单克隆细胞筛选
单克隆抗体的两次筛选剂 以及原因
惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的“S途径”，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。B 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一...
如何筛选动物单克隆抗体
经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞.通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个...
利用细胞………单克隆抗体时有两次筛选,第一次筛选的目的是?第二次筛选...
两次筛选的目的分别是：第一次筛选：是否拥有抗体基因并且能表达。第二次筛选：已经融合的细胞是否能够表达抗体。
DNA克隆的重组体的筛选
由于每一重组体只携带某一段外源基因，而 转化或转染时每一受体菌又只能接受一个重组体分子，如何将众多的转化菌落或转染噬菌斑区分开来，并鉴定哪一菌落或噬菌斑所含重组DNA分子确实带有目的基 因，这一过程即为筛选或选择。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况不同，可采取直接选择...
克隆的基本过程
1986年,英国科学家魏拉德森用胚胎细胞克隆出一只羊,以后又有人相继克隆出牛、鼠、兔、猴等动物。这些克隆动物的诞生,均是利用胚胎细胞作为供体细胞进行细胞核移植从而获得成功的。这种克隆技术的难度要小一些,比较适合研究。而克隆绵羊“多利”是用乳腺上皮细胞(体细胞)作为供体细胞进行细胞核移植的,它翻开了生物克隆...
在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选?
但可利用培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核酸而得以生存。）第二次筛选：（1）筛选对象：多克隆杂交瘤细胞群体。（即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。）（2）筛选方法：抗体检测（ 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等，实际上是利用稀释法，在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养，然后检查每...
单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别
先说骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，共有3种情况，B淋巴和B淋巴融合，B淋巴和骨髓瘤细胞融合，骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合 第一次筛选是为了筛选出能无限增殖的细胞，这只有两种情况：1、经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 2、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 第二次是为了筛选出能产生单克隆...
为什么在制作单克隆抗体时,对已经选出的杂交瘤细胞还需要进一步的进行筛 ...
因为杂交后有三种情况，瘤瘤型，抗抗型，抗瘤型（包括瘤抗型），只有抗瘤型是符合要求的，所以还要进行筛选，把瘤瘤型和抗抗型分离出去。
单克隆抗体制备过程中第一步,需从几种细胞中筛选出杂交瘤细胞
一般问这个问题之前都有一个限制条件，假设细胞都两两融合。这样就是从三种细胞中筛选出杂交瘤细胞。
遗传修饰鼠构建过程中如何筛选打靶成功的胚胎干细胞?
具体的筛选方法如下：1、通过PCR技术对细胞DNA进行检测，确认修饰基因是否已经成功地导入到细胞中。2、通过Southernblotting技术对细胞DNA进行检测，确认修饰基因是否已经成功地整合到细胞基因组中。3、通过Westernblotting技术对细胞蛋白质进行检测，确认修饰基因是否已经成功地表达。4、通过克隆和扩增单个细胞的...
隆尧县肾骨回答： 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...
福锦19485281898问： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
隆尧县肾骨回答： 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述
福锦19485281898问： 单克隆抗体细胞的选择的实验步骤. - ？
隆尧县肾骨回答： 1. 材料1) 小鼠(Balb/c或C57小白鼠)若干只.2) 11.6%蔗糖溶液(经10磅30min高压灭菌).2. 操作方法1) 拉颈处死小鼠.2) 70%酒精浸泡消毒10min.3) 用手copy术剪将小鼠腹部剪开一小口,剥开皮肤,露出腹腔.4) 用注射器将4ml ...
福锦19485281898问： 单克隆抗体两次筛选的理由? - ？
隆尧县肾骨回答： 第一2113次:筛选出AB型细胞(A:浆细胞,B:骨髓瘤细胞),不要AA、5261BB型. 第二次:筛选出有特异性的4102杂交瘤细胞,检验阳性.单克隆细胞特点:1653灵敏度高、特异性强、可大量制备 杂交瘤细胞特点:能体外大版量繁殖....忘记了...详细请看人教版生物权选修三
福锦19485281898问： 流式细胞仪能筛选出单克隆细胞么 - ？
隆尧县肾骨回答： 可以. 为了制备牛型布鲁菌核蛋白L7/L12的单克隆抗体,试验采用流式细胞仪与间接ELISA相结合的方法进行单克隆筛选,以及Western-blot分析.结果表明:最终筛选出3株表达量较高的杂交瘤细胞株,细胞培养上清液的抗体效价可达1∶3 200,3株单克隆抗体均能与核蛋白L7/L12发生特异性结合,无其他交叉反应.
福锦19485281898问： 单克隆抗体的问题 - ？
隆尧县肾骨回答： 两次筛选:第一次是筛选出杂交瘤细胞(同种细胞间的融合就不是如淋巴B细胞-淋巴B细胞)第二次是为了筛选出具有特异性抗体的杂交瘤细胞)望采纳~~祝你学习进步.
福锦19485281898问： crispr为什么 单克隆筛选 - ？
隆尧县肾骨回答： CRISPR系统实际是细菌的一种获得性免疫系统. 细菌被phage侵染之后,可以获得phage的DNA片段整合进基因组形成记忆,当再次遭到入侵时,从对phage形成免疫
福锦19485281898问： 如何建耐药细胞株? - ？
隆尧县肾骨回答： 一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株. 脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,...
福锦19485281898问： 怎么筛选稳定的高表达的杂交瘤细胞? - ？
隆尧县肾骨回答： 单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,细胞将以多种形式出现,如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾细胞和瘤细胞等,其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的. 正常的脾细胞在培...
福锦19485281898问： 简述人工制备单克隆抗体的方法? - ？
隆尧县肾骨回答： 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...
