trizol提rna实验步骤

作者&投稿:梁点 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

用TRIZOL提取RNA,最后进行琼脂糖凝胶电泳,却只看见一条带???是不是提...
这个还要看具体条带的位置,如果上样量很少,可能只能看见28s条带,大概在4.5kb左右,所以只有一条带,如果很亮的单条,并且分子量大,应该是基因组DNA,如果只是在100bp左右,只能恭喜你,提的不是总RNA,多半是gRNA和一些降解产物。总体来说,你提取的都不太好。

Trizol法提取流感病毒 RNA
9、4000rpm离心10sec,将管壁残存液体甩到底部,用微量枪头吸干,室温干燥2-3min(不可过分干燥,防止下一步RNA不溶解);10、加入20ulDEPE水(加入depc的纯水高压后的水即为DEPE水),轻轻混匀溶解RNA。2000rpm离心5sec,冰上保存备用(最好2小时内使用,以免RNA降解)。二、TRIzol LS提取法 所提取...

提RNA哪一步能停止过夜?
Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。在细胞或组织中加入Trizol试剂后,室温放置5min,使其充分裂解后,可以方置于-70℃长期储存,当然可以放置过夜,再有就是用异丙醇沉淀RNA时最好-20℃过夜沉淀,...

trizol法提取细胞的RNA,溶于DEPC水中,零下20度冰箱保存4天后,还能用来...
降解大概20%左右吧。溶于dd水中是最好,DEPC促使降解更快。刚提取的RNA应在检测之后迅速反转录之后把cDNA-20°保存。不过对于反转录来说,即使RNA在-20保存几个星期也是没什么大影响的。这个降解率不光跟当初溶解的水有关,还和你的RNA纯度有关。如果当初提取的时候有DNA或蛋白质的污染或本身就有部分...

24孔板提RNA可以提多高的浓度
24孔板提RNA可以提20ng\/ul以上的浓度即可。用Trizol来提取细胞总RNA的话,一个6孔板的细胞足够了。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入Trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加Trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定...

trizol法提取rna 如何去除dna
1,裂解组织或者细胞使用的TRIzol量偏少; 2,使用的组织材料中含有大量的有机溶剂(如:乙醇\/异丙醇等)、高纯度的Buffer、碱性溶剂等; 3,如果提取的RNA中含有DNA时,也可以使用DNase I进行DNA消化。这个如果你做反转录的话,只能是用PCR检测了。电泳基本检测不出来。象现在的试剂盒或者TRIZOL提的RNA...

为什么trizol提不出来rna
按200ul氯仿\/ml Trizol加入氯仿,振荡混匀后室温放置15min。注:禁用漩涡振荡器,以免基因组DNA断裂。4℃ 12,000g离心15min。吸取上层水相,至另一离心管中。注:千万不要吸取中间界面;若同时提取DNA和蛋白质,则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,则弃下层酚相。按0.5ml异丙醇\/ml Trizol 加入...

用Trizol提取植物RNA电泳后看不到任何条带(也就是什么都没有),请问...
你好,一般RNA电泳没有条带主要可能是由于RNA降解、RNA样本量太低等造成。但没具体描述步骤所以不太好判断。根据你的说法同一批提的鱼的组织有条带,基本可以排除人为操作引起的RNA降解,所以有可能是RNA的浓度太低引起的。不知道你在电泳前有没有测过RNA的浓度?如果有条件的话可以测一下RNA的浓度,...

trizol提取RNA时,最后的RNA为什么不能完全干燥,其干燥后不易溶解的...
最后的到RNA的上一步是酒精洗涤,提取的RNA当然不是完全干燥,提取后可以用小号枪头洗出较多的液体,剩下就在空气中自然干燥;但是太干就不容易溶解,因为太干的话RNA之间就结合的非常紧密。

想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是 ...
我这边刚好在做,给你说下:贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来。组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末)。(此步骤可以-80oC冻存,下面可以以后再做)每1毫升Trizol加200微升氯仿(氯仿需饱和,可以在氯仿加一...

晋饰17877291124问: 求TRIZOL提取RNA的详细步骤 -
喀喇沁旗依清回答:[答案] 厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞.2、将组织或细胞的Trizol裂解液...

晋饰17877291124问: RNA提取步骤是什么 -
喀喇沁旗依清回答:[答案] 提RNA 加TRIZOL 室温静置5分钟 再加氯仿4°离心15分钟 去上层澄清相 再加异丙醇 -20放置30分钟 然后4°离心10分钟 倒掉液体 加酒精4°离心5分钟 然后倒掉酒精 晾干 加DEPC水溶解

晋饰17877291124问: 想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是否可以共享一下,谢谢 -
喀喇沁旗依清回答: 我这边刚好在做,给你说下: 贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来.组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末). (此步骤可以-80oC冻存,下面...

晋饰17877291124问: 呵呵,提取RNA过程? -
喀喇沁旗依清回答:[答案] 现在常用的是Trizol法. 提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、离心管等DEPC水浸泡处理12小时后,高温灭菌30分钟(也可不用DEPC处理,常规高温灭菌40分钟),整个处理过程必须带...

晋饰17877291124问: Trizol法提取RNA操作步骤?
喀喇沁旗依清回答: 动植物总RNA提取-Trizol法 Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染.RNA可...

晋饰17877291124问: 怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA -
喀喇沁旗依清回答: 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...

晋饰17877291124问: TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? -
喀喇沁旗依清回答: 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...

晋饰17877291124问: 动物组织如何提取总RNA? -
喀喇沁旗依清回答: Trizol法 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%. 2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖...

晋饰17877291124问: 怎么提取RNA? -
喀喇沁旗依清回答:[答案] 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了.整个实验中要注意尽...

晋饰17877291124问: 细胞总RNA怎样提取?
喀喇沁旗依清回答:操作步骤: 将Trizol、氯仿、冷PBS、EP管、灭酶枪头、一次性手套、EP管架、吸管等物品带入细胞室. 1、 取出EP管、做好标记 2、 取出细胞、收集上清保存备用 3、 用冷PBS冲洗细胞两次 4、 加入1ml Trizol (24孔板每孔加0.5ml即可),调小刻度用移液器吹打细胞至液体澄清(生化:摇动混匀后室温孵育10min) 详细的操作步骤,生物帮上面有的, http://www.bio1000.com/zt/cell/46213.html 细胞因子,干扰素的作用,白介素价格,肿瘤坏死因子功能


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