挑单克隆细胞步骤
转染转染细胞筛选
转染完成后，72小时后，将转染细胞以1:10的比例传代至6孔板，并更换预实验确定的抗生素浓度选择培养基。在这个过程中，会观察到单个细胞分裂形成抗性集落。筛选单克隆细胞的方法有两种：滤纸片法：使用消毒的5x5mm滤纸片浸入胰酶，将其贴在单细胞集落上，然后在24孔板中继续培养，直到形成完整细胞群，再...
单克隆抗体的制备步骤
第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能保证单克隆化，所以为获得稳定的单克隆细胞株需经2～3次的再克隆才成。应该注意的是，每次克隆化过程中所有有意义的细胞都应冷冻保存，以便重复检查，避免丢失有意义的细胞。（3）软琼脂法：将杂交瘤细胞稀释到一定密度，然后与琼脂...
单克隆挑不出如何解决(单克隆,转染,细胞液,稀
你确定每孔1-2个细胞了吗？分完孔当然要在镜下确认每孔的细胞。如果有细胞长不起来，有可能是折腾时间太久，细胞状态不好了。细胞还贴壁吗？如果贴壁接换回液。单克隆化没什么技巧。单克隆荧光阳性细胞的挑选：荧光蛋白标记的细胞以荧光倒置显微镜和FACS检测荧光细胞百分比，必要时重复转染一次，有限稀释...
单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体.这种技术即称为单克隆抗体技术。单克隆抗体制备的过程：免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB\/c小鼠，按照...
如图是单克隆抗体制备过程。请据图回答问题
（三）饲养细胞 在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞称之为饲养细胞（Feedercell）。在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物...
单克隆抗体制备过程中第一步,需从几种细胞中筛选出杂交瘤细胞
一般问这个问题之前都有一个限制条件，假设细胞都两两融合。这样就是从三种细胞中筛选出杂交瘤细胞。
在利用细胞融合的基础上单克隆是哪种细胞杂交技术
相关知识：动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动物细胞融合和动物体细胞杂交是一个概念。制备单克隆抗体的技术基础是动物细胞融合。核移植技术是另一类型的动物细胞工程，包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植。细胞融合是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括...
单克隆技术是什么
单克隆技术是不是只用该细胞的一半基因复制出另一半基因再培养出来个体的技术，该个体就是传说中的纯种！！
大量单克隆抗体的制备方法?
由于中空纤维的孔径对细胞和大分子物质有滞留作用,故营养物质和代谢废物可以自由出入其孔径。该培养系统占地空间小,生产成本低,培养的细胞密度大并可获得高质量的抗体。微囊化细胞培养法是先将单克隆细胞包埋在具有亲水性的半透膜微囊里,然后将此微囊放置在培养液中进行培养。微囊内部是微小培养环境,它将...
求大神讲解一下单克隆筛选的原理,最好通俗一点哈
谢邀！细胞单克隆筛选 细胞单克隆筛选是根据细胞所具有的特性将单个细胞从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,是抗体制备细胞株优化、稳转细胞株构建、药物靶点筛选等应用中重要的一环,优质的单克隆细胞能够更好地为不同领域科学研究和药物研发提供支持。通俗的讲:就是将混合细胞通过3D打印技术（更精准高效...
东城区消朦回答： 1. 材料1) 小鼠(Balb/c或C57小白鼠)若干只.2) 11.6%蔗糖溶液(经10磅30min高压灭菌).2. 操作方法1) 拉颈处死小鼠.2) 70%酒精浸泡消毒10min.3) 用手copy术剪将小鼠腹部剪开一小口,剥开皮肤,露出腹腔.4) 用注射器将4ml ...
须士19876126523问： 细胞 在96孔板 怎么 挑取单个克隆细胞 - ？
东城区消朦回答： 无限稀释法,就是铺到96板的一个孔,然后倍数稀释下去,到最后就会有一个细胞的孔,还有就是细胞计数,然后再铺96孔,也会出现一个细胞,但是对于挑单克隆来说,我觉得没必要单个细胞,单个细胞也不容易长起来,虽然挑克隆可能是混转的,但是不会影响实验需求.
须士19876126523问： 单克隆抗体的细胞选择 - ？
东城区消朦回答： (一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠. (2)1640培养液(3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠. (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾. (3)把脾放入5ml...
须士19876126523问： 详细叙述2 - 3种目的基因制备的方法. - ？
东城区消朦回答： 一个是挑单克隆,从生物组织细胞提取出全部DNA,用物理方法(超声波、搅拌剪力等)或酶法(限制性核酸内切酶的不完全酶解)将DNA降解成预期大小的片段,然后将这些片段与适当的载体(常用噬菌体、粘粒或YAC载体)连接,转入受体细菌或细胞,这样每一个细胞接受了含有一个基因组DNA片段与载体连接的重组DNA分子,而且可以繁殖扩增,许多细胞一起组成一个含有基因组各DNA片段克隆的集合体 二是直接设计目的基因的引物,用PCR法扩增 三十直接芯片捕获,设计包含目的基因的探针,从生物组织细胞提取出全部DNA,DNA打断,建库,芯片杂交,洗脱,富集.
须士19876126523问： 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 - ？
东城区消朦回答： 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...
须士19876126523问： 如何筛选动物单克隆抗体 - ？
东城区消朦回答： 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...
须士19876126523问： 求分子克隆具体实验步骤一份~~多谢各位大侠啦~ - ？
东城区消朦回答： 分子克隆实验流程 第一天 一:目的片段的扩增(PCR) PCR反应的基本成分包括:模板DNA(待扩增DNA)、引物、4种脱氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和适宜的缓冲液.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的高...
须士19876126523问： 简述单克隆抗体的制备过程 - ？
东城区消朦回答： 1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的B淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体)5.对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞;6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!
须士19876126523问： 运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是()①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特... - ？
东城区消朦回答：[选项] A. ②④③⑦⑤①⑥⑧ B. ②③④⑦①⑤⑥⑧ C. ④③⑦②⑤①⑧⑥ D. ③④⑦①⑤⑧⑥②
须士19876126523问： 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及以下三个筛选过程: ①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ②选出能 - ？
东城区消朦回答： 2一定第一个,然后是1,注意这里的多种杂交瘤细胞能产生不同的抗体,所以3最后.选c
