单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别

作者&投稿:哀胡 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别~


第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下:
1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞;
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

拓展资料:
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
参考资料:单克隆抗体百度百科:网页链接

先说骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,共有3种情况,B淋巴和B淋巴融合,B淋巴和骨髓瘤细胞融合,骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合
第一次筛选是为了筛选出能无限增殖的细胞,这只有两种情况:
1、经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞
2、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞
第二次是为了筛选出能产生单克隆抗体的细胞,筛选出的是经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞。


用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,可在HAT选择培养基长期存活的是...
作用下,利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA,缺少其中一种,DNA合成不能发生。由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的杂交瘤细胞,其合成DNA的主要途径虽然被甲氨蝶呤阻断,但由于与脾细胞融合,可获得其HGPRT,利用次黄嘌呤合成嘌呤碱,最终与嘧啶一起合成DNA。因此,只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖。

制备单克隆抗体过程中为什么B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合不完全,产生多...
此外,还有瘤B融合但是不会产生符合要求的抗体的融合细胞。因为,制备融合细胞的时候,是B淋巴细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液混合后,采用一些物理的,化学的或生物的方法,使细胞融合,它们相互之间的融合是随机的,甚至会出现多个细胞融合成一个细胞,但这种细胞一般寿命很短。其他的融合细胞经过筛选之后,可以...

单克隆抗体的制备步骤
3、选择性培养:选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:...

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。单克隆抗体制备的意义:用于以下各种生命科学...

单克隆抗体
单克隆抗体是采用克隆技术产出的抗体,对于很多疾病的诊断、治疗具有很重要的作用,特别是在恶性肿瘤领域,为免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。因此,很多人对单克隆抗体的产生非常的好奇。那么,单克隆抗体制备过程是怎样的?下面咱们就来详细看看吧。制备过程 1. 免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,...

多克隆抗体抗 Ig 抗体制备
多克隆抗体的制备过程包含一系列精细步骤:首先,抗原的制备是关键,免疫球蛋白(Ig)因其异种性,能够作为优质的抗原,激发异种动物产生针对Ig的血清反应。经过提取处理后,这将生成抗Ig抗体,也就是我们熟知的第二抗体或抗抗体。这种抗体在许多间接标记实验中起着重要作用。在材料和试剂准备方面,需要以下...

制备单克隆抗体的过程
(一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb\/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2...

下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体
(1)由图中可看出,单克隆抗体的制备过程中,运用了动物细胞工程中动物细胞融合和动物细胞培养两大技术.(2)据图可知,向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后,所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物,这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、而且纯度低.与多克隆抗体相比,单...

单克隆抗体淋巴b细胞是浆细胞还是记忆细胞
单克隆抗体制备过程中的淋巴细胞是经过免疫的B细胞,实际上是效应B细胞,也就是浆细胞。

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
过程 1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb\/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能...

双城市18337189955: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别?___. -
藩友复方:[答案] 单克隆抗体制备过程中共有2次筛选,一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.这两次筛选的原理和方法不同:第一次筛选的原理是细胞中DNA合成有2种途径,方法是用选择培养基进行筛选;第二...

双城市18337189955: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
藩友复方: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

双城市18337189955: 利用细胞………单克隆抗体时有两次筛选,第一次筛选的目的是?第二次筛选的目的?过程中有两种酶是什么? -
藩友复方:[答案] 第一次是选出杂交瘤细胞,第二次是选择出具有能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞.胰蛋白酶,

双城市18337189955: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别 -
藩友复方: 这好像是高中生物吧 先说骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,共有3种情况,B淋巴和B淋巴融合,B淋巴和骨髓瘤细胞融合,骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合 第一次筛选是为了筛选出能无限增殖的细胞,这只有两种情况: 1、经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 2、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 第二次是为了筛选出能产生单克隆抗体的细胞 那么只可能是,经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞. 所以有两次筛选

双城市18337189955: 单克隆抗体的问题 -
藩友复方: 两次筛选:第一次是筛选出杂交瘤细胞(同种细胞间的融合就不是如淋巴B细胞-淋巴B细胞)第二次是为了筛选出具有特异性抗体的杂交瘤细胞)望采纳~~祝你学习进步.

双城市18337189955: 单克隆抗体的制备过程中,经过第一次筛选,已经选出了杂交瘤细胞;还要进行第二次筛选,第二次筛选的目的是选出 -
藩友复方:[选项] A. 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 B. 能增殖的杂交瘤细胞 C. 细胞周期长的杂交瘤细胞 D. 产生多种抗体的杂交瘤细胞

双城市18337189955: 如何筛选动物单克隆抗体 -
藩友复方: 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...

双城市18337189955: 为什么植被单克隆抗体要经过两次筛选 -
藩友复方: 第一次是筛选出杂交瘤细胞;但这些杂交瘤细胞中有些是不能产生抗体的,还有些是不能产生我们需要的抗体的; 第二次就要筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.

双城市18337189955: 制备单克隆抗体过程,是需要两次筛选还是三次筛选?为什么? -
藩友复方: 两次. 第一次是筛选出杂交瘤细胞,第二次是筛选出能产生特异抗体的杂交瘤细胞.

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