ctab法提取dna步骤

作者&投稿:弋米 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

DNA的提取如何进行以及最常见的方法
反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。以下是在提取热带水果DNA时设计的两种不同方法步骤,对比起来CTAB法好,在禾本科植物效果差不多!1、 CTAB法 1) 在所需量的CTAB抽提液中加入2-巯基乙醇,使终浓度达2%(v\/v)。将此溶液预热至65℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要4ml的2-ME\/CTAB抽提液。2)...

ctab法提取dna的原理
ctab法提取dna的原理如下:CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol\/LNaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚...

CTAB法--DNA提取
1.称取0.1g左右的植物组织,放入2ml离心管,加入600ul的DNA提取缓冲液 (Buffer ①+Buffer②+Buffer③+Na2HSO3)。2.研磨彻底,65℃水浴50min,中间每隔15分钟颠倒混匀一次。3.加入600ul的氯仿\/异戊醇24:1,颠倒混匀。4.14000rpm离心10min,取上清液500ul左右到新的1.5ml离心管。5.加入等体积的...

CTAB提取植物中DNA步骤是什么??
(8)室温下干燥后(一般干燥5-15 min),溶于30-50 μl DEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用.,7,CTAB提取植物中DNA步骤是什么?1、从2ml离心管中取样至小离心管中,加钢珠 2,放入液氮冷冻30S,放入震荡机震荡 3.加200微升CTAB(56度),56度恒温水浴30Min.4.加入200微升氯仿异戊醇混合...

质粒DNA提取和细胞基因组DNA提取的异同
不同点:提取方法:质粒DNA主要采用CTAB法,物理方式包括玻璃珠法、超声波、研磨和冻融,化学方法有异硫氰酸胍法和碱裂解法,还有酶法;而细胞基因组DNA提取则更为广泛,需要考虑核酸完整性、有机溶剂和金属离子的控制,以及去除其他生物大分子和RNA。提取原理:质粒DNA提取涉及三种特定溶液和硅酸纤维膜,...

DNA的琼脂糖凝胶电泳的应用和发展举例.要详细一点的.
在“CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒提取食用菌DNA”实验中,研究人员用了两种方法来提取DNA:一、CTAB法(对照法).二、CTAB与DNA凝胶回收试剂盒(琼脂糖凝胶DNA试剂盒)结合法(结合法).实验结果表明,与对照法相比结合法提取DNA样品的电泳条带更规则、清晰,且DNA的酶切效率显著高于对照.由此说明,结合法能高效...

ctab提取基因组dna应注意什么
注意事项有:1. 水浴的时候要注意摇晃,10min一次,很关键。2. 加异丙醇后要过夜,-20冰箱放一晚上,放之前轻轻的混一下。3. 加氯仿异戊醇后要充分混匀,一般在振荡器上晃30min。4. 异丙醇要提前放在-20的冰箱里。5. 实验中每步都要剪枪头,以免弄断DNA。

植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一异成醇各起什么作用_百度知 ...
植物DNA提取方法是采用CTAB法。CTAB,是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7mol\/L) 浓度下可溶,并稳定存在,但在低盐浓度(0.1~0.5mol\/L NaCl)下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等...

植物DNA提取时(CTAB法),加入氯仿后离心分三层,请问三层分别是什么,稍 ...
CTAB法即 CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol\/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇...

哪位大哥能够告诉我用CTAB法提取DNA的
CTAB法的全称是十六烷基三甲基溴化铵法(cetyltrimethylammonium Ammonium Bromide)。用途 主要用于提取生物DNA 步骤 (1) 2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。(2)取少量实验材料(约300mg)置于研钵中,用液氮磨至粉状;(3) 加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液,轻轻搅动;(4) 将磨碎液分倒入1.5 ml...

秘所19350368670问: 如何用CTAB法提取DNA -
察哈尔右翼前旗泰力回答:[答案] (1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中; (2)加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min; (3)小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各...

