单克隆细胞筛选原则
如何筛选在真核细胞中的阳性克隆
如何筛选在真核细胞中的阳性克BamH 1 的酶切位点在tet上，所以酶切重组后，质粒就不会再表达四环素抗性抗性了，筛选阳性克隆要挑选在Amp平板上生长的菌株，而在Tet平板上生长的菌株是插入失败的。
细胞克隆技术是怎么回事?
例如：实验细胞克隆化培养技术—有限稀释法 一、实验目的：1、掌握用有限稀释法进行细胞克隆化培养技术； 2、学会细胞克隆形成的辩观察技能；3、配合抗体分泌细胞筛选技术，确定抗体分泌细胞。 二、实验原理：克隆化培养即单细胞培养技术，用有限稀释法进行杂交瘤细胞克隆化培养，可以及时确定阳性杂交瘤细胞株...
单克隆转染细胞的筛选通常的步骤。
【答案】：单克隆转染细胞的筛选通常的步骤是：在转染24小时后，利用遗传霉素进行新霉素抗性基因的筛选；稳定筛选2周后，在肉眼观察下将形成的单克隆细胞簇消化，制备成单细胞悬液；逐一将单个细胞置于96孔板培养；待单克隆长到相对较大的集落后，于显微镜下挑取细胞集落，转移到24孔板培养；当获得足量...
基因克隆载体需要有哪几个条件?
用人工方法取得目的基因的适宜载体，即质粒（一种环状双链DNA）或病毒。基因克隆载体必须具备三个条件，具有能使外源DNA片段插入的克隆位点；能携带外源DNA进入受体细胞，或游离在细胞质中进行自我复制，或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制而复制；必须具有选择标记，以便筛选承载外源DNA的受体细胞。目前原核...
细胞的克隆形成,你必须要知道的事!
Cas9X海星生物技术平台研发出了ClonePlus™技术。使绝大部分细胞克隆形成率达到90%以上，个别克隆形成能力较差的细胞例HepG2通过ClonePlus™技术也能够在短时间内稳定筛选出单克隆，而且克隆形成的时间可缩短到1-2周的时间，大大压缩了整个单克隆生长的时间周期，赢得宝贵的时间。
做基因敲除如何快速筛出阳性克隆?
通过病毒法，化学转染法或电转法将gRNA和Cas9转入细胞中，根据转染方法不同进行不同时长的药筛，药筛完成后挑选单克隆培养。选择不同的克隆分别进行靶位点扩增及测序验证，筛选出基因敲除的阳性克隆。
G418筛选后如何确保得到遗传稳定且强表达目的蛋白的细胞克隆?
由于整合的概率低且随机，表达目的蛋白的量会因为这种随机性而产生显著差异。随着培养时间的推移，那些失去外源基因和表达能力较弱的细胞会逐渐占据优势，而强表达目标蛋白的细胞会逐渐减少。因此，进行多次筛选是必不可少的步骤，以寻找遗传稳定且高效分泌目标蛋白的细胞克隆。产品详情：规格：1g原装货号：...
关于克隆的有关知识
克隆通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的的无性生殖方式(如植物)。一个克隆就是一个多细胞生物在遗传上与另外一种生物完全一样。克隆可以是自然克隆,例如由无性生殖或是由于偶然的原因产生两个遗传上完全一样的个体(就像同卵双生一样)。但是我们通常所说的克隆是指通过有意识的设计来产生的完全一样的...
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养
经选择性培养基筛选后的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞。通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上培养，使每孔细胞不超过一个（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体...
在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选?
但可利用培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核酸而得以生存。）第二次筛选：（1）筛选对象：多克隆杂交瘤细胞群体。（即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。）（2）筛选方法：抗体检测（ 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等，实际上是利用稀释法，在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养，然后检查每...
博兴县桂圆回答： 第一2113次:筛选出AB型细胞(A:浆细胞,B:骨髓瘤细胞),不要AA、5261BB型. 第二次:筛选出有特异性的4102杂交瘤细胞,检验阳性.单克隆细胞特点:1653灵敏度高、特异性强、可大量制备 杂交瘤细胞特点:能体外大版量繁殖....忘记了...详细请看人教版生物权选修三
战征18090865322问： 单克隆抗体的问题 - ？
博兴县桂圆回答： 两次筛选:第一次是筛选出杂交瘤细胞(同种细胞间的融合就不是如淋巴B细胞-淋巴B细胞)第二次是为了筛选出具有特异性抗体的杂交瘤细胞)望采纳~~祝你学习进步.
战征18090865322问： 怎么筛选稳定的高表达的杂交瘤细胞? - ？
博兴县桂圆回答： 单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,细胞将以多种形式出现,如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾细胞和瘤细胞等,其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的. 正常的脾细胞在培...
战征18090865322问： crispr为什么 单克隆筛选 - ？
博兴县桂圆回答： CRISPR系统实际是细菌的一种获得性免疫系统. 细菌被phage侵染之后,可以获得phage的DNA片段整合进基因组形成记忆,当再次遭到入侵时,从对phage形成免疫
战征18090865322问： 如何建耐药细胞株? - ？
博兴县桂圆回答： 一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株. 脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,...
战征18090865322问： 流式细胞仪能筛选出单克隆细胞么 - ？
博兴县桂圆回答： 可以. 为了制备牛型布鲁菌核蛋白L7/L12的单克隆抗体,试验采用流式细胞仪与间接ELISA相结合的方法进行单克隆筛选,以及Western-blot分析.结果表明:最终筛选出3株表达量较高的杂交瘤细胞株,细胞培养上清液的抗体效价可达1∶3 200,3株单克隆抗体均能与核蛋白L7/L12发生特异性结合,无其他交叉反应.
战征18090865322问： 1.生产单克隆抗体时,在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,该试剂的作用是 - ？
博兴县桂圆回答： 1、作用 能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制.2、原理 在这个单克隆抗体生产过程中,因为普通B淋巴细胞是不能体外生长的,所以必须将其与骨髓瘤细胞杂交才能实现体外生长,在这里骨髓瘤细胞只是相当于一种培养母体,我们并不需要其DNA的复制,而我们要生产的是专一抗性B淋巴细胞抗原,所以这种药剂要具有选择性,既不能影响淋巴细胞的DNA复制,又要抑制骨髓瘤细胞的DNA复制.
战征18090865322问： 单克隆抗体第二次筛选,有人解释为一个抗原有多个决定簇,所以多种抗体,但是即便是多种抗体,也是都针对 - ？
博兴县桂圆回答： 单克隆抗体的基本概念:抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的.每一个B淋巴细胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因.动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细...
战征18090865322问： 高中生物!制备单克隆抗体原理? - ？
博兴县桂圆回答： 制备单克隆抗体的原理是杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又能分泌一种特异性抗体
战征18090865322问： 关于生物pt27？
博兴县桂圆回答： 单克隆 注射抗原————获得免疫细胞————筛选细胞————形成杂交瘤细胞————筛选成功融合的细胞————将杂交瘤细胞再注入小动物腹腔培养或体外培养——
