为什么trizol提不出来rna
题主说的提取不了是什么意思？是提取不成功？
如果是，1、看耗材和试剂是否污染，提取RNA所有试剂耗材需无RNA酶或者用DEPC水配置；2、组织是否新鲜；3操作者需佩戴口罩与手套；4Trizol有植物的，也有适合动物的，可以考虑这个因素。暂时想到这些。
电泳时，三条带中，核糖体RNA（rRNA）在距离胶孔较近的位置上，28s、18s为核糖体的大、小两个亚基，第三条带，也就是最下面那条为5.8s和5s（以上为真核生物）。因为长度差距不大，故很难在电泳中区分出来。
在提取过程中，有时会出现RNA酶的污染，导致RNA降解。降解时，越大的RNA越容易降解，且降解为较小的片段，在电泳时也会跑得更快。
所以，电泳时，若缺失28s条带，28s条带亮度较弱，5s和5.8s条带变强或条带下方有弥散，则说明RNA完整性被破坏。且条带越弱，越模糊，说明RNA完整性越差，RNA中所含的信息就越不完整
trizol提不出来rna的原因有可能是以下原因：
1）你的Trizol试剂核有无问题？
2）研究材料是否新鲜，RNA容易降解，应妇80度保存。
3）如果都没问题，你的操作有无问题？
trizol提取rna的步骤：（仅供参考）
用户需自备的试剂和材料
无水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf管（RNase-free）、 Tips（RNase-free）
准备工作
RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase完全失活。它广泛存在于人的皮肤上，因此，在与RNA制备有关的分子生物学实验时，必须戴手套。
RNase的又一污染源是取液器，根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，基本达到要求。取RNase-free的物品时必须戴手套。
料制品的处理
尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下：
在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。注意：DEPC为剧毒物，活性很强，小心在通风柜中使用。
处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。
在通风柜中室温处理过夜。
将DEPC水溶液小心倒到废液瓶中，用铝箔封住含已DEPC水处理过的塑料制品的烧杯，高温高压蒸气灭菌至少30分钟。
烘箱用合适的温度烘拷至干燥。置于干净处备用。
璃玻和金属物品 250°C烘烤3小时以上。
从组织中提取总RNA
液氮研磨：组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol，转入离心管进行第2步操作。
匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol。另外，组织体积不能超过Trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。
从细胞中提取总RNA
培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按250px2/ml比例加入。
悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。
操作步骤
细胞或组织加Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。
12,000rpm 离心5min，弃沉淀。
按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿，振荡混匀后室温放置15min。注：禁用漩涡振荡器，以免基因组DNA断裂。
4℃ 12,000g离心15min。
吸取上层水相，至另一离心管中。注：千万不要吸取中间界面；若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA，则弃下层酚相。
按0.5ml异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀，室温放置5-10min。
4℃ 12,000g离心10min，弃上清，RNA沉于管底。
按1ml 75%乙醇/ml Trizol加入75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。
4℃ 8,000g离心5min，尽量弃上清。
室温晾干或真空干燥5-10min。 注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。
可用50ul H2O，TE buffer或0.5%SDS溶解RNA样品，55-60℃,5-10min。注：H2O、TE或0.5%SDS均须用DEPC处理并高压。
测O.D值定量RNA浓度。注：此方法提取RNA A260/A280值在1.6-1.8之间；产率估计：组织标本：（ug RNA/mg组织）1-10ug，培养细胞（ug RNA/106 Cell）：5-15ug。
注：组织或细胞量过少，可酌情减少Trizol用量；组织或细胞用量过多，会引起DNA对RNA的污染；
高蛋白、脂肪或多糖类组织，肌肉组织或块状植物组织等，组织匀浆或液氮研磨后须4℃ 12,000g离心10min去掉不溶物，再进行下面操作，若顶层有脂肪物，则也须去掉；
热天提RNA，带手套是必须的，手是RNase的主要来源；
组织块用液氮研磨，效果最好，若没有液氮或电动匀浆器，可用手动匀浆器代替，此时组织块不宜过大，且需先用眼科剪刀将组织碱碱剪碎，然后再充分研磨。
trizol法提取
5. Trizol是一种全面的RNA提取试剂，其中含有异硫氰酸胍等成分，这些成分能迅速裂解细胞并抑制核酸酶的活性，防止RNA降解。6. 目前，Trizol法被广泛应用于组织或细胞中RNA的提取。7. RNA的碱基配对规则与DNA基本相似，包括A-U、G-C配对，此外G-U配对也在某些情况下发生。8. 在细胞中，RNA主要分为三...
trizol法提取rna原理是什么?
Trizol作用原理：在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。
trizol法提取rna原理
Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同，不过除了A-U、G-C配对外，G-U也可以配对。在细胞中，根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA），rRNA（核糖体...
实验1:总RNA的提取——Trizol
RNA是核酸，具有较好的水溶性。提取RNA首先破碎细胞，然后用提取液将RNA溶出，反复抽提去除蛋白质，加入乙醇沉淀RNA，将RNA沉淀溶解备用。常用的试剂为Trizol，该试剂可以破坏细胞使RNA释放出来的同时，同时使RNA酶变性失活，保护RNA的完整性。Trizol的主要成分为异硫氰酸胍、酚和B-巯基乙醇，异硫氰酸胍属于解...
