高中生物:单克隆抗体问题 请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理是什么

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单克隆抗体中得到了杂交瘤细胞后为什么还要进行杂交瘤细胞的筛选?~

第一次筛选:

(1)筛选对象:脾细胞、瘤细胞、脾-脾细胞、瘤-瘤细胞、脾-瘤细胞(即羊红细胞免疫过的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后得到的细胞混合液)。另有少量多细胞聚体,因寿命短而迅速死亡,故无需特殊筛选。

(2)筛选方法:用HAT选择培养基筛选出正常生长的细胞。(注重:HAT培养基含有次黄嘌呤H、氨基喋呤A和胸腺嘧啶核苷T。其中氨基喋呤能阻断核酸合成的主通路,而次黄嘌呤在磷酸核糖转移酶HGPRT的催化下能合成RNA或胸腺嘧啶核苷在胸腺嘧啶核苷激酶TK的催化下合成DNA均属于核酸合成的旁通路。)

(3)筛选结果:脾-瘤细胞正常生长,其它细胞都会死亡。(析因:脾细胞和脾-脾细胞的核酸合成主通路被氨基喋呤阻断,虽有核酸合成的旁通路,但不能长期增殖;瘤细胞和瘤-瘤细胞缺乏核酸合成旁通路的酶,核酸合成主通路又被氨基喋呤阻断,因核酸合成障碍而死亡;脾-瘤细胞具有脾细胞的核酸合成旁通路酶,虽核酸合成主通路被氨基喋呤阻断,但可利用培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核酸而得以生存。)

第二次筛选:

(1)筛选对象:多克隆杂交瘤细胞群体。(即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。)

(2)筛选方法:抗体检测( 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等,实际上是利用稀释法,在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养,然后检查每孔中产生特定抗体的能力)。

(3)筛选结果:产生专一性抗体的杂交瘤细胞。

1.
从经过特异性免疫的实验动物体内提取b细胞
2.
用动物细胞融合的方法将b细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞
3.
用特定的选择性培养基筛选出能够无限增殖并产生特异性抗体的杂交瘤细胞
4.
进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔,将来从腹水中提取。体外培养,就是利用动物细胞培养的方法,将来从培养液中提取
单克隆抗体的优点是:特异性强、灵敏度高,并可大量制备

原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养,未融合的细胞不能合成核酸,就会死亡。
未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常,不能合成核酸。融合细胞可以通过旁路合成核酸,从而存活。

杂交瘤细胞具有双亲细胞的遗传特性,既能产生专一抗体,又能无限增殖,所以不会死去。第一次筛选的原理是特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选的原理是专一抗体阳性检测筛选出能产生特定抗体的细胞群。

如果不是杂交瘤细胞,就不能无限增殖,不能无限增殖的细胞寿命都是有限的,细胞的衰老和死亡是细胞正常的生命特征。
单克隆抗体的制备过程有两次筛选,第一次筛选是为了获得杂交瘤细胞,可以根据细胞的形态、大小甚至染色体的数量来进行筛选,第二次筛选是为了获得能够制备抗体的杂交瘤细胞,可以用特定的培养基来进行筛选(选择培养基)。

因为杂交后有了可以不断增殖的基因,控制其不断地分裂。可以通过是否能表达出相应的抗体来进行筛选

高二生物上课:动物细胞工程之筛选杂交瘤细胞的原理和方法




单克隆抗体主要用途有哪些
它们可以作为靶向药物,精准地攻击病原体或异常细胞,减少对正常细胞的损伤。例如,在癌症治疗中,单克隆抗体可以阻断肿瘤细胞的生长信号,诱导肿瘤细胞死亡,从而达到治疗的效果。此外,单克隆抗体还可用于免疫疗法,调节机体免疫功能,治疗自身免疫性疾病。生物研究:单克隆抗体技术广泛应用于生物学研究,尤其...

简述单克隆抗体的发展历程、原理及应用是?
3、单克隆抗体的应用:作为亲合层析的配体;作为生物治疗的导向武器;作为免疫抑制剂;作为研究工作中的探针;增强抗原的免疫原性。相关信息:1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠...

单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别?
“生物导弹”是对单克隆抗体的一种形象化说法,因为它能象导弹那样准确地击中目标,而且它是用生物工程方法制造的(其本身当然是生物物质),所带杀伤物是一些生物物质,主要命中的目标也是生物物质,叫做生物导弹才是真正名符其实的。虽说抗体免疫是特异性的,那只是指这种抗体免疫专一地针对一种疾病。

单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别?
单克隆抗体由同一株B细胞克隆分泌,编码该抗体的基因序列完全一致。只识别单一抗原表位。多克隆抗体则是混合体,有动物体内所有可识别该抗原的B细胞分泌。可识别该抗原上的不同抗原表位。

什么是单克隆抗体?有何特点及应用价值?
分类:分子生物学知识 字号: 大大 中中 小小 1975年Kohler和Milstein首先报道,用细胞杂交技术,使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠的脾细胞,与小鼠的骨髓瘤细胞融合,并由此创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株,获得了抗SRBC的单克隆抗体。他俩首先创立了将能分泌特异性抗体的B淋巴细胞同无限繁殖的骨髓瘤细胞融合技术,为单克...

何谓单克隆抗体?其发展现状如何
这种杂交瘤细胞可在体外长期培养过程中,不断地分泌出大量的特异性抗体。由于骨髓瘤细胞和B 淋巴细胞多来源于同品系的BIc 小鼠,故又称鼠源性B 淋巴细胞瘤杂交技术。目前,用于免疫学检测的单克隆试剂种类很多,其中小鼠抗人CD 系列单克隆抗体试剂便有近百种,此外,还有小鼠抗人班产系列单克隆抗体试剂...

