如何实现细胞的筛选单克隆
细胞筛选有哪些方法
2。用流式细胞仪。如果目标蛋白本身是荧光蛋白，可以直接筛选。否则的话，使用荧光标记的抗体染色以后筛选。3。用磁性细胞分选仪。原理同2类似，只不过识别目标蛋白的抗体是偶联在微小的磁珠上面，而分离过程使用磁柱来吸附与磁珠相结合的细胞。
请教常用的细胞筛选的方法~~
流式细胞计的分选功能是由细胞分选器来完成的。总的过程是:由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴,根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选,而后由充电电路对选定细胞液滴充电,带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转,落入收集器中;其它液体被当作废液抽吸掉,某些类型的仪器也有采用捕获管来进行分选的。 稳...
转染转染细胞筛选
滤纸片法：使用消毒的5x5mm滤纸片浸入胰酶，将其贴在单细胞集落上，然后在24孔板中继续培养，直到形成完整细胞群，再转移至更大培养瓶中进一步培养。有限稀释法：将细胞消化后进行10次连续稀释，将每个稀释度的细胞分别接种于96孔板，7-10天后选择单个克隆生长的孔进行再次克隆。筛选出的单克隆细胞，通过...
求大神讲解一下单克隆筛选的原理,最好通俗一点哈
细胞单克隆筛选是根据细胞所具有的特性将单个细胞从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,是抗体制备细胞株优化、稳转细胞株构建、药物靶点筛选等应用中重要的一环,优质的单克隆细胞能够更好地为不同领域科学研究和药物研发提供支持。通俗的讲:就是将混合细胞通过3D打印技术（更精准高效）\/直接用96孔板分离...
杂交瘤细胞系的产生与筛选?
脾B细胞+骨髓瘤细胞，加聚乙二醇（PEG）促进细胞融合，HAT培养基中培养（内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T）生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。细胞融合物中包含：脾-脾融合细胞：不能生长，脾细胞不能体外培养。骨-骨融合细胞：不能利用次黄嘌呤，但可通过第二途 径利用叶酸还原酶合成嘌呤。氨基...
流式细胞仪中鞘液的作用是什么?谢谢了
细胞的筛选是通过分离含单细胞的液流实现的，此液流就是鞘液。流动室的超高频电晶体充电后振动，使鞘液断裂为均匀液滴，细胞均匀分布在其中，当通过几千分特的偏转板时，在高压电压下偏转，根据带电情况不同落入不同的收集器中。“根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选，而后由充电电路对选定...
如何挑取单克隆?
筛选单克隆细胞的方法多种多样，每一种都旨在确保精确性和效率。有限稀释法通过观察单个细胞的生长，揭示了其潜在的特性；而流式细胞术则以精确的细胞排序技术，实现细胞群体的精细化筛选。微流控单细胞捕获技术，如高通量分析，为大规模分析提供了可能。激光捕获显微切割则在单细胞的精细操作中展现其卓越...
单克隆转染细胞的筛选通常的步骤。
【答案】：单克隆转染细胞的筛选通常的步骤是：在转染24小时后，利用遗传霉素进行新霉素抗性基因的筛选；稳定筛选2周后，在肉眼观察下将形成的单克隆细胞簇消化，制备成单细胞悬液；逐一将单个细胞置于96孔板培养；待单克隆长到相对较大的集落后，于显微镜下挑取细胞集落，转移到24孔板培养；当获得足量...
克隆环克隆环简介
克隆环作为一种简便的单克隆细胞筛选工具，其在实验室中发挥着重要作用。它的主要功能是帮助从培养板或培养皿等基础培养材料中挑选出单一的克隆细胞。在操作过程中，首先，确保克隆环经过严格的灭菌处理，以避免细菌污染。然后，通过涂抹无菌硅脂，实现克隆环的密封，这一步可以选择使用甘油替代，因为甘油同样...
动物细胞融合的筛选方法
基因法。动物体内的动物细胞融合筛选是会选择基因相同的进行融合的，因此是基因法进行筛选的。细胞并没有统一的定义，比较普遍的提法是：细胞是生物体基本的结构和功能单位。
科尔沁右翼中旗妇必回答： 无限稀释法,就是铺到96板的一个孔,然后倍数稀释下去,到最后就会有一个细胞的孔,还有就是细胞计数,然后再铺96孔,也会出现一个细胞,但是对于挑单克隆来说,我觉得没必要单个细胞,单个细胞也不容易长起来,虽然挑克隆可能是混转的,但是不会影响实验需求.
坚仁19723941380问： 单克隆抗体细胞的选择的实验步骤. - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： 1. 材料1) 小鼠(Balb/c或C57小白鼠)若干只.2) 11.6%蔗糖溶液(经10磅30min高压灭菌).2. 操作方法1) 拉颈处死小鼠.2) 70%酒精浸泡消毒10min.3) 用手copy术剪将小鼠腹部剪开一小口,剥开皮肤,露出腹腔.4) 用注射器将4ml ...
坚仁19723941380问： 单克隆抗体两次筛选分别是怎样筛选的? - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答：[答案] 先用HAT培养基,目的是筛选融合细胞. 再用筛选得到的杂交瘤细胞做ELISA,筛选目的细胞株(就是抗你最初所用免疫小鼠蛋白的抗体)
坚仁19723941380问： 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...
坚仁19723941380问： 如何筛选动物单克隆抗体 - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...
坚仁19723941380问： 运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是()①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特... - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答：[选项] A. ②④③⑦⑤①⑥⑧ B. ②③④⑦①⑤⑥⑧ C. ④③⑦②⑤①⑧⑥ D. ③④⑦①⑤⑧⑥②
坚仁19723941380问： 单克隆抗体制备过程中第一步,需从几种细胞中筛选出杂交瘤细胞 - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： 一般问这个问题之前都有一个限制条件,假设细胞都两两融合.这样就是从三种细胞中筛选出杂交瘤细胞.
坚仁19723941380问： 简述人工制备单克隆抗体的方法? - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...
坚仁19723941380问： 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及以下三个筛选过程: ①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ②选出能 - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： 2一定第一个,然后是1,注意这里的多种杂交瘤细胞能产生不同的抗体,所以3最后.选c
坚仁19723941380问： 单克隆抗体的细胞选择 - ？
科尔沁右翼中旗妇必回答： (一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠. (2)1640培养液(3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠. (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾. (3)把脾放入5ml...