TRNZOL和TRIZOL有什么区别?一样的吗?
TRNZOL和TRIZOL是一样的，正确称呼为TRIZOL，是一种新型总RNA抽提试剂，可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性，因此对纯化RNA及标准化RNA的生产十分有用。
RNA提取(Trizol 法)
Trizol法，以其独特的化学特性，为生物科研中RNA的高效分离提供了关键工具。它是一种酸性溶液，蕴含硫氰酸胍（GITC）、苯酚和氯仿的精妙组合，能够实现RNA与DNA、蛋白质的高效分离。下面，我们将详细解析Trizol法的每一步操作，带你走进RNA提取的科学世界。操作步骤准备<\/: 确保所需试剂如氯仿（预冷）、异...
Trizol 法怎么提取高质量RNA
RNA的提取（仅供参考）准备试剂：氯仿，异丙醇，75℅乙醇，无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤：1. 匀浆处理:a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养细胞 直接在培养板中加入...
用trizol法提取RNA的方法及每一步的原理.
7. 用Rnase-free water 溶解RNA沉淀 各试剂的作用：1、 TRIZOL 主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞，使细胞中的蛋白，核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中还加入了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。...
TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项?
三、Trizol法提取法（这是提禽流感病毒的步骤，供参考）Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。1、取鸡胚尿囊液，加入5-10倍体积Trizol液，混匀；2、室温放置5分钟，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒...
Trizol法提取流感病毒 RNA
三、Trizol法提取法（这是提禽流感病毒的步骤，供参考）Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。1、取鸡胚尿囊液，加入5-10倍体积Trizol液，混匀；2、室温放置5分钟，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒...
郴黛林可： trizol提不出来rna的原因有可能是以下原因: 1)你的Trizol试剂核有无问题? 2)研究材料是否新鲜,RNA容易降解,应妇80度保存. 3)如果都没问题,你的操作有无问题? trizol提取rna的步骤:(仅供参考) 用户需自备的试剂和材料 无水乙...
北票市13977107342： 我用Trizol试剂盒提枇杷的RNA提了三次,每次都是黑色的,跑电泳也没有,为什么啊? - ？
郴黛林可： 加异丙醇离心后,出来的应该是白色的胶状沉淀.如果是黑色,说明含有较多色素啊,杂质啊,RNA含量太少.很多组织就是这样,比较难提.第一部研磨完离心的多离心一会,说明书说离心说离心10~15min,你可以离30min.
北票市13977107342： 提取金葡菌RNA的具体方法 - ？
郴黛林可： 我最近也在提,只能说明自己的一点儿看法,电泳时加样孔很亮应该是有蛋白污染,需要再纯化,具体的浓度吧,我个人觉得不同的菌浓度不一致,这个倒不是最重要的,只要没有有明显的讲解、提取的质量能保证就能满足大部分后续试验.
北票市13977107342： Trizol法提血中的总RNA,跑胶后有的可以显示18S和28带,而有的却什么也没有?为什么呢?？
郴黛林可： 跟浓度有一定的联系 还有就是你的RNA质量并不是很好 但是一般的RT对RNA的质量要求不算是很高的!
北票市13977107342： Re:怎么提不出RNA ,我的RNA 提取试验错误在那里? - ？
郴黛林可： 1:取样.这样的取样方式的确不好.液氮或者类似 RNAlater 的东西是一定要采用的,这可以降低降解的程度.建议:首先,你的样品采集方式决定了你难以获得不降解的 RNA.为了获得尽可能长的片段,一定要在肝脏出来后立即保存于液氮或者样品保存液中.由于样品中 RNA 可能部分降解,所以抽提使用 TRIzol 类的可以获得比较小的片段的方法.RNA 比较短,后面的引物设计也要相应考虑.按照这样的思维,应该可以很快有结果的.
北票市13977107342： 用trizol提取rna时,为什么dna不会溶解在水相 - ？
郴黛林可： 提取RNA时如何去除DNA的污染的方法: 注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有 问题.发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体...
北票市13977107342： 用Trizol法提DNA遇到的问题求教 - ？
郴黛林可： Trizol是用来提取RNA的,因为pH低,所以DNA都是溶解在酚相的,你可以用pH8.0的Tris平衡酚来提取DNA
北票市13977107342： 用Trizol提取植物RNA电泳后看不到任何条带(也就是什么都没有),请问问题可能出在哪里? - ？
郴黛林可： 你好,一般RNA电泳没有条带主要可能是由于RNA降解、RNA样本量太低等造成.但没具体描述步骤所以不太好判断.根据你的说法同一批提的鱼的组织有条带,基本可以排除人为操作引起的RNA降解,所以有可能是RNA的浓度太低引起的.不知道你在电泳前有没有测过RNA的浓度?如果有条件的话可以测一下RNA的浓度,这样比较直观.也许是植物组织量比较少?又或者是因为植物组织没有动物组织那么松软,所以研磨没有那么充分,导致RNA释放比较少.
北票市13977107342： 怎么提取RNA? - ？
郴黛林可： 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
北票市13977107342： TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? - ？
郴黛林可： 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
