Ti质粒中的什么序列可以控制目的基因的转移和整合?

作者&投稿:关呢 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体,需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上.如图~

A、在目的基因的左侧只有B酶的识别位点,右侧只有C酶的识别位点,因此应该使用酶B和酶C切取抗虫基因,A正确;B、应该将目的基因插入T-DNA,而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位点,因此应该使用酶A和酶B切割Ti质粒,B正确;C、酶A和酶C切割形成的黏性末端相同,使用酶B和酶C切取抗虫基因,使用酶A和酶B切割Ti质粒,再用DNA连接酶连接两者形成重组质粒后,重组质粒不含酶A的识别位点,C错误;D、成功建构的重组质粒含有两个酶C的识别位点,因此用酶C处理重组质粒将得到2个DNA片段,D正确.故选:C.

根癌农杆菌(emphasis:role=italicAgrobacterium:tumefaciensemphasis)含有一种内源质粒,当农杆菌同植物接触时,这种质粒会引发植物产生肿瘤(冠瘿瘤),所以称此质粒为Ti质粒(tumor:inducing:plasmid)。
Ti质粒是一种双链环状DNA分子,其大小有200kb左右,但是能进入植物细胞的只是一小部分,约25kb,称为T-DNA(transfer:DNA)。T-DNA左右两边界(left:border,LB,right:border,RB)各有一个25bp长的正向重复序列(LTS和RTS),对T-DNA的转移和整合是不可缺少的,并且已证实T-DNA只要保留两端边界序列。
虽然中间的序列不同程度被任何一个外源DNA片段所替换,仍可转移整合到植物基因组中。根据Ti质粒的这个性质近年来构建成含LB和RB的质粒载体(link:xlinkhref=i010602图4-6link),已被广泛地用于植物的基因转移。利用基因枪等新的基因转移技术将其直接导入植物细胸,使含有目的基因的外源DNA片段整合到植物基因组中。

第一,Ti 质粒可分为4 个功能区域:①T-DNA:T-DNA是根癌农杆菌侵染植物细胞时从Ti 质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA;②Vir 区:Vir 区上的基因能激活T-DNA 转移,使根癌农杆菌表现出毒性;③Con 区(接合转移编码区):该区段上存在与细菌间接合转移的有关基因,调控Ti 质粒在农杆菌之间的转移;④Ori区(复制起始区):Ori区上的基因调控Ti 质粒的自我复制。

第二,所以,这些序列都是控制目的基因转移的功能元件,经过改造的Ti农杆菌就可以控制,基因转移。




...和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶I的识别序列和切点是一G_百度知 ...
质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因,分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列;如果用限制酶II切割,则GeneI 和GeneⅡ都被破坏,造成重组质粒无标记基因;用限制酶I切割,则破坏GeneⅡ,保留GeneI,其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同,可以连接形成重组DNA.故选:D.

2020-08-24质粒构建
还是打开Primer 5,然后粘贴CDS序列,点击Enzyme,2为所有的酶,我们比对质粒图谱选择多克隆位点的酶,双击即可到3的框中,选好之后点击OK,可以看到PDCD1中有ApaI和KpnI两个酶切位点,所以这两个不可以选,其他的都可以选。 不过一般选择常用好用的最好是实验室就有现成的那些酶了。比如我们选择EcoRI和XhoI,那么我们就...

2010年江苏高考生物第27题 填空(4)
1. 切前0, 切后2 (双螺旋结构,切口两边各有一个游离磷酸基团 2. 越高(因为Sma I 识别G-C G-C序列, 而GC之间有三个氢键,比两个氢键的AT热稳定性高,所以Sma I切点越多则质粒中GC碱基对越多,整体热稳定性就越高。3. 因为SmaI 切割后没有黏附端(像前三种酶那样切后有一小段未配对的...

如甲图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程,图中tetR表示四环素...
且形成相同的黏性末端,所以选择的一种限制酶是Bau3AⅠ切割可获得目的基因,质粒中含有BamHⅠ.酶切位点,可被Bau3AⅠ切割,所以选择的限制酶是Bau3AⅠ.(4)酶切后会破坏四环素抗性基因,所以导入成功的大肠杆菌细胞中会含有抗氨苄青霉素基因,故筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含加入氨苄青霉素的...

什么是大肠杆菌质粒载体?
以及在emphasis:role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis基因的启动调控区有emphasis:role=italicClaemphasisI和emphasis:role=italicHinemphasisdⅢ的识别序列。并且这些限制性内切核酸酶在此质粒载体上只有一个识别序列,因此均可作为克隆外源DNA片段的克隆位点。pBB322分子大小为4363bp,虽然不是很小,...

高中生物基因工程题,高手请进,急急急
首先,第一问,DNA连接酶对两端序列没有专一性要求。DNA被切开,暴露的单链部分的碱基会根据碱基互补配对原则在DNA连接酶的督促下又联合成双联,这样就连一起了。图中目标基因的X端和载体质粒的M端都是被ECORI酶切割后暴露的单链部分。当目标DNA片段镶嵌到质粒中时,X端与M端就配对成双连,这样就...

