单克隆抗体的筛选原理

作者&投稿:阙建 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

单克隆抗体技术原理是什么?
单克隆抗体技术原理如下:由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交...

简述单克隆抗体的制备过程及原理。
黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))的选择培养基进行培养,未融合的脾细胞因不能在体外无限增值而死亡,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏此黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用此黄嘌呤而死亡。融合成功的杂交瘤细胞经筛选和克隆化建株,可获得能够产生某种特异性抗体的杂交瘤细胞。

在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选?
但可利用培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核酸而得以生存。)第二次筛选:(1)筛选对象:多克隆杂交瘤细胞群体。(即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。)(2)筛选方法:抗体检测( 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等,实际上是利用稀释法,在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养,然后检查每...

单克隆抗体制备过程中两次筛选的作用分别是什么?
所以产生抗体是不纯的。如果不进一步提纯,这样得到的是多克隆抗体。所以就有了第二次筛选。第二次筛选 要想获得单克隆抗体,所以必须得到由一个细胞分裂而成的一个细胞群,由这样的细胞群产生的抗体才是真正意义的单克隆抗体。(一)筛选的目的 筛选只针对某一种特定的抗原决定簇产生抗体的杂交瘤细胞,...

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
单克隆抗体制备的原理:B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力、B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的、将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是...

单克隆抗体 两次筛选分别是怎样筛选的?
先用HAT培养基,目的是筛选融合细胞.再用筛选得到的杂交瘤细胞做ELISA,筛选目的细胞株(就是抗你最初所用免疫小鼠蛋白的抗体)

单克隆抗体为什么要每孔一个细胞
初筛选出的骨髓瘤细胞可能含有不分泌抗体的细胞或有多株分泌抗体的细胞,且刚融合的细胞不稳定,将不同种的杂交瘤细胞分开的方式就是将培养基上的细胞进行稀释,使得每孔一个细胞,每个细胞只产生一种抗体,然后再进行单克隆抗体的阳性检测,进一步筛选出这些能分泌所要抗体的杂交瘤细胞,进而能保证抗体的...

利用细胞………单克隆抗体时有两次筛选,第一次筛选的目的是?第二次筛选...
在进行单克隆抗体实验时,第一次筛选的目的是为了把与骨髓瘤细胞结合的效应B细胞与其他普通的细胞分离开来,用的是特定的选择培养基。而第二次筛选是为了把我们真正需要的杂合效应B细胞提取出来。在我的印象中好像没有用到什么酶,筛选用的都是选择培养基。

单克隆抗体中为什么要进行第二次筛选?书上说因为要选出人们所需要抗体的...
因为细胞的融合是随机得而且概率小于100%,所以筛选前培养基里的细胞好多种:B细胞与B细胞融合,瘤细胞与瘤细胞融合,未融合的细胞,B细胞与瘤细胞融合,这还只是考虑细胞两两融合的情况,还有可能多个细胞融合在一起,所以要经过筛选得到需要的细胞 ...

制备单克隆抗体的2个原理
HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养,即可无限制地大量制备单克隆抗体。

酆广17236298201问: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
寻乌县复方回答: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

酆广17236298201问: 单克隆抗体两次筛选分别是怎样筛选的? -
寻乌县复方回答:[答案] 先用HAT培养基,目的是筛选融合细胞. 再用筛选得到的杂交瘤细胞做ELISA,筛选目的细胞株(就是抗你最初所用免疫小鼠蛋白的抗体)

酆广17236298201问: 如何筛选动物单克隆抗体 -
寻乌县复方回答: 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...

酆广17236298201问: 高中生物:单克隆抗体问题 请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理是什么 -
寻乌县复方回答: 原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养,未融合的细胞不能合成核酸,就会死亡.未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常,不能合成核酸.融合细胞可以通过旁路合成核酸,从而存活.

酆广17236298201问: 什么叫单克隆抗体? -
寻乌县复方回答: 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体. 1、单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术. 2、单克隆抗体是亲...

酆广17236298201问: 高中生物!制备单克隆抗体原理? -
寻乌县复方回答: 制备单克隆抗体的原理是杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又能分泌一种特异性抗体

酆广17236298201问: 单克隆抗体制备过程中的专一抗体检测阳性的检测原理是什么 -
寻乌县复方回答: 2.杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化.通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养.采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增.经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存.抗原-抗体杂交原理

酆广17236298201问: 关于单克隆抗体的不正确叙述是() -
寻乌县复方回答: B 单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体.(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.

酆广17236298201问: 单克隆抗体的制备所用的细胞 -
寻乌县复方回答: 都对,因为产生那种抗体的效应B细胞量太少(效应B细胞不能分裂),不易把它筛选出来.制单克隆抗体时用的B细胞包含效应B细胞,让它们和瘤细胞融合后,杂种细胞有好多种,再筛选出杂交瘤,由于和效应B细胞融合形成的杂交瘤能分裂,这时产生抗体的杂交瘤就多了,所以产生的抗体量就多了,这时就可筛选出产生所需抗体的杂交瘤. 一句话,用B细胞,而真正发挥作用的是其中的效应B细胞

酆广17236298201问: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别?___. -
寻乌县复方回答:[答案] 单克隆抗体制备过程中共有2次筛选,一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.这两次筛选的原理和方法不同:第一次筛选的原理是细胞中DNA合成有2种途径,方法是用选择培养基进行筛选;第二...


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