如何筛选动物单克隆抗体
第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，用连续注射抗原，下面具体介绍一下：
1、在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的，经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异，所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞；
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。
拓展资料：
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
参考资料：单克隆抗体百度百科：网页链接
A 第一次筛选的原理与方法：第一次筛选是杂交瘤细胞的选择性培养。采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）,其依据是细胞中的DNA合成有两条途径(D途径和S途径），在HAT培养液中，未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“D途径”被氨基喋呤阻断，虽“S途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型（HGPRT）细胞，因此自身没有“S途径”，且“D途径”又被氨基喋呤阻断，所以在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的“S途径”，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。
B 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养.
第一次筛选的原理与方法：细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）.其依据是细胞中的DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“D途径”）,即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,为DNA分子的合成提供原料.在此合成过程中,叶酸作为重要的辅酶参与这一过程,而HAT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物,可以阻断DNA合成的“D途径”.另一条途径是应急途径或补救途径（“S途径”）,它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸,两种酶缺一不可.因此,在HAT培养液中,未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“D途径”被氨基喋呤阻断,虽“S途径”正常,但因缺乏在体外培养液中增殖的能力,一般10d左右会死亡.对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言,由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型（HGPRT）细胞,因此自身没有“S途径”,且“D途径”又被氨基喋呤阻断,所以在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡.惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞,既具有效应B细胞的“S途径”,又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性,因此能在HAT培养液中选择性存活下来,并不断增殖.
第二次筛选的原理和方法：在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞.通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞）,再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养.
如何筛选动物单克隆抗体
单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法：细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨...
单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。
在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选?
（1）筛选对象：多克隆杂交瘤细胞群体。（即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。）（2）筛选方法：抗体检测（ 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等，实际上是利用稀释法，在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养，然后检查每孔中产生特定抗体的能力）。（3）筛选结果：产生专一性抗体的杂交瘤细胞。
单克隆抗体的两次筛选剂 以及原因
B 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养.
单克隆抗体制备筛选过程
多次筛选才能基本保证生产的成功。至于第二个问题，之所以要融合骨髓瘤细胞（其实就是我们所说的癌细胞），就是要发挥它能够无限增殖的特点，尽可能产生大量的抗体。尽管它有这个能力，但必须提供合适的环境。小鼠体内和体外的培养基都可以提供营养物质使其快速增殖 希望能帮到你！~
单克隆抗体制备过程要用什么培养基筛选
需要两次筛选。第一次，使用选择培养基，将杂交瘤细胞筛选出来。第二次，需要进行克隆化培养和抗体检测。这一步在课本上没有介绍培养基，但是题目中涉及说是多孔培养基。
单克隆抗体
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB\/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体...
单克隆抗体的制备步骤
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化：在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备：单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。
单克隆抗体的制备中哪两部需要筛选的?
1、细胞融合后需筛选出杂交瘤细胞 （因为有的细胞是B细胞和B细胞融合 有的是杂交瘤和杂交瘤细胞融合）2、第一步筛选后培养 再筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 用于扩大培养生产
单克隆抗体的制备,克隆化培养是在第一次筛选后还是第二次,抗体检测呢...
诱导淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合之后，在HAT培养基上培养即可筛选出杂交瘤细胞（第一次筛选），此时得到每个杂交瘤细胞只能产生一种抗体，但不同的杂交瘤细胞可能产生不同的抗体，故需利用免疫学方法筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，此过程往往需要重复多次（第二次筛选），然后进行克隆化培养并提取抗体进行...
祁莲奥广： 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...
尚志市18854771575： 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 - ？
祁莲奥广： 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...
尚志市18854771575： 单克隆抗体细胞的选择的实验步骤. - ？
祁莲奥广： 1. 材料1) 小鼠(Balb/c或C57小白鼠)若干只.2) 11.6%蔗糖溶液(经10磅30min高压灭菌).2. 操作方法1) 拉颈处死小鼠.2) 70%酒精浸泡消毒10min.3) 用手copy术剪将小鼠腹部剪开一小口,剥开皮肤,露出腹腔.4) 用注射器将4ml ...
尚志市18854771575： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
祁莲奥广：[答案] 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述
尚志市18854771575： 生产单克隆抗体通常涉及三个筛选过程: ①选出杂交瘤细胞 ②选出能产生特定抗体的B淋巴细胞 ③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群 这三个过程的... - ？
祁莲奥广：[选项] A. ②③① B. ③①② C. ②①③ D. ①③②
尚志市18854771575： 关于单克隆抗体的筛选问题 - ？
祁莲奥广： 第一次是筛选出杂交瘤细胞,第二次是筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞
尚志市18854771575： 运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是()①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特... - ？
祁莲奥广：[选项] A. ②④③⑦⑤①⑥⑧ B. ②③④⑦①⑤⑥⑧ C. ④③⑦②⑤①⑧⑥ D. ③④⑦①⑤⑧⑥②
尚志市18854771575： 如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图.请根据示意图回答下列问题.(1)单克隆抗体技术是___技术中最重要的用途.将特定的抗原注入小鼠体内,其目的是使... - ？
祁莲奥广：[答案] (1)单克隆抗体技术是动物细胞融合技术中最重要的用途.将特定的抗原注入小鼠体内,使小鼠产生浆细胞.(2)单克隆抗体的化学本质是球蛋白;涉及到的细胞器是核糖体、内质网、高尔基体、线粒体.(3)骨髓瘤细胞与...
尚志市18854771575： 单克隆抗体的制备方法 - ？
祁莲奥广： 常用方法:从经特定抗原刺激的动物体内抽取浆细胞,再与骨膸瘤细胞融合,经两次筛选即可获得杂交瘤细胞,然后进行克隆化培养,即可获得细胞产物----单克隆抗体.
尚志市18854771575： 关于单克隆抗体的不正确叙述是() - ？
祁莲奥广： B 单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体.(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
