克隆子的筛选方法
作者&投稿：检静 （若有异议请与网页底部的电邮联系）
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山南地区(管辖1 2个县) 乃东县、扎囊县、贡嘎县、桑日县、琼结县、洛扎县、加查县、隆子县、曲松县、措美县、 错那县、浪卡子县。 日喀则地区(管辖17个县、1个县级市)�日喀则市、南木林县、江孜县、定日县 、萨迦 县、拉孜县、昂仁县、谢通门县、白朗县、仁布县、康马县、定结县、仲巴县、 亚东县、吉...
仙居县锋可回答：[答案] 最常见的就是蓝白斑筛选,详细的楼主可参考这个http://baike.baidu.com/view/161221.htm 方法很多,除蓝白斑筛选外,像 菌落PCR验证:详见http://baike.baidu.com/view/4118663.htm 从细菌里提取质粒后双酶切验证:用构建重组质粒时的两种限制...
山朗13080362367问： 如何获取目的基因 - ？
仙居县锋可回答： A:从基因组文库中获取 B:从cDNA文库中获取 C:从含目的基因生物细胞中获取
山朗13080362367问： 基因克隆筛选的几种方法和相关的技术特征有哪些 - ？
仙居县锋可回答： 这是一套通用方法,简单方便.利用目的基因筛选就要考虑各种情况,很麻烦:能否顺利表达(克隆载体不表达,原核真核,修饰定位、辅因子等等);是否便于筛选(抗生素筛选很方便,如果目的基因是酶、转录因子或结构蛋白,怎么筛选?);不能通用(每研究一种蛋白,就要换一种载体/宿主/筛选方法)...
山朗13080362367问： 怎样从基因文库中找出目的基因 - ？
仙居县锋可回答： 基因工程技术首先要获取目的基因:获取目的基因的途径是从生物中直接提取或人工合成.从生物中直接提取则是要构建基因文库.反转录法属于构建基因文库还是人工合成?获取目的基因的方法是:1从基因文库中获得.目的基因片段的获取...
山朗13080362367问： 什么叫阳性克隆筛选法? - ？
仙居县锋可回答：[答案] 目的建立一个简便、可靠的重组阳性克隆的筛选方法.方法应用扩增小鼠生精细胞凋亡相关基因时使用的引物,以基因重组扩增后得到的菌落为模板,直接进行PCR扩增.结果在筛选的阳性菌落中可扩增到与小鼠凋亡相关基因片段大...
山朗13080362367问： 基因克隆中蓝白斑筛选法筛选阳性克隆的原理. - ？
仙居县锋可回答： 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等.现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息.在这...
山朗13080362367问： 目的基因的获取 - ？
仙居县锋可回答： 选修三的1.2基因工程基本操作中的目的基因获取主要介绍了两种方法.一、从基因文库中获取目的基因.形象的说,就是相当于“从图书馆中找到你要的那本图书”.基因文库是前人已经构建好的受体菌群体,整个群体已经包括所有该物种的基因,你只需要通过目的基因的位置或转录产物mRNA、蛋白质等的特异性的表现,与基因文库中的基因产物一致性找出文库中的目的基因.二、通过PCR扩增获取目的基因.关键是设计目的基因上游的引物,通过DNA复制,从引物开始延伸出引物后的DNA序列,从而得到你要的目的基因. 3,我最近学的还有 化学法 是知道了核苷酸序列 用人工合成的方法得到
山朗13080362367问： 如何从基因文库中找到所需要的基因? - ？
仙居县锋可回答： 从基因文库中筛选某一克隆的常用办法是分子杂交.首先把属于一个文库的细菌或噬菌体以较低密度接种在培养皿上以取得相当分散的菌落或噬菌斑,然后用硝酸纤维滤膜吸印,使培养皿和滤膜的相对应的位置上具有相同的克隆.同时另行制备...
山朗13080362367问： 筛选检测基因克隆的各种方法的适用范围和应用条件？
仙居县锋可回答： 筛选检测一个基因克隆,按照操作流程可能会依次用到以下方法: 1. 基因的克隆构建(通常是构建到表达载体上) 其中可能涉及到的技术包括PCR技术、限制性酶切、抗性筛选、质粒小量提取等 2. 克隆基因载体的鉴定 其中可以涉及到的技术包括PCR技术、限制性酶切、DNA测序等 3. 克隆基因功效的检测 其中可能涉及到质粒的大量提取、质粒的转染、RNA和蛋白质的提取、实时定量PCR、Western Blot技术等等
