hat培养基筛选杂交瘤细胞
单克隆抗体技术的原理、基本过程、意义及应用。
是将能产生抗体的淋巴细胞和无限繁殖的肿瘤细胞，通过细胞融合获得既能产生抗体又能无限繁殖的细胞。过程如下：①将某抗原注入小鼠体内，从其脾脏获得产生相应抗体的B淋巴细胞；②用仙台病毒或聚乙二醇诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出杂交瘤细胞；③在选择性培养基中对杂交瘤细胞进行筛选，从杂交...
单克隆抗体制备过程
接着，进行细胞融合。小鼠经眼球摘除放血法处理后，无菌取出脾脏，与同系骨髓瘤细胞混合，并加入聚乙二醇促进融合。在融合过程中，淋巴细胞与骨髓瘤细胞结合形成杂交瘤细胞，这些细胞具有独特的融合特性。选择性培养是筛选过程，使用HAT培养基筛选出融合的杂交瘤细胞。只有融合的杂交瘤细胞能在HAT中存活，因为...
融合细胞需要用什么培养基进行筛选,并进行科隆化培养和什么
一般在进行单抗制备时，细胞融合后都是选用的HAT培养基进行筛选，选出骨髓瘤和单抗免疫细胞融合成功的杂交瘤细胞，而其他的细胞在这种培养基下会死掉，克隆化培养后要进行纯化，选出稳定单一的细胞株进行下一步实验。
...请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理是什么
原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养，未融合的细胞不能合成核酸，就会死亡。未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常，不能合成核酸。融合细胞可以通过旁路合成核酸，从而存活。
脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?_百度...
第二次筛选的原理和方法：在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的，经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异，所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇...
单克隆抗体的制备,克隆化培养是在第一次筛选后还是第二次,抗体检测呢...
诱导淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合之后，在HAT培养基上培养即可筛选出杂交瘤细胞（第一次筛选），此时得到每个杂交瘤细胞只能产生一种抗体，但不同的杂交瘤细胞可能产生不同的抗体，故需利用免疫学方法筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，此过程往往需要重复多次（第二次筛选），然后进行克隆化培养并提取抗体进...
在中断杂交试验中,为何首先筛选重组子,而后才测定基因顺序和距离...
中断杂交试验后的细菌中有Hfr、F-和重组子3种类型，将其接种在选择培养基上，以杀死Hfr细胞以及没有发生重组的F-细菌。因此，中断杂交试验时，首先在选择培养基上筛选选择标记基因的重组子，然后再测定重组子中的非选择标记基因出现的先后和间隔时间。根据非选择标记基因出现的顺序和间隔时间来确定它们的...
关于高中生物生物工程的几个问题。
2、A。茎尖根尖没有输导组织分化，而病毒是通过输导组织侵染植物器官的，所以茎尖根尖不携带病毒，不需要检测筛选。C中需要筛选出成功融合的“萝卜-甘蓝”杂交细胞，因为在细胞融合过程中，还会有未融合的和萝卜与萝卜，甘蓝与甘蓝的自身融合细胞。3、脱分化形成愈伤组织进而培养成植株体现的是植物细胞的全能...
在进行动物细胞融合的过程中为什么要进行两次筛选
第一次筛选的是杂交瘤细胞，因为假如A，B两种细胞融合，会有A，B，AA，BB，AB五种情况，筛选的是AB型细胞，第二次筛选能产生抗体的AB型细胞。 用选择培养基筛选。
HAT medium HAT培养基
【答案】：用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)和胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞的培养基，内含次黄嘌呤(hypoxanthine)、氨基喋呤(aminopterin)和胸腺嘧啶核苷(thymidine)三种，简称HAT。常用这种选择培养基来筛选杂交瘤细胞。能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和B淋巴细胞(脾细胞)融合而成的。...
丰满区伊痛回答： 利用选择性培养基hat筛选hat培养基,用次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)配置,其中氨基蝶呤(A)能阻断dna合成的主要途径,而用于杂交的瘤细胞都是次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞,而脾细胞中有这种酶,所以骨髓瘤细胞和瘤-瘤细胞会无法合成dna死去,而脾细胞和脾-脾都知道会无法无限长时间存活而死去,希望对你有帮助
亢汤18594464072问： ...正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶.现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛... - ？
丰满区伊痛回答：[选项] A. 免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖 B. 骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖 C. 杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖 D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体
亢汤18594464072问： 为什么HAT培养基可以把杂交瘤细胞选择出来 - ？
丰满区伊痛回答：[答案] 单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,细胞将以多种形式出现,如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、... 瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾细胞和瘤细胞等,其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的.正常...
亢汤18594464072问： HAT选择培养基的作用是筛选出什么(在单克隆抗体制备过程中). - ？
丰满区伊痛回答：[答案] HAT选择培养基的作用是筛选出(杂交瘤细胞).HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻断DNA合成的主要途径.主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸...
亢汤18594464072问： 脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么? - ？
丰满区伊痛回答： 放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种 脾细胞和脾细胞, 脾细胞和瘤细胞, 瘤细胞和瘤细胞.3种 ..放在选择性培养基上连续培养. 比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞 一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞 没有相应的抗体 所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞..因为具有无限繁殖和有抗体产生 所以能够存活.存活下来的 就是合格的杂交瘤细胞.. 一般筛选2次...
亢汤18594464072问： 简述人工制备单克隆抗体的方法? - ？
丰满区伊痛回答： 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...
亢汤18594464072问： HAT培养基中所有的融合细胞都可以存活么瘤细胞和瘤细胞的融合 与瘤细胞 可以筛选出么 就是单克隆抗体制备的第一次筛选 - ？
丰满区伊痛回答：[答案] 只能把杂交瘤细胞筛选出来
亢汤18594464072问： 如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图,请据图回答以下问题:(1)___技术是单克隆抗体技术的基础.(2)图中HAT培养基属于___培养基,用于筛选出杂... - ？
丰满区伊痛回答：[答案] (1)动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础. (2)图中HAT培养基属于选择性培养基用于筛选出杂交瘤细胞. (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比.最大的优势在于特异性强,灵敏度高,可大量制备. (4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质...
