单克隆抗体的第二次筛选为什么是选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

单克隆抗体第一次筛选的杂交瘤细胞具有产生特异性抗体的特点，为什么第二次筛选仍然选能产生特异性抗体的~

单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选的原理和方法是不相同的。
第一次筛选的原理与方法：细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）。其依据是细胞中的DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的“D途径”。另一条途径是应急途径或补救途径（“S途径”），它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。因此，在HAT培养液中，未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“D途径”被氨基喋呤阻断，虽“S途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型（HGPRT）细胞，因此自身没有“S途径”，且“D途径”又被氨基喋呤阻断，所以在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的“S途径”，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。
第二次筛选的原理和方法：在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的，经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异，所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞。通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。因此，单克隆抗体制备过程中，两次筛选的原理和方法是不相同的。

第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，用连续注射抗原，下面具体介绍一下：
1、在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的，经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异，所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞；
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。

拓展资料：
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
参考资料：单克隆抗体百度百科：网页链接

1种效B是只能产一种抗体，但你怎么能保证从小鼠体内抽出的效B只是唯一一种呢？也许你打乙肝抗原时，他感染过感冒，这样就会含有感冒的效B了，第二次筛选就是把其它效B与骨髓瘤融合的杂交瘤去掉
这样才能生产出纯净的单抗。

所谓四源杂交瘤细胞就是将能够分泌不同特异性的单抗进行第二次融合，形成四源杂交瘤细胞。但二次杂交的细胞可以分泌两套重链和轻链，这些重链和轻链可以随机组和。这样，其实就是一个排列组合问题。另外，要搞清楚什么叫双特异性，单特异性和无活性抗体。
应该可以产生1种双特异性抗体；6种单特异性抗体；3种无活性的抗体。

杂交瘤细胞是为了大量生产 ，效应B细胞的抗体不纯，也很难分离

单克隆抗体在疾病的诊断和治疗预防方面，与常规的抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性非常明显，可利用此特性制成“生物导弹”用来运送药物至病害部位，主要是癌细胞。

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石峰区17758484342： 单克隆抗体的第二次筛选为什么是选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞. - ？
管索万通： 1种效B是只能产一种抗体,但你怎么能保证从小鼠体内抽出的效B只是唯一一种呢?也许你打乙肝抗原时,他感染过感冒,这样就会含有感冒的效B了,第二次筛选就是把其它效B与骨髓瘤融合的杂交瘤去掉 这样才能生产出纯净的单抗.

石峰区17758484342： 单克隆抗体的制备过程中,经过第一次筛选,已经选出了杂交瘤细胞;还要进行第二次筛选,第二次筛选的目的是选出 - ？
管索万通：[选项] A. 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 B. 能增殖的杂交瘤细胞 C. 细胞周期长的杂交瘤细胞 D. 产生多种抗体的杂交瘤细胞

石峰区17758484342： 单克隆抗体的第二次筛选 - ？
管索万通： 筛选出有特异性的杂交瘤细胞,因为第一次筛选出的基因虽然对的,但不一定表达.

石峰区17758484342： 为什么植被单克隆抗体要经过两次筛选 - ？
管索万通： 第一次是筛选出杂交瘤细胞;但这些杂交瘤细胞中有些是不能产生抗体的,还有些是不能产生我们需要的抗体的; 第二次就要筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.

石峰区17758484342： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
管索万通： 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述

石峰区17758484342： 在制备单克隆抗体是为什么要进行两次筛选 - ？
管索万通： 第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞

石峰区17758484342： 单克隆抗体两次筛选的理由? - ？
管索万通： 第一2113次:筛选出AB型细胞(A:浆细胞,B:骨髓瘤细胞),不要AA、5261BB型. 第二次:筛选出有特异性的4102杂交瘤细胞,检验阳性.单克隆细胞特点:1653灵敏度高、特异性强、可大量制备 杂交瘤细胞特点:能体外大版量繁殖....忘记了...详细请看人教版生物权选修三

石峰区17758484342： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
管索万通：[答案] 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述

石峰区17758484342： 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 - ？
管索万通： 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

石峰区17758484342： 制备单克隆抗体需要进行几次筛选,目的分别是什么? - ？
管索万通：[答案] 两次.第一次是筛选出浆细胞—浆细胞融合细胞 和 浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(抗原抗体反应) 第二次是筛选出浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(继续培养)