秘所19350368670问: CTAB提取植物中DNA步骤是什么?1、从2ml离心管中取样至小离心管中,加钢珠2,放入液氮冷冻30S,放入震荡机震荡3.加200微升CTAB(56度),56度恒... -
察哈尔右翼前旗泰力回答:[答案] 1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;(2)加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min;(3)小心吸取上清液,加入等体积...

秘所19350368670问: 粗提取植物DNA的实验步骤和原理 -
察哈尔右翼前旗泰力回答:[答案] 提取植物DNA常用的方法是CTAB法.原理:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有...

秘所19350368670问: CTAB提取植物DNA中的问题我提取的是植物的DNA,其中步骤是这样的.1.称取材料0.2g,加入适量PVP,500µl冰冷CTAB,20µl冰冷RNA酶研磨;2.研磨后... -
察哈尔右翼前旗泰力回答:[答案] Tris饱和酚分上相(tris)和下相即有机相酚,这样保存可以避免酚的挥发以及防止酚类氧化成醌,抽提时取下层酚相.在吸取的时候要将枪头插到水相以下的酚相.若吸到的是上层tris溶液,它会与我们的上清互溶. 不过一般都不会单独使用酚,而是将酚...

秘所19350368670问: CTAB法提取植物DNA -
察哈尔右翼前旗泰力回答: (1)可以的,液氮冷冻更容易破碎细胞壁释放DNA,但是不冷冻也没关系的,提取的DNA量即使少点也足够满足试验要求. (2)-20度足够保存,用一年以上都没问题,超低温保存时间当然更长,但是切忌反复冻融,建议提取后直接分装,以后使用每次取一管

秘所19350368670问: CTAB法提取植物DNA,液氮研磨后,添加CTAB提取液这步具体怎样进行啊,是把研钵放进65度水浴,等样品彻底溶解之后,再加CTAB;还是水浴时没等... -
察哈尔右翼前旗泰力回答:[答案] 多放一点液氮,磨得时间适当长一些.如果你的样品比较多,在液氮还没有蒸发前迅速把粉末转移到EP官管中,然后把它暂时放到-20的冰箱中,等所有的样品全部磨好后统一加CTAB. 你做实验的时候材料最好尽量新鲜一些,嫩一些;磨得时候材料...

秘所19350368670问: 请问如何从香蕉中提取DNA?步骤要详细,谢谢! -
察哈尔右翼前旗泰力回答: 1. 取30g香蕉,15gNaCl,5ml洗涤剂,一同加入研钵中,充分研磨5min. 2. 用纱布搭在烧杯上,将混合物过滤.滤液加入离心管中. 3. 将离心管放入离心机中,以1500r/min的转速离心3min.分次离心,用吸管吸取离心管中清液,加入小烧杯中,合并离心液. 4. 将离心液在冰箱冷藏室放置5min(若有沉淀,取上清液) 5. 将冷却的95%酒精(大约2倍与上清液)加入烧杯中.沿一个方向轻轻搅拌(注意:玻璃棒不能触碰烧杯底部)有丝状物(即香蕉DNA)出现.静置.有更多絮状物出现,用玻璃棒轻轻缠起.

秘所19350368670问: 如何用ctab法提取水稻dna -
察哈尔右翼前旗泰力回答: CTAB法原理 CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来.

秘所19350368670问: DNA的提取、纯化全过程(非试剂盒) -
察哈尔右翼前旗泰力回答:[答案] DNA提取有很多种方法,SDS法,CTAB法,高盐低PH法,不同的材料方法会不同,像含多酚类糖类的材料就适合用CTAB法,总的来说DNA提取就是先把细胞破碎,一般是用液氮研磨然后再加入各种提取液,然后就使用酚氯仿异戊醇抽提然后就是...

秘所19350368670问: 真菌DNA的提取方法?详细 -
察哈尔右翼前旗泰力回答: 菌丝基因组 DNA的提取 取少量菌丝粉,采用 CTAB法提取 DNA,加适量灭菌超纯水 (含 20 pg·ml.RNase)溶解 DNA,37~C处理 l h后, 一20℃保存备用.


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