单克隆抗体hat筛选原理

作者&投稿:妫闵 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

如何筛选动物单克隆抗体
单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨...

单克隆抗体制备过程中经过两次筛选
单克隆抗体制备过程中经过两次筛选单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的。第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动...

制备单克隆抗体用于筛选的培养基含有什么
HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列,HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径(de novo pathway)和中间合成途径(salvage pa-thway)。由于氨基蝶呤可阻...

单克隆抗体制备过程
在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞需进一步筛选和克隆化,通过有限稀释法选择能产生特定单克隆抗体的细胞,并进行扩增和鉴定。免疫球蛋白类型、亚类等特性确认后,进行冻存保存。最后,大规模生产单克隆抗体采用两种方法:体内诱生法和体外培养法。体内诱生法中,将杂交瘤细胞植入小鼠腹腔,通过腹水收集抗体。...

单克隆抗体的两次筛选剂 以及原因
惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞,既具有效应B细胞的“S途径”,又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性,因此能在HAT培养液中选择性存活下来,并不断增殖。B 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一...

单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法
1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞;2...

在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选?
(1)筛选对象:多克隆杂交瘤细胞群体。(即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。)(2)筛选方法:抗体检测( 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等,实际上是利用稀释法,在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养,然后检查每孔中产生特定抗体的能力)。(3)筛选结果:产生专一性抗体的杂交瘤细胞。

为什么在制作单克隆抗体时,对已经选出的杂交瘤细胞还需要进一步的进行筛 ...
因为杂交后有三种情况,瘤瘤型,抗抗型,抗瘤型(包括瘤抗型),只有抗瘤型是符合要求的,所以还要进行筛选,把瘤瘤型和抗抗型分离出去。

单克隆抗体 两次筛选分别是怎样筛选的?
先用HAT培养基,目的是筛选融合细胞.再用筛选得到的杂交瘤细胞做ELISA,筛选目的细胞株(就是抗你最初所用免疫小鼠蛋白的抗体)

高中生物:单克隆抗体问题 请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理...
原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养,未融合的细胞不能合成核酸,就会死亡。未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常,不能合成核酸。融合细胞可以通过旁路合成核酸,从而存活。

辕烟18756698657问: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
乳源瑶族自治县三七回答: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

辕烟18756698657问: 高中生物:单克隆抗体问题 请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理是什么 -
乳源瑶族自治县三七回答: 原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养,未融合的细胞不能合成核酸,就会死亡.未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常,不能合成核酸.融合细胞可以通过旁路合成核酸,从而存活.

辕烟18756698657问: 如何筛选动物单克隆抗体 -
乳源瑶族自治县三七回答: 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...

辕烟18756698657问: HAT选择培养基的作用是筛选出什么(在单克隆抗体制备过程中). -
乳源瑶族自治县三七回答:[答案] HAT选择培养基的作用是筛选出(杂交瘤细胞).HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻断DNA合成的主要途径.主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸...

辕烟18756698657问: 单克隆抗体制备过程中的专一抗体检测阳性的检测原理是什么 -
乳源瑶族自治县三七回答: 2.杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化.通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养.采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增.经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存.抗原-抗体杂交原理

辕烟18756698657问: 单克隆抗体两次筛选分别是怎样筛选的? -
乳源瑶族自治县三七回答:[答案] 先用HAT培养基,目的是筛选融合细胞. 再用筛选得到的杂交瘤细胞做ELISA,筛选目的细胞株(就是抗你最初所用免疫小鼠蛋白的抗体)

辕烟18756698657问: 关于单克隆抗体的不正确叙述是() -
乳源瑶族自治县三七回答: B 单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体.(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.

辕烟18756698657问: 什么是HAT?他和单克隆抗体技术有什么关系? -
乳源瑶族自治县三七回答: HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列,HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基.对具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径...


本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网