单克隆抗体制备过程中经过两次筛选

作者&投稿:卫寇 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别~


第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下:
1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞;
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

拓展资料:
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
参考资料:单克隆抗体百度百科:网页链接


“筛选”是生物工程中常用的技术手段,下列关于筛选的叙述...
【答案】AC 【答案解析】试题分析:单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出针对目标抗原的抗体为阳性的杂交瘤细胞,A错误B正确;基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因,C错误;标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而...

如图为制备单克隆抗体过程示意图,相关叙述错误的是( )A.④中的筛选是...
A、单克隆抗体制备过程中,第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞,A错误;B、由于骨髓瘤细胞能无限增殖,因此需要在培养基中加入抑制骨髓瘤细胞DNA复制的物质,以选择出骨髓瘤细胞和B细胞融合的杂交细胞,B正确;C、图中有一处错误,即没有先给小鼠进行免疫,C正确;D、杂交瘤细胞的特点...

用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,可在HAT选择培养基长期存活的是...
HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶,其中氨基蝶呤可阻断DNA合成的主要途径。主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸苷激酶)作用下,利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA,缺少其中一种,DNA合成不能发生。由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的杂交瘤细胞,其合...

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
单克隆抗体制备的原理:B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力、B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的、将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是...

单克隆抗体的制备步骤
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。

如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图.(1)___和___技术是单克隆抗体技...
(1)单克隆抗体的制备过程中伴有动物细胞培养、动物细胞融合技术.(2)图中培养基属于选择培养基,非杂交瘤细胞和未融合细胞不能在此培养基中生长,杂交瘤细胞能在此培养基中生长.但此杂交瘤细胞能否产生特定的抗体,还需要利用抗原、抗体能特异性结合的原理进行抗体检测,选育出产生高特异性抗体的细胞...

下列有关单克隆抗体制备的叙述中,正确的是( )A.与骨髓瘤细胞融合的是...
A、在单克隆抗体的制备过程中,需要用浆细胞与骨髓瘤细胞融合,A错误;B、诱导动物细胞融合时,使用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂,B错误;C、在动物细胞融合时,必须使用诱导剂才能让细胞融合,C错误;D、动物细胞融合后,经过筛选能获得异种细胞融合的杂交瘤细胞,该细胞的特点是既能无限增殖又能分泌...

单克隆抗体的制备步骤
1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程;2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤...

制备单克隆抗体的过程
(一)脾细胞 1.材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb\/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2...

多克隆抗体抗 Ig 抗体制备
多克隆抗体的制备过程包含一系列精细步骤:首先,抗原的制备是关键,免疫球蛋白(Ig)因其异种性,能够作为优质的抗原,激发异种动物产生针对Ig的血清反应。经过提取处理后,这将生成抗Ig抗体,也就是我们熟知的第二抗体或抗抗体。这种抗体在许多间接标记实验中起着重要作用。在材料和试剂准备方面,需要以下...

宜春市19156913555: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别?___. -
陈没映盐酸:[答案] 单克隆抗体制备过程中共有2次筛选,一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.这两次筛选的原理和方法不同:第一次筛选的原理是细胞中DNA合成有2种途径,方法是用选择培养基进行筛选;第二...

宜春市19156913555: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
陈没映盐酸: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

宜春市19156913555: 单克隆抗体的制备过程中,经过第一次筛选,已经选出了杂交瘤细胞;还要进行第二次筛选,第二次筛选的目的是选出 -
陈没映盐酸:[选项] A. 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 B. 能增殖的杂交瘤细胞 C. 细胞周期长的杂交瘤细胞 D. 产生多种抗体的杂交瘤细胞

宜春市19156913555: 利用细胞………单克隆抗体时有两次筛选,第一次筛选的目的是?第二次筛选的目的?过程中有两种酶是什么? -
陈没映盐酸:[答案] 第一次是选出杂交瘤细胞,第二次是选择出具有能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞.胰蛋白酶,

宜春市19156913555: 制备单克隆抗体需要进行几次筛选,目的分别是什么? -
陈没映盐酸:[答案] 两次.第一次是筛选出浆细胞—浆细胞融合细胞 和 浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(抗原抗体反应) 第二次是筛选出浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(继续培养)

宜春市19156913555: 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别 -
陈没映盐酸: 这好像是高中生物吧 先说骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,共有3种情况,B淋巴和B淋巴融合,B淋巴和骨髓瘤细胞融合,骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合 第一次筛选是为了筛选出能无限增殖的细胞,这只有两种情况: 1、经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 2、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞 第二次是为了筛选出能产生单克隆抗体的细胞 那么只可能是,经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞. 所以有两次筛选

宜春市19156913555: 关于单克隆抗体的说法,正确的是() ①免疫过的淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合后杂交细胞产生的抗体 ②单克隆抗体制备过程中经过两次筛选 ③由于淋巴B... -
陈没映盐酸:[选项] A. ②⑤ B. ②④ C. ③⑤ D. ①③④

宜春市19156913555: 为什么植被单克隆抗体要经过两次筛选 -
陈没映盐酸: 第一次是筛选出杂交瘤细胞;但这些杂交瘤细胞中有些是不能产生抗体的,还有些是不能产生我们需要的抗体的; 第二次就要筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.

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