单克隆抗体的制备中哪两部需要筛选的?

作者&投稿:刘适 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别~


第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下:
1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞;
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

拓展资料:
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
参考资料:单克隆抗体百度百科:网页链接

1、细胞融合后需筛选出杂交瘤细胞 (因为有的细胞是B细胞和B细胞融合 有的是杂交瘤和杂交瘤细胞融合)

2、第一步筛选后培养 再筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 用于扩大培养生产

1.筛选出杂交瘤细胞
2.从杂交瘤细胞中筛选出能合成单克隆抗体的


动物细胞工程单克隆抗体的制备
动物细胞工程中,单克隆抗体的制备技术基于免疫反应、细胞融合和动物细胞培养等原理。首先,B淋巴细胞在抗原刺激下分化增殖,产生具有特异性抗体的能力。然而,B细胞的这种功能有限,通过与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,可解决这一问题。杂交瘤细胞结合了B细胞的特异性抗体产生能力和骨髓瘤细胞的...

制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂
制备单克隆抗体常用的诱导剂有:化学诱导剂——聚乙二醇(PEG)、生物诱导剂——灭活的病毒(常用灭活的仙台病毒)。具体操作方法如下:(1)仙台病毒法融合:①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两 细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到...

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。单克隆抗体制备的意义:用于以下各种生命科学...

用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,可在HAT选择培养基长期存活的是...
作用下,利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA,缺少其中一种,DNA合成不能发生。由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的杂交瘤细胞,其合成DNA的主要途径虽然被甲氨蝶呤阻断,但由于与脾细胞融合,可获得其HGPRT,利用次黄嘌呤合成嘌呤碱,最终与嘧啶一起合成DNA。因此,只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖。

在单克隆抗体制备过程中B淋巴细胞(记为B)与骨髓瘤细胞(记为A)融合...
不一定,将两者放入以后,细胞结合是随机的,无选择性的。因此会由AA,BB.AB三种。这也是“第一次”筛选的原因

单克隆抗体制备中诱导细胞融合的手段有哪些
诱导细胞融合的方法有三种:生物方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(电激和激光)。某些病毒如:仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein),可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法...

单克隆抗体是什么
2、制备单克隆抗体的方法制备单克隆抗体的方法通常包括以下几个步骤:首先,通过免疫动物(如鼠、兔)注射目标抗原,激发其免疫系统产生多种抗体。其次,将淋巴细胞从免疫动物的脾脏或淋巴结中分离出来,融合到一种称为骨髓瘤细胞的恶性细胞上,生成“杂交瘤(hybridoma)”细胞株。这些细胞株同时具有淋巴...

单克隆抗体是什么
详细解释:1. 定义与来源:单克隆抗体是指从单一的免疫细胞克隆产生的同一种高度纯化的抗体。当免疫系统遭遇外来抗原时,会产生抗体进行防御。单克隆抗体技术通过特定的实验室手段,将这种自然免疫反应进行放大和特定化。2. 技术过程:单克隆抗体的制备通常涉及将特定的免疫细胞与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤...

抗体的制备有哪些?
抗体可以通过多种方法制备,其中最常见的包括多克隆抗体制备、杂交瘤技术制备单克隆抗体以及基因工程抗体技术。多克隆抗体制备是最早使用的抗体制备方法。它利用抗原刺激机体,使机体产生免疫反应并生成多种抗体。这种方法相对简单,成本较低,但需要从免疫动物(如兔、羊等)的血清中提取抗体,因此抗体的特异...

制备单克隆抗体的过程
(一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb\/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2...

定海区19157367276: 单克隆抗体的制备中哪两部需要筛选的? -
伊侵冠心: 1、细胞融合后需筛选出杂交瘤细胞 (因为有的细胞是B细胞和B细胞融合 有的是杂交瘤和杂交瘤细胞融合)2、第一步筛选后培养 再筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 用于扩大培养生产

定海区19157367276: 单克隆抗体需哪2次筛选? -
伊侵冠心: 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述

定海区19157367276: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
伊侵冠心: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

定海区19157367276: 单克隆抗体的问题 -
伊侵冠心: 两次筛选:第一次是筛选出杂交瘤细胞(同种细胞间的融合就不是如淋巴B细胞-淋巴B细胞)第二次是为了筛选出具有特异性抗体的杂交瘤细胞)望采纳~~祝你学习进步.

定海区19157367276: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别?___. -
伊侵冠心:[答案] 单克隆抗体制备过程中共有2次筛选,一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.这两次筛选的原理和方法不同:第一次筛选的原理是细胞中DNA合成有2种途径,方法是用选择培养基进行筛选;第二...

定海区19157367276: 细胞工程中,制备单克隆抗体时,需要经过三次筛选检测,这三次的目的是什么? -
伊侵冠心:[答案] 记得只经过两次筛选 第一次是筛选杂交瘤细胞 第二次是筛选能够产生单一抗体的杂交瘤细胞 当筛选完毕就可以进行体内或体外培养了

定海区19157367276: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别 -
伊侵冠心: 这好像是高中生物吧 先说骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,共有3种情况,B淋巴和B淋巴融合,B淋巴和骨髓瘤细胞融合,骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合 第一次筛选是为了筛选出能无限增殖的细胞,这只有两种情况: 1、经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 2、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 第二次是为了筛选出能产生单克隆抗体的细胞 那么只可能是,经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞. 所以有两次筛选

定海区19157367276: 如何筛选动物单克隆抗体 -
伊侵冠心: 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...

定海区19157367276: 单克隆抗体制备过程中效应B细胞需要筛选吗 -
伊侵冠心: 当然要筛选,筛选能产生所需要抗体的那种效应B细胞! 一种抗原刺激,机体会产生许多B 淋巴细胞,因为某一种抗原会有许多抗原决定簇,这些B淋巴细胞产生的分别是针对同一抗原的不同抗原决定簇的抗体,,所以才会存在血清抗体纯度低的问题,在单克隆抗体制备过程中,第一次筛选杂交瘤细胞,第二次筛选是要得到可以产生所需的“特异性”抗体的杂交瘤细胞

定海区19157367276: 制备单克隆抗体过程,是需要两次筛选还是三次筛选?为什么? -
伊侵冠心: 两次. 第一次是筛选出杂交瘤细胞,第二次是筛选出能产生特异抗体的杂交瘤细胞.

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