单克隆抗体杂交瘤细胞
在生物技术中,单克隆抗体的生产通常依赖于克隆化的细胞体外培养。这种方法可以大量培养细胞,通过收集上清液获得单一的克隆化抗体。然而,体外培养法存在局限性,如抗体产量受细胞浓度限制,且需要频繁更换培养液。为了克服这些限制,科研人员利用杂交瘤细胞技术,这是一种将亲代淋巴细胞的特性与肿瘤细胞遗传特性...

高中生物:抗癌药物是怎么与单克隆抗体结合的?请说明处理过程,谢谢!_百...
首先,作为过来人,很明确地告诉你,高考不会考这样的题。下面是过程:单克隆抗体与抗癌药物结合分为两种 一、非共价或物理结合 二、共价结合,需要交联剂,常用有有戊二醛,甲苯,二异硫酸。共价结合是共价结合法是利用酶蛋白中的氨基,羧基或酪氨酸和组氨酸中的芳香环与载体上的某些有机基团形成共价键,...

高中生物,有关单克隆抗体
1.这个B淋巴细胞就是效应B细胞,书上不是加了限定词么“能产生抗体的”2.LZ要明确一点,不是只要是融合的细胞,它就一定能表达,可能会因为诸多因素使得融合细胞不能分泌抗体,这是个复杂的过程。所以这一步是确定融合细胞能够表达(即分泌抗体),才能投入使用。像基因工程的最后一步,不就是目的基因...

生物: 单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷细胞,在含有次...
解析:因为脾细胞不可以无限繁殖。骨髓瘤细胞是一种缺陷细胞,但具有瘤细胞特性,可以无限繁殖;而脾细胞不可以,因为正常的细胞分裂次数是有限的,到一定的次数,细胞就会死亡,那么只要我们增加培养时间,结果只剩下骨髓瘤与脾细胞的杂交细胞。

天长市15275951046: 高中生物:单克隆抗体问题 请问为什么不是杂交瘤细胞就会死去,筛选原理是什么 -
叔姬施华: 原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养,未融合的细胞不能合成核酸,就会死亡.未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常,不能合成核酸.融合细胞可以通过旁路合成核酸,从而存活.

天长市15275951046: 高中生物 杂交瘤细胞能产生单克隆抗体是细胞中基因选择性表达的结果?为什么这么说呢? -
叔姬施华: 高中生物书上介绍的杂交瘤细胞就是小鼠骨髓瘤细胞和已经发生特异性免疫的小鼠B细胞(效应B细胞,又叫浆细胞)进行细胞融合产生的一种新细胞,它拥有骨髓瘤细胞和浆细胞的全副遗传物质(已经进行基因选择性表达了的),所以既能既...

天长市15275951046: 高中生物选修课本为什么在单克隆抗体处会说”B淋巴细胞能分泌抗体”分泌抗体不是浆细胞吗?B淋巴细胞不 -
叔姬施华: 这里的B淋巴细胞指的就是浆细胞. 教材中到了这里,所说的B细胞是从已经免疫的机体中取出的,也就是能产生抗体的B细胞,当然就是浆细胞了.

天长市15275951046: 高中生物!制备单克隆抗体原理? -
叔姬施华: 制备单克隆抗体的原理是杂交瘤细胞,既具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,又能分泌一种特异性抗体

天长市15275951046: 高中生物一单克隆抗体实验问题. -
叔姬施华: 单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的,杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和效应B细胞融合而成.只有效应B细胞(浆细胞)能产生抗体,而未经免疫的B淋巴细胞不能产生抗体

天长市15275951046: 高中生物!制备单克隆抗体原理?
叔姬施华: 要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长.而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,

天长市15275951046: 生物单壳隆抗体为什么属于克隆?
叔姬施华: 不属于克隆技术,是细胞融合技术啊.所谓单克隆指的是产生的抗体是同一种.

天长市15275951046: 高中生物,关于“生物导弹”有些疑惑 -
叔姬施华: 抗体具有特异性,一种抗体不是对所有的抗原起作用的.并且抗体不能使人体细胞死亡. 生物导弹中的单克隆抗体应该是起识别癌细胞作用的,而与之相连的抗癌药物就是具有杀伤作用的“火药”.(个人之见)

天长市15275951046: 关于高中生物单克隆抗体的题 -
叔姬施华: A.能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制的试剂 [淋巴细胞属于暂不分裂细胞,所以如果骨髓瘤细胞的DNA复制也被抑制了,那么筛选出杂交瘤细胞的难度就降低了] B.能激活淋巴细胞的原癌基因的试剂 [原癌基因的作用是调节细胞周期和分裂,被激活了不就可以开始复制了??那不是反而加大筛选难度了] C.能阻止杂交瘤细胞的核糖体上所有蛋白质的合成的试剂 [核糖体不能合成蛋白质了,那么还怎么产生抗体,还要杂交瘤细胞干嘛] D.能抑制淋巴细胞的DNA复制的试剂 [淋巴细胞属于暂不分裂细胞,本来不抑制它一般也不会分裂.做这事有意义么???而且骨髓瘤细胞不是还可以照常分裂.所以这是无用功] 答案A

天长市15275951046: 高中生物题,要说原因 -
叔姬施华: 1.a 2.第二个,获取真核生物的基因不能用鸟枪法,原因就是成本高,操作复杂,而且有内含子.高中接触的抗虫基因是原核生物苏云金芽孢杆菌里的 A不属于蛋白质工程,你将蛋白质工程的定义再看一下就知道了..浆细胞在旧教材上被称作“效应B细胞”,就是说它是受到抗原刺激后形成的 适宜的阶段 C是对的

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