挑单克隆菌落技巧

作者&投稿:师佳 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

细菌的单克隆抗体好做吗,大肠杆菌的有做的吗?大概需要多久
首先,我们要明白制作单克隆抗体的前提。 它的前提就是要在某个生物体内产生我们需要的抗体,那么首先就要对其进行相应抗原刺激。。 细菌不能被是原核生物,不会产生抗体。至于大肠杆菌则不能被抗原刺激产生抗体。。

生物制品菌种传代挑单克隆合规吗
该菌种克隆是合规的。菌种挑单克隆是指从传代后的菌种中挑选出单个菌落,然后将其进行培养和扩增。这个过程也是合规的,因为挑单克隆可以保证菌种的纯度和一致性,避免杂菌污染和基因突变等问题。菌种传代是一种常规的操作,用于扩增菌种的数量。在实验室中,菌种传代通常使用液体、固体或半固体培养基进行...

单克隆菌落
单个细菌在固体培养基上繁殖后,会形成一个肉眼可见的子代(子细胞)群体,这个群体就是单克隆菌落.它包含有很多个细菌,并且是同一个细菌的后代.

单克隆菌落为什么菌落pcr
菌落pcr直接以单个菌作为模板。因为菌落pcr直接以单个菌作为模板。菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于。是一种可以快速鉴定菌落是否为含有目的基因的阳性菌落的方法。

菌落PCR的具体方法
…则96空反应板也相应标1#,2#,3#……以便筛选到克隆后的扩大培养),再将挑取的96个单一菌落转移到48孔板培养基中培养,挑好单克隆菌落转移之后,由于96孔反应板内沾有挑选的菌落,可以用相应的通用引物和之前配制好的PCR混合液混合好之后加入到96孔反应板内。3、将混有菌体的PCR混合物置于PCR仪...

为什么挑的单克隆在LB培养基中培养了快12个小时,菌液还是那么少,浓度不...
可能挑的单克隆活性不高,也有可能是没挑到。我觉得更像是前一种可能。你可以从一下几个方面思考:1 是否菌液中抗生素浓度加的过高?2 是否培养时间不够?(因为我们培养常常要超过20个小时,在高浓度抗生素平板上长出菌不容易啊!)3 是否导入质粒失败?也可能跟你转化的质粒有关。有些质粒转化后...

菌液或菌落PCR的反应体系怎么配置啊,同普通的PCR体系一样吗?用相同的...
体系是相同的 菌液PCR一般20ul体系加1ul 菌落PCR建议先挑单克隆溶于10ul无菌水中,取一半作为模板扩增,另一半可以作为菌种保留,如果PCR鉴定正确,再拿出来接种摇菌。两种方法,在PCR程序上最好预变性时间长点,10min左右,或者先对细菌95度处理10min然后立即放到冰上进行预处理,以保证细菌中的质粒...

为什么菌落一定是要由1个细菌或一个真菌繁殖
没有说菌落一定要一个细菌或真菌繁殖而来。一般1个细菌或者真菌繁殖而来的菌落我们称之为单克隆菌落,这种菌落性状单一并且稳定,一般用来做遗传研究。多个细菌和真菌在一起也可以长成单个的菌落,只是菌落性状可能不稳定,菌落的边缘也可能不整齐。比如这个细菌的菌落 是经过划线分离以后,较散的那几个可能...

的单克隆菌落的大小有关系吗
的单克隆菌落的大小有关系吗 : 这是挑单菌落做菌液PCR吧,没关系的,验证完之后转接到摇瓶培养就好

细菌分区划线到长单克隆要多久
题主是否想询问“细菌分区划线培养要多久”?48-72小时。例如在培养酵母菌的过程中,在平行平板中选取菌株分布均匀、数量适宜的平板,用分区划线法在新的MEA培养基中28℃培养48-72小时后会有明显的菌落生长情况。三区划线法是实验室最常用的平板划线接种方法,通过在平板上划线,将细菌在琼脂平板表面充分地...

征殷14755198559问: 如何挑单克隆摇菌 -
蓬安县澳朗回答: 用接种环的头碰一下单菌落,然后到液体培养基中晃一晃.

