单克隆抗体

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单克隆抗体是采用克隆技术产出的抗体,对于很多疾病的诊断、治疗具有很重要的作用,特别是在恶性肿瘤领域,为免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。因此,很多人对单克隆抗体的产生非常的好奇。那么,单克隆抗体制备过程是怎样的?下面咱们就来详细看看吧。

制备过程

1. 免疫动物

免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。

2.细胞融合

采用二氧化碳气体处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。

3.选择性培养

选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。

4.杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化

在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。

5.单克隆抗体的大量制备

单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。

(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。

(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。




单克隆抗体与常规抗体比较有什么特点 高二生物
单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优势在于特异性强,灵敏度高,可大量制备,所以单克隆抗体与常规抗体相比,具有特异性强,灵敏度高,纯度高,产量高等特点。单克隆抗体的理化性状高度均一,生物活性单一,与抗原结合的特异性强,便于人为处理和质量控制,并且来源容易,所以一问世便受到欢迎和重视,...

何谓单克隆抗体?试述其优越性和具体应用。
单克隆抗体是指从一株单细胞克隆所产生、针对复合抗原分子上某一种抗原决定簇的特异性抗体。其优越性为纯度高、专一性强、效价高。表现在:①大大提高了血清学试验在诊断某些疾病上的特异性和敏感性;②用来区分T细胞亚群;③获得纯化的抗体或使用针对肿瘤特异性抗原决定簇的单克隆抗体携带抗肿瘤药来治疗...

制备单克隆抗体常用什么作为诱导剂
制备单克隆抗体常用的诱导剂有:化学诱导剂——聚乙二醇(PEG)、生物诱导剂——灭活的病毒(常用灭活的仙台病毒)。具体操作方法如下:(1)仙台病毒法融合:①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两 细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到...

单克隆抗体是什么意思?
单克隆抗体意思 定义1:高度均质性的特异性抗体,由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞。 定义2:只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体,来自单个B淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。

1、什么是单克隆抗体?有哪些优点和缺点? 2、简述单克隆抗体的基本过程...
单克隆抗体是利用体外培养技术生产的抗体,它由于是由一个细胞分裂而来的,所有只含有一种抗体。单克隆抗体的优点是:理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制,并且来源容易。这些优点使其广泛应用于抗肿瘤等领域 缺点就是生成的抗体只针对1种抗原决定簇,比较单一。

单克隆抗体的原理
定义:由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位(抗原决定簇)的高纯度抗体。原理:动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞(浆细胞)和...

单克隆抗体是什么
1、单克隆抗体的概念单克隆抗体,英文名为MonoclonalAntibody(mAb),是指由单一克隆B细胞株所产生的能够特异性结合单一抗原的抗体。与传统的多克隆抗体相比,单克隆抗体的优点在于其结构单一性和特异性强。研究者可以选择性地制备针对某一特定生物分子的单克隆抗体,进而精确监测、分离这些分子,以及开发新...

单克隆抗体的制备过程高中生物
高中生物单克隆抗体基础知识点如下:一、区别单克隆抗体和多克隆抗体。多克隆抗体:抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。当病原体入侵人体,能够刺激机体免疫系统产生大量的多...

单克隆抗体有什么特点?
单克隆抗体是针对多克隆抗体来分类的 顾名思义,单克隆抗体就是指只有一个克隆位点结构的抗体。由这个结构决定了其只能识别某一特定抗原表位。所以单克隆抗体的特点就是超高的特异性和灵敏度。主要应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。

单克隆抗体的特点
单克隆抗体的特点是理化性状高度均一生物活性单一与抗原结合的特异性强便于人为处理和质量控制,并且来源容易这些优点使它一问世就受到高度重视,并广泛应用于生物学和医学研究领域 1 作为亲合层析的配体 单克隆抗体能与其相应。顾名思义,单克隆抗体就是指只有一个克隆位点结构的抗体由这个结构决定了其只能...

陕西省18525375828: 单克隆抗体 - 搜狗百科
歧怨甘比:[答案] 单克隆抗体是利用体外培养技术生产的抗体,它由于是由一个细胞分裂而来的,所有只含有一种抗体. 单克隆抗体的优点是:理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制,并且来源容易.这些优点使其广泛应...

陕西省18525375828: 什么叫单克隆抗体? -
歧怨甘比: 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体. 1、单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术. 2、单克隆抗体是亲...

陕西省18525375828: 什么是单克隆抗体?
歧怨甘比: 抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的.每一个B淋巴细胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因.动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体.当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞.被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞(浆细胞)和记忆B细胞,大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中.如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆.单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体.

陕西省18525375828: 什么是单克隆抗体?
歧怨甘比: 单克隆抗体是指在实验室中由一个单一的B细胞产生的相同的抗体.研究者通 过向大鼠体内注射靶抗原,之后将大鼠体内的B细胞和其他的长期生存的细胞融合 在一起来研制单克隆抗体.产生的杂交细胞就成为一种抗体的加工厂,可以产生很多 相同的抗体分子,都是对靶抗原具有特异性的.单克隆抗体可以用来治疗癌症、某些 病毒感染、炎症疾病、某些心血管疾病和器官移植排斥.

陕西省18525375828: 单克隆抗体是什么 -
歧怨甘比: 对专一抗体的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆.单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体.

陕西省18525375828: 什么是单克隆抗体? -
歧怨甘比: (1)单克隆抗体的基本概念 抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的.每一个B淋巴细胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因.动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细...

陕西省18525375828: 什么叫单克隆抗体?
歧怨甘比: 一个是单细胞抗体,另一个是多细胞抗体 . 由单个细胞克隆产生的抗体叫单克隆抗体.他可以和相应抗原的单个抗原决定簇相结合.单克隆抗体在分子结构、氨基酸序列...

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