液体如何测定细菌总数

细菌总数和菌落总数是怎么样测定的~

菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后（一般为48小时）,记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数.

基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告.

国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定.

检验方法参见：
GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》
SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》
ps 可参照http://www.zybang.com/question/5ed7ef0832afe17c607c785151f1b8a6.html

3倍乳糖蛋白胨液体培养基（三倍料）是用来接种100ml或者10ml的水样，而普通浓度的乳糖蛋白胨液体培养基（单倍料）是用来培养接种1ml及以下体积的水样。

这是为了保证在接种完水样之后，其浓度接近于单料的浓度。而单料的浓度是最适宜大肠菌群生长的。
例如：100ml水样+50ml三倍浓缩料，最后体积是150ml，三料被稀释了3倍，最后的浓度恰好是单倍料。
10ml水样可以加5ml单料也可以加10ml双料
1ml水样对浓度影响不大，就直接加单倍料里了。

其实还得知道测什么水，不同的水有不同的方法，而且差异较大的。所用的培养基也大大的不同。
我说下饮用水和纯化水的检测方法吧。
一、饮用水
1、水样的采集：用无菌的洁净器皿取样和盛放水样。一般需取平行样3个，每个样5ml。
2、营养琼脂培养基平板，每板0.2ml涂布，共涂布5套。培养72小时后，5套菌落数相加，就是每毫升水中的细菌总数。
说明A：之所以72小时，是由于饮用水中含氯，会影响检测结果。48小时后氯的影响基本消失，有些被抑制的菌体会长出。
说明B：饮用水的标准是：每1毫升水中不得超过100个。
二、纯化水
每个样取5ml用滤膜过滤收集菌体，分别用营养琼脂培养基平板和玫瑰红钠琼脂培养基平板培养，前者72小时计数，后者120小时计数。
说明A：之所以72小时，是由于饮用水中含氯，会影响检测结果。48小时后氯的影响基本消失，有些被抑制的菌体会长出。120小时是测霉菌的，所以时间要长。
说明B：纯化水的标准是：每1毫升水中细菌加霉菌不得超过100个。

不同的水是有不同的检测标准的。
如果是生活饮用水，则应该按照国家标准GB/T5750.12-2006上面的方法进行检测。
简单地说，就是吸取1ml水样注入无菌平皿中（如果水样比较脏，则需要做10倍、100倍……稀释），然后倾注灭菌好的并冷却到45度左右的营养琼脂15ml左右，经过48h培养，计算所生长的菌落总数，即为测得的每毫升菌落数（稀释者需要乘以稀释倍数）。
具体您应该看标准GB/T5750.12-2006

一 显微镜直接计数法
1，菌悬液的制备
2，检查血球计数板
3，加样品
4，显微计数
二，稀释倒平板法
先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …），然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。假定稀释1000倍后的稀释液（每个稀释浓度要平行3个，注意每次所用器具要灭菌，绝对不能在稀释到下个浓度时造成污染，这样误差极大）培养得N个菌落，则原先水中含1000N个细菌。

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南阳市13185606202： 液体如何测定细菌总数 - ？
徒剂丑丑： 不同的水是有不同的检测标准的. 如果是生活饮用水,则应该按照国家标准GB/T5750.12-2006上面的方法进行检测. 简单地说,就是吸取1ml水样注入无菌平皿中(如果水样比较脏,则需要做10倍、100倍……稀释),然后倾注灭菌好的并冷却到45度左右的营养琼脂15ml左右,经过48h培养,计算所生长的菌落总数,即为测得的每毫升菌落数(稀释者需要乘以稀释倍数). 具体您应该看标准GB/T5750.12-2006

南阳市13185606202： 细菌总数是怎么检验的? - ？
徒剂丑丑： 细菌总数是水质参数之一,指单位体积水中的细菌总量.其检验方法是:在玻璃平皿内,接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中,冷却凝固后在37°C培养24小时,培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数.有...

南阳市13185606202： 细菌总数怎么检测? - ？
徒剂丑丑： 一般有两种方法,一种是比较泛泛而谈的,就是测一下菌液的OD600,大致获得细菌的生长数量,比如OD600=1.0时,标准菌株的细菌数是10^9个/mL.第二种就是比较精确的,也就是平板计数,这是最基本的,把菌液稀释以后,涂布于平板培养基上,培养18-24小时以后,菌落计数,再乘以你的稀释倍数,就能得到原菌液的细菌数

南阳市13185606202： 细菌总数和菌落总数是怎么样测定的? - ？
徒剂丑丑： 一、菌落总数介绍: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成.当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形...

南阳市13185606202： 怎样确定单位体积稀释液中细菌的数量 - ？
徒剂丑丑： 显微镜直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方 法. 直接计数法中常用的是显微镜直接计数法,这种方法是先将待 测样品制成悬液,然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1- 3-1).根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微 生物总数.直接计数法所需设备简单,可迅速得到结果,而且在计数 的同时能观察到所研究微生物的形态特征,其缺点是难以计数微小的 细菌.这种方法一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数. 间接计数法最常用的是稀释平板计 数法,它是根据微生物的培养特征而设计 的计数方法.

南阳市13185606202： 测定微生物数量的方法 - ？
徒剂丑丑： 现在用的多的就是这几种,楼主挑着看吧细菌计数1.计数器测定法: 即用血细胞计数器进行计数.取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数.由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度...

南阳市13185606202： 水中细菌如何测定 - ？
徒剂丑丑： 比浊法或血球计数法.

南阳市13185606202： 数量的方法怎样准确测定一定水质中微生物的数量 - ？
徒剂丑丑： 一、2mm*2mm方格的计数2mm*2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长.由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3.计数室通常也有两种规格:一种是16*25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一...

南阳市13185606202： 现在有一瓶矿泉水,需要对其进行细菌总数的检测,请简述一下怎样进行操作 - ？
徒剂丑丑： 这个一般是按照国家标准对水质的检测,可以查中国药典上对微生物的要求,一般是是取规定的毫升数量,接种在规定的培养基中,在规定的温湿度条件下培养旦阀测合爻骨诧摊超揩相应的天数,然后取出,看看细菌、霉菌、酵母菌、大肠杆菌生长的数量,培养基不同,观察的菌种就不一样!