征殷14755198559问: 在固体培养皿中挑单个菌落到试管内培养,有什么技巧吗?挑单个菌落时怎么才能确保枪头肯定能挑到细菌? -
蓬安县澳朗回答:[答案] 同学你用什么挑?用枪头?用枪头挑的到?你们老师能让你用枪头? 正确的方法是用接种环,操作最好要在超净台上,点上灯,看准了,选取边缘清晰又比较大的菌落,一环下去,能接触到就行了,记住不要插,轻轻碰一下就有几十万个菌了,然后...

征殷14755198559问: 【求助】弱弱的问,如何挑取单菌落? -
蓬安县澳朗回答: 培养皿中有几个大肠杆菌单菌落,直径3mm,挑取到斜面接种,用过接种针和牙签,但是都不大完美,我觉得不是“挑取”单菌落而是“蘸取”了单菌落.不知道大家是怎么操作的?如果要挑取完整的菌落,难道要把下面的琼脂也一起挑取出来...

征殷14755198559问: 生物里分离细菌的 单细胞挑取法 是什么 解释一下 -
蓬安县澳朗回答: 分离: 稀释倒平皿法 平板划线法 单细胞挑取法 利用选择培养基分离法 纯化: 1、若是你不知道你所要纯化的微生物的特征,最简单的不知道它的菌落特征和形态大小,那现根据你要分离菌的特性,找适合的初筛培养基,找到你要纯化的菌.如纤维素菌,你在培养基中加纤维素粉或CMC-Na作碳源,这样就可以筛选出分解纤维素的菌.然后再用下面的方法继续纯化. 2、若你知道目标菌的形态,可以直接挑混合菌划平板,直到长出当个菌落,并且在镜下没有杂菌即可;或者挑菌稀释涂布得到当个菌落也行.

征殷14755198559问: 质粒转染的大肠杆菌为什么要挑选单克隆? -
蓬安县澳朗回答: 因为我们挑的是菌落,而一般我们认为一个菌落就是又一个细菌繁殖产生的.所以菌落内的细菌都是同一基因型(也就是说要不然都带有质粒,要不然都没有或者是其他质粒),也就是说要挑单克隆. 如果挑的不是单克隆,那么菌落内的细菌的种类就会不同,有的有质粒,有的没有,有的带其他质粒.这样的话,我们做后续的实验就不好做了.

征殷14755198559问: 单菌落菌液PCR检测 -
蓬安县澳朗回答: 博凌科为生物科技-为你解答:直接挑曲单克隆,一般使用特异引物,在体系中进行PCR即可,细胞热解后DNA释放就能进行PCR扩增~

征殷14755198559问: 怎样确定你所得到的单菌落是否是纯种 -
蓬安县澳朗回答: 你平板划线,就可以得到单菌落啊,通过菌落大小和形态确定.要是你还是不确定,再挑取这些单菌落划线,估计绝对可以得到单菌落了.

征殷14755198559问: 大肠杆菌分离 意义 -
蓬安县澳朗回答: 对于转入的质粒来说,不同的大肠杆菌的转进的基因有些许不同,有肯能只有一两个碱基的同义突变(因为其间过程可能导致基因突变),虽然对其生长影响不大,但是对于测序来说或就会导致测序的峰值紊乱,造成测序失败.更不用说有的质粒根本就和目的基因没有连接上.所以这样挑取单克隆(单克隆是由一个大肠杆菌传代后形成的,具有相同的基因型.)比较有效的防止这些现象的产生.对于不同菌株来说,其实大肠杆菌也有很多种类,不同种类具有各自不同的独特的基因.这样可以被分为不同的亚种,所以有进行分离的必要.不过实验室用的相对比较稳定的,不用太担心大肠杆菌其本身的突变,只要菌株活力保持的好就行了.

征殷14755198559问: 怎么利用选择培养基鉴别是质粒质粒 -
蓬安县澳朗回答: (1)培养基中含有乳糖、蔗糖等有机碳源,说明大肠杆菌的营养类型是异养型;培养基中含有伊红和美蓝,说明该培养基属于选择培养基.(2)作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于重...

征殷14755198559问: DNA克隆,单菌落很多,检测不到目的条带,求高人指点 -
蓬安县澳朗回答: 用的什么Taq酶?有些高保真的Taq酶不能再PCR产物末端加A,不适用于T载体. PCR产物回收后有跑胶鉴定吗?浓度如何,浓度太低的话,连接阳性率也很低的. 另,能长出很多单菌落,说明你的板子、感受态都没有问题.


本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网