？
广水市阿端回答： RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术.首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段.RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平...
孟谢14767229564问： 做RT - PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? - ？
广水市阿端回答： 内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但real time一般选择300bp以下 它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.PCR时,每个标本都要做对应的内参,...
孟谢14767229564问： qrt - pcr加cDNA的量,怎么加 - ？
广水市阿端回答： 因为你所要检测的目的片段丰度不同,所以需要先做个预实验. 怎么做呢? 你先把cdna进行梯度稀释,然后进行pcr,如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间,那么就是很不错的稀释梯度啦~ 以后实验久按照这个浓度加就好了
孟谢14767229564问： PCR引物浓度一般选多少?进行PCR反应时的两条引物浓度选多少度合适?一般是多大范围? 我把引物浓度稀释到10μmol/L,然后在50μL反应体系中加入1... - ？
广水市阿端回答：[答案] 我使用的引物一般稀释到10μM. 20微升体系每个引物加0.4微升即可. 你的50微升体系加1微升也不算多. 你降低下退火温度试一试.
孟谢14767229564问： 【求助】做完RT后,cDNA一般稀释多少倍后上real time比较合适? - ？
广水市阿端回答： 如果认为逆转录效率100%的话 这样得到的cDNA 的浓度应该是100ng/ul 如果原来是100ng/ul,那么稀释过后就只有10ng/ul了
孟谢14767229564问： 关于基因测序的几个问题! - ？
广水市阿端回答： 根据一些文献的支持,先片段化,效果较好.因为这样的随机性比先合成要好. 2.加入index只是为了区分每个上机样品,便于分析.对结果没有什么目的和影响 3.如果技术试验流程没有问题的话,有的时候是因为物种本身的特殊性,诸如,杂合度过高,重复序列过高.
孟谢14767229564问： DNA RNA做PCR问题 - ？
广水市阿端回答： pcr有很多种,有荧光定量的,还有定性的等等.定量的长度一般在300bp以内,根据具体的检测项目决定长度.定性的最长能达到2K以上.一般情况来说,越短扩增效率越高.RNA做RT-PCR也一样.DNA直接做PCR,而RNA则须先做RT-PCR,然后再进行荧光定量PCR扩增,目前市面上最常见的是一步法,将两个反应连接在一起完成.荧光定量PCR不仅仅是观测扩增情况,还能进行绝对定量、相对定量等,根据实验者的实验设计决定.
