ti质粒和质粒的区别
质粒提取I 液 缺少RNA酶 会有什么现象
一般不会有太大影响。只要后面操作不出问题,还是能够提取到不错的质粒的,只是在其中还会混有RNA,完全可以在提取出质粒后再加入RNAase除去RNA。但是,如果质粒最后是用TE溶液溶解的,那RNAase起到的作用有限,因为TE有一定抑制酶活力的作用。如果有后续试验的话,建议不要用TE溶解。
请问质粒是什么意思啊?隐性的质粒又是什么意思?望高手指点~谢谢_百 ...
这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千...
质粒是什么
DNA分子 质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体(或拟核)以外的DNA分子,存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链DNA分子。天然质粒的DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有。质粒天然存在于这些生物里面,有时候一个...
细菌质粒
没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对)。 1973年,科学家将质粒作为基因的载体使用,为基因工程的诞生奠定了基础。 最...
质粒提取中每一步的作用
在溶液I中加入高达 10 mM 的EDTA,无非就是要把大肠杆菌细胞中的所有二价金属离子都螯合掉。如果不加EDTA,其实也没什么大不了的,只要不磨洋工,只要是在不太长的时间里完成质粒抽提,就不用怕DNA会迅速被降解,因为最终溶解质粒的TE缓冲液中有EDTA。如果哪天你手上正好缺了溶液I,可不可以抽提质粒呢?实话告诉你,...
双酶切质粒后电泳 的问题
很显然是质粒发生了自连啦。切开的2个质粒连起来了,因此相当于2个质粒的大小。你需采用磷酸化避免自连发生。
DNase I能降解质粒DNA吗
可以.DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶.DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5'端为磷酸基团,3'端为羟...
基因工程实验Ⅱ大肠杆菌质粒DNA的抽提及检测『Protocol』
材料:含有pSK II质粒的大肠杆菌菌株的菌液、含有MP3质粒的大肠杆菌菌株的菌液 试剂:①细菌的培养:LB培养基、氨苄青霉素 ②细菌的裂解与收集:溶液I(Tris-HCl、EDTA、Glucose)、溶液II(NaOH、SDS)、溶液 III(KOAc、CH3COOH)、RNAseA ③质粒DNA的分离与纯化:酚\/氯仿\/异戊醇、无水乙醇、70%乙...
载体上有什么识别序列和切点
限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有限制酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有1个限制酶Ⅱ的切点。载体,指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。在实际...
构建RNAi载体用的I型启动子和其他启动子有什么区别?用II型不行么...
即使是对转染带有筛选标记质粒的细胞进行瞬时筛选,也有助于富集带质粒的细胞。这也可以帮助解决一些难转染的细胞由于转染效率低造成的问题。2.由于质粒可以复制扩增,相比起化学合成来说,能够显著降低制备siRNA的成本。适用:已知一个有效的siRNA序列,需要维持较长时间的基因沉默,或者需要用抗生素筛选能表达...
江阴市消炎回答:[答案] 质粒是细菌内的一种小型环状DNA,Ti质粒是具体的一种质粒——专指土壤农杆菌内的质粒.
中叔乐19692061186问: 高中生物 质粒 - ?
江阴市消炎回答: 质粒是细菌内的一种小型环状DNA,Ti质粒是具体的一种质粒——专指土壤农杆菌内的质粒.
中叔乐19692061186问: 什么是农杆菌Ti质粒载体? - ?
江阴市消炎回答: 根癌农杆菌(emphasis:role=italicAgrobacterium:tumefaciensemphasis)含有一种内源质粒,当农杆菌同植物接触时,这种质粒会引发植物产生肿瘤(冠瘿瘤),所以称此质粒为Ti质粒(tumor:inducing:plasmid). Ti质粒是一种双链环状DNA分...
中叔乐19692061186问: 什么是R质粒? - ?
江阴市消炎回答: 就是带有抗性的质粒.详情请见百度百科R质粒
中叔乐19692061186问: 质粒可分几类 - ?
江阴市消炎回答: 质粒根据它们所带有的基因以及赋于宿主细胞的特点可以分为五种不同的类型: 1、抗性质粒(Resistance (R)plasmids):它们带有抗性基因,可使宿主菌对某些抗菌素产生抗性,如对氨基苄青霉素,氯霉素等产生抗性.不同的细菌中也可...
中叔乐19692061186问: 为什么转基因用ti质粒 不用ri质粒 - ?
江阴市消炎回答: 也用的! 以前研究的不透彻,所以很少用,现在也开始使用了哦!
中叔乐19692061186问: 能够作为 运载体 的三种类型有 动植物病毒 拿木大噬菌体衍生物 质粒 其中质粒是从原核生物的体内 - ?
江阴市消炎回答: 简单一点的说,当我们需要把我们想要的基因弄到原核生物里时,就需要质粒和噬菌体衍生物,但是噬菌体还有一个特点就是可以让携带的基因导入到整个原核生物的基因组里,因为噬菌体有强启动子,这样基因的表达或者定位什么的会更有效...
中叔乐19692061186问: 高中生物农杆菌中的ti质粒上t - dna有什么特点 - ?
江阴市消炎回答:[答案] 转移DNA(transferred DNA,T-DNA):T-DNA也叫三螺旋DNA,是指一种由三股ssDNA旋转螺旋行成的一种特殊结构.农杆菌Ti(tumor inducing)或Ri(root inducing)质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中.农杆菌Ti(...
中叔乐19692061186问: 关于双元载体我还想再问一些,,谢谢 - ?
江阴市消炎回答: 这是两个不同的概念. 你要做农杆菌转化,必须使用Ti质粒,这种质粒中含有T-DNA,它可以携带你的目的片段进入植物体内.如常用的pCAMBIA1300系列质粒. 双元载体就是含有两个抗性基因的载体,理论上说,任何载体都可以构建成双元载体,只要有两个抗性基因就行. 这就不涉及哪个可以用,用哪个好的问题了. 一般用来ATMT转化的载体,都含有两抗性基因,一个是用来大肠杆菌转化时用的抗性基因,如Amp,Kna等;另一个是ATMT转化后用来筛选的,如Hgromycin等. 建议,你看一下相关农杆菌转化的综述,就会更清晰了.如果没有,我可以给你几篇.