基因克隆载体需要有哪几个条件？

基因工程中常用哪两类克隆载体？举例说明理想质粒载体应具备什么条件？~

克隆载体（Cloning
Vector）：通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒，噬菌粒，酵母人工染色体。

用人工方法取得目的基因的适宜载体，即质粒（一种环状双链DNA）或病毒。

基因克隆载体必须具备三个条件，具有能使外源DNA片段插入的克隆位点；能携带外源DNA进入受体细胞，或游离在细胞质中进行自我复制，或整合到染色体DNA上随染色体DNA的复制而复制；必须具有选择标记，以便筛选承载外源DNA的受体细胞。

目前原核受体细胞的载体主要有细菌质粒（松弛型）和λ噬菌体两类，真核细胞受体的载体主要有SV40病毒（用于动物转化）和Ti质粒（用于植物转化）。

基因工程的上游工程主要是目的基因的制取和无性繁殖。具体地说是从生物体的组织、器官或细胞制取目的基因或者人工合成目的基因，将目的基因与载体的DNA拼接，使重组体分子导入受体细胞，筛选和进行无性繁殖。这个过程可以称为基因克隆(gene cloning)。 基因克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术，可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段，将目的基因导入寄主细胞，在宿主细胞内目的基因被大量的复制。
基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。基因控制蛋白质合成，是不同物种以及同一物种的不同个体表现出不同的性状的根本原因，即所谓"种瓜得瓜，种豆得豆"，"一母生九子，九子各不同"。基因通过DNA复制及细胞分裂把遗传信息传递给下一代，并通过控制蛋白质的合成使遗传信息得到表达。

“分”是指分离制备合格的待操作的DNA，包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的DNA。"切"是指用序列特异的限制性内切酶切开载体DNA，或者切出目的基因；"连"是指用DNA连接酶将目的DNA同载体DNA连接起来，形成重组的DNA分子；"转"是指通过特殊的方法将重组的DNA分子送入宿主细胞中进行复制和扩增；"选"则是从宿主群体中挑选出携带有重组DNA分子的个体。基因工程技术的两个最基本的特点是分子水平上的操作和细胞水平上的表达，而分子水平上的操作即是体外重组的过程，实际上是利用工具酶对DNA分子进行"外科手术"。

基因克隆载体的基本要求:
1.载体应该是一个独立的复制子，含有复制起点，可在细胞中进行自助复制。
2.含有若干限制酶的单一切点，将该处切割后，即可插入外源DNA。
3.含有选择标记，便于将重组载体与原始载体区分开来。
4.载体应尽可能小，只保留必须序列，而删除其中的非必须序列。
5.具有一定的安全性，在胞内不发生重组与转移，在胞外不能自由扩散。

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集贤县15333953896： 何谓基因克隆载体?基因克隆载体至少具备哪三个条件?常用有哪几类 - ？
乐正韩骨炎： 基因载体就是能将基因送入到宿主细胞中的运载体,选择基因载体的条件为:1:能够在宿主细胞中复制并稳定的保存.2:具有多个表达基因的切点,以便与外源基因拼结.3:有某些特殊基因,以便进行筛选.

集贤县15333953896： 基因工程运载体的必备条件 - ？
乐正韩骨炎： 基因工程中使用的运载体一般是从大肠杆菌中提取的质粒,此外还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等.运载体一般要具备以下条件: 1、要有启动子、终止子(都是有特殊结构的DNA片段). 2、要有标记基因(能把已经导入目的基因的细胞筛选出来.一般都是抗性基因.也就是说运载体上有标记基因(抗性基因),把这种运载体导入受体细胞了,受体细胞就能在特殊的培养液中成活,否则细胞就不能成活.) 3、要有一个或多个酶切位点,限制酶要从酶切位点把运载体切开,这样目的基因才能导入 4、在细胞中能够进行自我复制(跟条件1一样,说启动子和终止子一般是回答基因表达载体都应具备哪些条件.) 5、对受体细胞无害

集贤县15333953896： 1质粒作为基因工程的载体应具备那些条件? - ？
乐正韩骨炎：[答案] 目前所用的载体有细菌的质粒(如大肠杆菌质粒)、噬菌体或病毒,更多的是经过人工改造的一些载体.用于分子克隆的载体都应具备下述条件: ① 在细胞内能自主复制,即具有复制原点,可以使所携带的外源DNA在受体细胞内忠实地复制; ② 有...

集贤县15333953896： 作为基因工程载体,其应具备哪些条件 - ？
乐正韩骨炎： 1、在宿主细胞中能保存下来并能大量复制,且对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动. 2、有一定的标记基因,便于进行筛选.如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因.一...

集贤县15333953896： 基因工程的载体需要具备那些条件? - ？
乐正韩骨炎： 能自我复制;有一个或多个酶切位点;有标记基因位点;对受体细胞无害

集贤县15333953896： 基因工程中常用哪两类克隆载体?举例说明理想质粒载体应具备什么条件? - ？
乐正韩骨炎： 质粒载体、噬菌体载体 理想质粒载体条件:2113 1. 具有复制起始点 2. 具5261有两种以上易被检测的选择性标记 3. 在选择标记上具有多种限制酶的单一切点 4. 具有尽可能小的相对分子质量 5. 应属于松弛复制型 6. 应为非传递性质粒理想值粒...

集贤县15333953896： 基因工程载体应具备的几个主要特征是什么 - ？
乐正韩骨炎：[答案] 基因工程对载体的要求: (1)在宿主细胞内能独立复制. (2)有选择性标记. (3)有一段多克隆位点.外源DNA插入其中不影响载体的复制. (4)分子量小,拷贝数多. (5)容易从宿主细胞中分离纯化.

集贤县15333953896： 基因克隆的载体有哪些基本特征 - ？
乐正韩骨炎： 1.要有可转移性 已进入宿主细胞 2.要有自主复制或者是整合功能 能携带目的基因一起稳定复制或表达 3.要是足够大的装载量 如plasmid 15kb YAC 400kb 4.要有合适的筛选标记 便于筛选 5.有合适的多克隆位点 便于目的基因的插入 6.要足够安全

集贤县15333953896： 质粒作为载体必须具备的条件 - ？
乐正韩骨炎： (1)要具有限制酶的切割位点(2)要有标记基因(如抗性基因)以便于重组后重组子的筛选 (3)能在宿主细胞中稳定存在并复制 (4)是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来 2、最常用的载体是质粒,它是一种裸露的,结构简单的,独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子 3、其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒 质粒的本质是小型环DNA 质粒上具有复制原点,能自我复制 质粒是基因工程最常用的运载体

集贤县15333953896： 基因工程载体应具备的几个主要特征是什么 - ？
乐正韩骨炎： 基因工程对载体的要求:(1)在宿主细胞内能独立复制.(2)有选择性标记.(3)有一段多克隆位点.外源DNA插入其中不影响载体的复制.(4)分子量小,拷贝数多.(5)容易从