单克隆抗体制备筛选过程

作者&投稿:解巩 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别~


第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下:
1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞;
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

拓展资料:
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
参考资料:单克隆抗体百度百科:网页链接

因为目前的技术达不到100%准确融合,而且融合细胞的生命力、是否融合后突变也不确定。如果在融合后突变,不同时间所分泌的抗体就不能保持同样的结构与机能,产品的均一性、效果都要大打折扣。因此两次筛选只是教材的简化,多次筛选才能基本保证生产的成功。

至于第二个问题,之所以要融合骨髓瘤细胞(其实就是我们所说的癌细胞),就是要发挥它能够无限增殖的特点,尽可能产生大量的抗体。尽管它有这个能力,但必须提供合适的环境。小鼠体内和体外的培养基都可以提供营养物质使其快速增殖

希望能帮到你!~


制备单克隆抗体时为什么,第一次筛选时为什么会有多种杂交瘤细胞_百度知 ...
因为做完细胞融合后,存在5种细胞:未融合的骨髓瘤细胞、未融合的B细胞、两两融合的骨髓瘤细胞,两两融合的B细胞,以及骨髓瘤细胞和B细胞的融合细胞,而只有最后一种是我们所需要的。因此要做营养缺陷筛选选出杂合细胞。楼上说的是第二步筛选,即筛选产生所需抗体的杂交瘤细胞。最后一种,即骨髓瘤细胞...

采用细胞工程技术生产单克隆抗体融合后的细胞经筛选后还需要进行什么处...
还需要进行克隆化培养和抗体检测,目的是筛选出能产生所需特异性抗体。

为什么在制作单克隆抗体时,对已经选出的杂交瘤细胞还需要进一步的进行筛 ...
因为杂交后有三种情况,瘤瘤型,抗抗型,抗瘤型(包括瘤抗型),只有抗瘤型是符合要求的,所以还要进行筛选,把瘤瘤型和抗抗型分离出去。

1.单克隆抗体制备和植物体细胞杂交都需要筛选且筛选目的相同
单克隆抗体制备实质是动物细胞杂交,植物体细胞杂交和它原理一样的,都是两个体细胞融合然后染色体选择性丢失最后稳定成一个新的杂交细胞。杂交结果不确定肯定是要筛选,但目的不一样。单克隆抗体制备中,杂交细胞要既能产生大量所需抗体又能无限增殖,最终所需的是代谢产物(单抗);植物体细胞杂交不存在...

单克隆抗体的制备过程中,检验阳性是什么意思?
单抗的制备中,经筛选后的杂交瘤细胞产生的抗体是不一样的,其中有些是我们所需要的单克隆抗体,所以要把筛选后的杂交瘤细胞在多孔板上培养,每个小孔中只有一个细胞,然后用抗原去试,呈阳性的就是能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

高中生物实验中哪些用到筛选这个步骤
高中生物实验中用到筛选这个步骤的有:1.肺炎双球菌转化实验:艾弗里做体外转化实验时,将s型菌的DNA,蛋白质,多糖等物质分离提纯,用它们分别培养细菌后需要进行筛选,选出生长s型菌的实验组。2.单克隆抗体的制备实验:得到三种融合后的细胞时,需要筛选出杂交瘤细胞。3.杂交育种实验:通过杂交,得到...

小鼠单克隆抗体的制备过程是怎样的?义翘神州可以提供抗体制备服务...
扩增:将筛选出的单克隆抗体杂交瘤细胞扩增并收集其上清液。纯化:利用蛋白A\/G亲和层析等技术对单克隆抗体进行纯化和富集。鉴定:通过Western blot、ELISA等方法鉴定单克隆抗体的特异性和亲和力等特性。总的来说,小鼠单克隆抗体制备需要耗费时间和精力,但在科研领域中仍然是广泛应用的一种技术手段。义翘神州...

单克隆抗体
通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。5.单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的...

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的...

单克隆抗体需哪2次筛选?
第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述

抚松县19651121131: 简述单克隆抗体的制备过程 -
范狗海伦:[答案] 1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的B淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只...

抚松县19651121131: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
范狗海伦: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

抚松县19651121131: 生产单克隆抗体通常涉及三个筛选过程: ①选出杂交瘤细胞 ②选出能产生特定抗体的B淋巴细胞 ③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群 这三个过程的... -
范狗海伦:[选项] A. ②③① B. ③①② C. ②①③ D. ①③②

抚松县19651121131: 制备单克隆抗体需要进行几次筛选,目的分别是什么? -
范狗海伦:[答案] 两次.第一次是筛选出浆细胞—浆细胞融合细胞 和 浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(抗原抗体反应) 第二次是筛选出浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(继续培养)

抚松县19651121131: 如何筛选动物单克隆抗体 -
范狗海伦: 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...

抚松县19651121131: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别?___. -
范狗海伦:[答案] 单克隆抗体制备过程中共有2次筛选,一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.这两次筛选的原理和方法不同:第一次筛选的原理是细胞中DNA合成有2种途径,方法是用选择培养基进行筛选;第二...

抚松县19651121131: 下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图 -
范狗海伦:[答案] 抗原制备——动物免疫——细胞融合——筛选建株——抗体生产

抚松县19651121131: 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及到以下三个筛选过程,这三个过程的先后顺序是 ( )①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的效应B... -
范狗海伦:[选项] A. ②③① B. ③①② C. ②①③ D. ①③②

抚松县19651121131: 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及以下三个筛选过程: ①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ②选出能 -
范狗海伦: 2一定第一个,然后是1,注意这里的多种杂交瘤细胞能产生不同的抗体,所以3最后.选c

抚松县19651121131: 如图表示单克隆抗体的制备过程,据图回答下列问题:(1)制备单克隆抗体的步骤:a.将__ - 注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞.b.通过图中②过... -
范狗海伦:[答案] (1)制备单克隆抗体的步骤:a.将特异性抗原注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞.b.通过图中②过程获得的细胞为骨髓瘤细胞,其特征为:无限增殖、形态结构发生显著变化、细胞膜上糖蛋白等物质减少.c.将诱...

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