ti质粒的作用是什么
碱裂解法制备质粒dna时,溶液1,2,3中各组分都起什么作用
碱裂解法制备质粒DNA时,溶液Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ中各组分的作用:1、溶液Ⅰ:葡萄糖是使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂,其主要目的是为了螯合二价金属离子从而达到抑制DNase的活性;可添加RNase A消化RNA。2、溶液Ⅱ 此步为碱处理。其中NaOH主要是为了...
什么是农杆菌Ti质粒载体?
虽然中间的序列不同程度被任何一个外源DNA片段所替换,仍可转移整合到植物基因组中。根据Ti质粒的这个性质近年来构建成含LB和RB的质粒载体(link:xlinkhref=i010602图4-6link),已被广泛地用于植物的基因转移。利用基因枪等新的基因转移技术将其直接导入植物细胸,使含有目的基因的外源DNA片段整合到...
质粒DNA提取溶液I是什么颜色?
无色透明的。如果你加了lyseblue,可能会有乳白色的沉淀。而lyseblue在碱性pH下,也就是加入P2后,会呈现蓝色。
质粒提取I 液 缺少RNA酶 会有什么现象
一般不会有太大影响。只要后面操作不出问题,还是能够提取到不错的质粒的,只是在其中还会混有RNA,完全可以在提取出质粒后再加入RNAase除去RNA。但是,如果质粒最后是用TE溶液溶解的,那RNAase起到的作用有限,因为TE有一定抑制酶活力的作用。如果有后续试验的话,建议不要用TE溶解。
真核原核表达系统的优缺点?
pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对)。4 基因诊断(gene diagnosis)是以探测基因的存在,分析基因的类型和缺陷及其表达功能是否正常,从而达到诊断疾病的一种方法。它是继形态学、生物化学和免疫学诊断之后的第四代诊断技术,它的诞生与发展...
SDS碱裂解法提取质粒DNA中溶液1的成分及作用是什么?
溶液Ⅰ 50mM 葡萄糖 \/ 10mM EDTA \/ 25mM Tris-HCl,pH=8.0 葡萄糖增稠,使悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;EDTA 抑制DNase的活性。这一步溶液中还可以加入RNase,不受EDTA影响,并且可以在后续步骤中被除去 溶液Ⅱ 0.2M NaOH \/ 1% SDS 破细胞的主要是碱,而不是SDS,所以才叫碱法...
碱裂解法提取质粒的溶液I是什么颜色的,是不是应该是透明的啊?
溶液I有葡萄糖,高温灭菌当然会焦化,不变黄才怪。质粒抽取的试剂都是现配现用的,根本不用灭菌。你还怕空气里、水里那区区几百个杂菌把你几百亿个菌的菌体沉淀污染了?再说杂菌有没有质粒都还是个问题呢。你要是懒,非要灭菌长期使用,就不要加葡萄糖,葡萄糖只是离心的时候调节密度的,不加对...
碱裂解法提取质粒时,试述溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ的主要成分及作用原理...
DNA在pH5~9的溶液中是稳定的,但当pH>12或pH<3时,就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob\/L,加入溶液Ⅱ后,该系统的pH为12.0~12.6,因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。SDS是一种阴离子去垢剂,它的主要作用有:①溶解细胞膜上的脂肪与蛋白,因而溶解膜...
SV-40 DNA指的是什么?它是质粒?用途?谢谢。
这种结构对病毒 DNA 的复制是不利的,需要拓扑异构酶 I 或 II 来消除正超螺旋结构,使复制叉继续移动。3 .后随链合成:SV40 DNA 复制过程中,后随链的引物及冈畸片段的合成与先导链 DNA 合成一样,也是由 DNA 聚合酶 α - 引物酶作用的结果。 DNA 聚合酶δ的作用是结合于冈畸片段的 3' ...
提取质粒时有用到溶液1、溶液2、溶液3,分别是什么啊
溶液Ⅰ:50mMl 葡萄糖\/10mMl EDTA\/25mMl Tris-HCl,pH=8.0 溶液Ⅱ:0.2Ml NaOH\/1% SDS 溶液Ⅲ:3Ml 醋酸钾\/2Ml 醋酸 溶液1称为悬浮液,是用来把细菌悬浮均匀的,为下一步的裂解做准备;溶液2称为裂解液,是裂解细菌菌体,使其释放质粒的,该步骤不能超过5分钟;溶液3称为中和液,用来中和...
下关区苏乐回答: 作为运输目的基因进入细胞内的运输工具 因为要让目的基因进入细胞,必须要让它借助工具进去,而且需满足目的基因可以在里面可以转录翻译复制,达到目的,那么质粒就是一个很好的运输工具. 质粒:细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子,能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上.
熊俩15163806612问: Ti质粒 - 搜狗百科?
下关区苏乐回答: 质粒:凡游离于原核生物核基因组以外,具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子,即cccDNA(circular covalently closed DNA),就是典型的质粒. 质粒具有许多有利于基因工程操作的优点: 1) 体积小,便于DNA的分离和操作; ...
熊俩15163806612问: 高中生物 质粒 - ?
下关区苏乐回答: 质粒是细菌内的一种小型环状DNA,Ti质粒是具体的一种质粒——专指土壤农杆菌内的质粒.
熊俩15163806612问: Ti质粒上的T - DNA有什么作用 - ?
下关区苏乐回答:[答案] 在高中生物教程中是用农杆菌转化法进行转基因工程的,T-DNA可以转入到双子叶植物的染色体DNA中
熊俩15163806612问: 质粒在基因工程中的作用是作为什么 - ?
下关区苏乐回答: 质粒在基因工程中是作为载体送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具. 质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息.细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体.载体是指把一个有用的外源基因...
熊俩15163806612问: 什么是农杆菌Ti质粒载体? - ?
下关区苏乐回答: 根癌农杆菌(emphasis:role=italicAgrobacterium:tumefaciensemphasis)含有一种内源质粒,当农杆菌同植物接触时,这种质粒会引发植物产生肿瘤(冠瘿瘤),所以称此质粒为Ti质粒(tumor:inducing:plasmid). Ti质粒是一种双链环状DNA分...
熊俩15163806612问: Ti质粒的结构特点?简述根瘤农杆菌介导的遗传转化的原理是什么? - ?
下关区苏乐回答: Ti质粒是一种 DNA病毒,侵染根瘤菌,打到基因重组的目的
熊俩15163806612问: 高中生物农杆菌中的ti质粒上t - dna有什么特点 - ?
下关区苏乐回答:[答案] 转移DNA(transferred DNA,T-DNA):T-DNA也叫三螺旋DNA,是指一种由三股ssDNA旋转螺旋行成的一种特殊结构.农杆菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中.农杆菌Ti(...