rna逆转录的详细步骤
如图表示人体黑色素形成过程图解.请据图回答:(1)当人体缺乏酶2或酶3...
（1）酶1能将细胞中的苯丙氨酸转化为酪氨酸，当人体只缺乏酶1时，苯丙氨酸不能转化为酪氨酸，但人体可以从食物中吸收酪氨酸（或转氨基作用合成酪氨酸），因此也能正常合成黑色素．（2）获取该目的基因时一般采用人工合成的方法．该方法有两条途径：一是从正常细胞中提取酶1的m地NA，通过逆转录合成单...
分子杂交的DNA分子杂交探针分类
例如,在筛选逆转录病毒人类免疫缺陷病毒(HIV)的基因组DNA克隆时,因无DNA探针可利用,就利用HIV的全套标记mRNA作为探针,成功地筛选到多株HIV基因组DNA克隆。又如进行中的转录分析(nuclearrunontranscrip-tionassay)时,在体外将细胞核分离出来,然后在α-32P-ATP的存在下进行转录,所合成mR-NA均掺入同位素而得到标记,此...
病毒怎样进入《感染》细胞,动植物进入细胞方式相同吗?问题小多,谢谢...
HA0 虽然能识别宿主细胞表面的受体,但不能与宿主细胞膜发生融合,故而不具有感染性。 将流感病毒的 HA 与 HIV-1 和 Moloney 鼠白血病病毒等逆转录病毒的 Env 蛋白进行比较时可以发现,尽管这些病毒与细胞膜的融合机制存在着差异,但它们的结构却具有明显的相似性。在这几种病毒中,融合肽都位于三个肽链缠绕而成的...
仅分子生物学阳性病人分类怎么写?
;(2) DNA通过转录生成RNA;(3) 含遗传信息的mRNA通过翻译生成蛋白质来控制生命现象;(4) 同时某些RNA可以通过逆转录将遗传信息传到DNA;(5) 某些RNA自身还可进行复制使其遗传信息得以永存。1、 原核和真核生物在基因组DNA结构上有哪些差异?原核:(1)基因组较小,环状双螺旋DNA与DNA结合蛋白结合成带有单拷贝基因的...
逆转录的详细描述
逆转录的简要过程表示如下：逆转录酶的作用是以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA3′桹H末端上，按5′→3′方向，合成一条与RNA模板互补的DNA单链，这条DNA单链叫做互补DNA(complementary DNA, cDNA)，它与RNA模板形成RNA桪NA杂交体。随后又在反转录酶的作用下，水解...
求RT-PCR 流程和注意事项
解答:1.RT-PCR有两种做法:条件具备的话可用kit进行一步法进行;若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想,条带特异性强且无拖尾现象,我推 测是体系更加单一比较利于PCR的进行,当然也可能是我买的kit不太好。(promega)。2.RT-PCR应具备的条件高质量的RNA(保留后可做5,3RACE...
逆转录形成的dna如何进入核孔
细胞核是由核孔的，DNA可以通过核孔在蛋白载体的帮助下进入细胞核。再说一句，逆转录逆转录酶的作用是以dNTP为底物，以RNA为模板，合成一条与RNA模板互补的DNA单链，它与RNA模板形成RNA桪NA杂交体。随后又在反转录酶的作用下，水解掉RNA链，再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此，完成由RNA指导的DNA...
2020-08-24质粒构建
一般逆转录(也可称作反转录)都有现成的试剂盒,只要大家按照试剂盒的说明书来操作,问题都不大,在这里我就以TAKARA的逆转录试剂盒为例稍加说明。 Random 6 mers 为随机的6核苷酸引物,引物序列为5'-(P)NNNNNN-3',特点是产物量大,特异性差,适用于长的或具有Hairpin构造的RNA。包括rRNA、mRNA、tRNA等在内的所有...
如何测定一段已知序列DNA的旁侧序列
用一步法扩增可检测出总RNA中小于1ng的低丰度mRNA。该法还可用于低丰度mRNA的cDNA文库的构建及特异cD-NA的克隆,并有可能与Taq酶的测序技术相组合,使得自动反转录、基因扩增与基因转录产物的测序在一个试管中进行。最近Cetus公司推出rTth逆转录酶,兼具有DNA多聚酶的活性,对于RNA的发展起了很大的推动作用。有关rT...