什么是农杆菌Ti质粒载体?
虽然中间的序列不同程度被任何一个外源DNA片段所替换,仍可转移整合到植物基因组中。根据Ti质粒的这个性质近年来构建成含LB和RB的质粒载体(link:xlinkhref=i010602图4-6link),已被广泛地用于植物的基因转移。利用基因枪等新的基因转移技术将其直接导入植物细胸,使含有目的基因的外源DNA片段整合到...

质粒提取I 液 缺少RNA酶 会有什么现象
一般不会有太大影响。只要后面操作不出问题,还是能够提取到不错的质粒的,只是在其中还会混有RNA,完全可以在提取出质粒后再加入RNAase除去RNA。但是,如果质粒最后是用TE溶液溶解的,那RNAase起到的作用有限,因为TE有一定抑制酶活力的作用。如果有后续试验的话,建议不要用TE溶解。

碱裂解法制备质粒dna时,溶液1,2,3中各组分都起什么作用
碱裂解法制备质粒DNA时,溶液Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ中各组分的作用:1、溶液Ⅰ:葡萄糖是使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂,其主要目的是为了螯合二价金属离子从而达到抑制DNase的活性;可添加RNase A消化RNA。2、溶液Ⅱ 此步为碱处理。其中NaOH主要是为了...

pcDNA3.1重组质粒用脂质体转染原代培养细胞能稳定表达吗
再用BamHI和XhoI双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,用限制性内切酶酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;以免疫细胞化学法检测BACE基因的表达情况.结果 人BACE基因的cDNA已克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1质粒中;经脂质体转染COS-7细胞后,并由潮霉素进行筛选,可见转染细胞胞浆中和胞膜上有...

省直辖县级行政单位18860975239: 基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体,需把目的基因插入Ti质粒的T - DNA才能整合到植物染色体DNA上.如图 -
标炕绞股: A、在目的基因的左侧只有B酶的识别位点,右侧只有C酶的识别位点,因此应该使用酶B和酶C切取抗虫基因,A正确;B、应该将目的基因插入T-DNA,而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位点,因此应该使用酶A和酶B切割Ti质粒,B正确;C、酶A和酶C切割形成的黏性末端相同,使用酶B和酶C切取抗虫基因,使用酶A和酶B切割Ti质粒,再用DNA连接酶连接两者形成重组质粒后,重组质粒不含酶A的识别位点,C错误;D、成功建构的重组质粒含有两个酶C的识别位点,因此用酶C处理重组质粒将得到2个DNA片段,D正确. 故选:C.

省直辖县级行政单位18860975239: Ti质粒在基因工程中的作用 -
标炕绞股: 作为运输目的基因进入细胞内的运输工具 因为要让目的基因进入细胞,必须要让它借助工具进去,而且需满足目的基因可以在里面可以转录翻译复制,达到目的,那么质粒就是一个很好的运输工具. 质粒:细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子,能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上.

省直辖县级行政单位18860975239: 农杆菌中的Ti质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因.利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程... -
标炕绞股:[答案] (1)DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体. (2)只要Sa1I酶切割含有目的基因的DNA与质粒,形成相同的黏性末端,容易发生自身连接和反向接入;HindIII会破坏目的基因;则在构建重组质粒时,应选用...

省直辖县级行政单位18860975239: T - DNA是啥东西
标炕绞股: 转移DNA(transferred DNA,T-DNA) 农杆菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中,已成为植物分子生物学中广泛应用的遗传转化载体.是Ti质粒上的片断,包含三个重要...

省直辖县级行政单位18860975239: 什么是农杆菌Ti质粒载体? -
标炕绞股: 根癌农杆菌(emphasis:role=italicAgrobacterium:tumefaciensemphasis)含有一种内源质粒,当农杆菌同植物接触时,这种质粒会引发植物产生肿瘤(冠瘿瘤),所以称此质粒为Ti质粒(tumor:inducing:plasmid). Ti质粒是一种双链环状DNA分...

省直辖县级行政单位18860975239: 在基因表达构建载体中什么切割质粒什么切割目的基因,为什么? -
标炕绞股: 质粒是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线;然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了.由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做...

省直辖县级行政单位18860975239: Ti质粒的结构特点?简述根瘤农杆菌介导的遗传转化的原理是什么? -
标炕绞股: Ti质粒是一种 DNA病毒,侵染根瘤菌,打到基因重组的目的

省直辖县级行政单位18860975239: 在植物基因工程中,用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体,把目的基因重组入Ti质粒上的T - DNA片段中,再将重 -
标炕绞股: (1)限制性核酸内切酶 碱基互补配对(2)3/4 雌雄配子各有1/2含抗除草剂基因,受精时,雌雄配子随机结合(3)叶绿体遗传表现为母系遗传,目的基因不会通过花粉传递而在下一代中显现出来

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