谁有今年辽宁高考物理题?急! 要文字板的
(2)如果现将步骤①所获得的mRNA逆转录得到DNA单链,然后该DNA单链与步骤②中的单链DNA之一按照碱基配对原则形成双链分子,理论上也能观察到凸环,其原因是逆转录得到的DNA单链中不含有 序列。 (3)DNA与mRNA形成的双链分子中碱基配对类型有 种,分别是 。 32.(11分) 跳虫、甲螨和线虫是土壤中的主要动物类群,...
涟水县奥佳回答：[答案] 在逆转录酶作用下以dNTP为底物,RNA为模板,tRNA为引物,按5′→3′方向,合成一条与RNA模板互补的DNA单链,它与RNA模板形成RNA DNA杂交体.随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以此DNA为模板合成第二条DNA
亓鸦19579336989问： RNA逆转录的具体过程是怎样的? - ？
涟水县奥佳回答： 更正一下tchxb的答案: 先转出与RNA互补的DNA单链,后转出双链DNA RNA首先反转录成cDNA(负链DNA),构成RNA-DNA中间体.中间体中的RNA再经过RNA酶H水解,而以剩下的负链DNA复制成双股DNA. tchxb的答案基本上是对的.
亓鸦19579336989问： 病毒RNA的反转录步骤 - ？
涟水县奥佳回答：[答案] RNA → DNA → RNA → 蛋白质 逆转录 (解旋) 转录 翻译
亓鸦19579336989问： RNA通过逆转录酶逆转录成DNA的过程是怎样的啊?拜托了各位 谢谢 - ？
涟水县奥佳回答： 转录过程 包括启动、延伸和终止. 启动RNA聚合酶正确识别DNA模板上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)构成的三元起始复合物,转录即自此开始.DNA模板上的启动区域常含有TATAATG顺序,称普里布诺(Pribnow)盒或P...
亓鸦19579336989问： 反转录的实验步骤要做实验了,越具体越好要写实验报告 - ？
涟水县奥佳回答：[答案] 你按照买的反转录试剂盒来做就行.(1)、从细胞中提取细胞总RNA用GIBCO公司的Trizol试剂提取细胞总RNA.按试剂使用说明操作:离心收集细胞,倾去细胞液,向沉淀中加1 ml Trizo1(每106-107细胞),混匀至室温5分钟,用1 ml加...
亓鸦19579336989问： RNA逆转录具体内容 - ？
涟水县奥佳回答：[答案] 逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成.此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录.逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一,需...
亓鸦19579336989问： RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?请教 - ？
涟水县奥佳回答： 操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水 65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开; 再加dNTP,RNaseA,BUFFER, MTV逆转录酶, 反应25℃10min:这一步是让反转录引物(oligodT,随机引物)和模板RNA退火结合 37℃60min:这一步是反转录酶的工作温度 70℃10min:这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA
亓鸦19579336989问： RNA反转录为cDNA 原理 主要想知道各个水浴、冰浴步骤在实验中的作用RNA反转录过程步骤如下:将提取的RNA用DEPC水吹起,加入引物1、引物2,加... - ？
涟水县奥佳回答：[答案] 第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合. 第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA. 37度水域是让cDNA聚合. 第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一链. 第二次冰浴是为了让cDNA-RNA复性成为cDNA-...
亓鸦19579336989问： RNA的转录过程可分为几个阶段,正确描述其转录 - ？
涟水县奥佳回答： RNA的转录过程可分为三个阶段,分别是:启动、延伸、终止. 1、启动 RNA聚合酶正确识别DNA模板链上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)构成的三元起始复合物,转录即自此开始. 2、延伸 σ亚基脱离酶分子,留下的核心酶...
亓鸦19579336989问： 培养细胞如何提取mRNA,如何逆转录? - ？
涟水县奥佳回答： 1 细胞总RNA的提取 1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂(Gibco公司) 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁). 2)、将各孔内消化好的细胞...
