如何快速提取全血RNA的步骤
取新鲜的血液（紫管），加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10,000 rpm离心1分钟。
彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。
每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min，使样品充分裂解。
4℃12,000 rpm 离心10分钟，取上清（）。
每1ml TRIzol加入200μl氯仿，剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min，自然分相。
4℃ 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA主要在水相中，把水相转移到新管中（小心吸取水相）
在上清中加入等体积冰冷的异丙醇（），室温放置10-20min。
4℃ 12,000 rpm离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。
RNA沉淀中加入1ml 75%乙醇（用RNase-free水配制，），温和振荡离心管，悬浮沉淀。
4℃5,000-8,000 rpm离心1-2min，弃上清。
室温放置1-2分钟晾干沉淀。
沉淀中加入50-100μl RNase-free水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存。
检测纯度和浓度（OD260/OD280在2.0左右）
如何从酵母快速提取总RNA
摘要： 总RNA提取中，除了某些富含多糖多酚的植物组织以及土壤较为困难外，酵母由于其复杂的细胞壁结构也给实验人员造成不小的麻烦。
众所周知，总RNA提取的纯度与完整性，对于许多分子生物学实验的进展都至关重要，比如，Northern 印迹及杂交分析，cDNA文库构建等，这些实验的成败在很大程度上取决于总RNA的提取质量。对于RNA含量丰富，易于破碎的样品来说，高质量RNA的提 取并非难事，但对于破壁较为困难的材料——酵母来说，就并非人人都能很好地提取出高质量的RNA。
酵母菌是一些单细胞真菌，目前已知的酵母菌有1000多种。酵母菌有三类：子囊菌、担子菌和“假酵母”。目前已知大部分酵母都属于子囊菌门，这是一种产生 孢子的菌。酵母菌主要生长在潮湿或液态环境，有些也会生存在生物体内。目前，尤其是食品行业中，酵母菌显得异常兴盛，比如啤酒发酵，酸奶污染等都与酵母息 息相关。所以，科研人员对酵母菌的研究工作也是越来越热。但是，在进行更深层次研究时，却都会碰到一个棘手的问题——高质量酵母总RNA的获取。
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙 醇!
使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X.
操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇.此裂解液最好现用现配.配好的RLT 4℃可放置一个月.
1. 在适合大小的RNase free离心管中加入1体积（<1.5 ml）加入各种抗凝剂新鲜血液 （颠倒混匀后）和3体积的红细胞裂解液RLB,颠倒混匀,可轻弹管壁,确保混匀.
2. 室温放置10分钟（期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞）.
如果RNA降解严重,可在冰上裂解,但是时间可长一些以充分裂解.
3. 12,000 rpm离心20秒,倒弃红色上清,并小心的尽可能多的吸弃上清（注意不要吸到管底的细胞团）,留下完整的管底白细胞团.
离心后在管底应该见到白色的白细胞团,也可能有一些红细胞残片和白细胞团在一起,但是如果看到的是大部分的红色细胞团,说明红细胞裂解很不充分,应该再加入红细胞裂解液重悬细胞团后重复步骤2,3.
β-巯基乙醇上清尽可能的吸弃,残留过多会稀释裂解液,造成裂解结合异常,产量纯度降低.
4. 涡旋或者轻弹管壁将白细胞沉淀完全松散重悬,加入350μl（<0.5 ml全血）或者600μl（0.5-1.5ml全血）裂解液RLT,吹打混匀后用手剧烈振荡20秒,充分裂解.病人血样中白细胞数量可能大幅增加,应该适当减少处理量.或者按照350μl（<2x106白细胞）或者600μl（2x106-1x107白细胞）比例加RTL.
5. 用带钝针头的一次性 1 ml（配0.9mm针头） 注射器抽打裂解物 5-10 次或直到得到满意匀浆结果（或者电动匀浆30秒）,可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量.
6. 较精确估计裂解物体积,加入等体积的70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!）,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心.
7. 立刻将混合物（每次小于700μl,多可以分两次加入）加入一个吸附柱RA中,（吸附柱放入收集管中）13,000 rpm离心60秒,弃掉废液.
8. 加700μl 去蛋白液RW1,室温放置30秒,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液.
如果DNA残留明显,可在加入RW1后室温放置5分钟再离心.
9. β-巯基乙醇加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!）,12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液.加入500μl漂洗液RW,重复一遍.
10. 将吸附柱RA放回空收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应.
11. 取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water（事先在 70-80℃水浴中加热效果更好）, 室温放置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟.
12. 如果提取全血>0.5 ml或者>2x106白细胞,加30-50μl RNase free water重复步骤11,合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍（如果需要RNA浓度高）.
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择.
血块中提取RNA的步骤
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点：处理的体积血液体积有限，一般1ml Trizol处理100ul血液，最多不超过200ul.2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞（即淋巴细胞），然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点：只能提取得到淋巴细胞的RNA，血液中游离的如病毒RNA...
...提RNA?或者用什么方法可以将血块溶解,在提取RNA呢?
(1) 可以选择RN25 RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒,这个原理就是先红细胞裂解液裂解红细胞得到白细胞，然后Trizol(TRIpure)裂解白细胞，最后离心柱子漂洗。(2) 也可以用RN23 RNAliquid 超速全血（液体样本）总RNA提取试剂盒。(3) RN06 EASYspin 全血RNA快速提取，这款和Qiagen的qiaamp...
血液提取总RNA和组织提取有哪些区别
2. 准确切除所需组织。3. 离体新鲜组织，立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。4. 在RNase-free 的0.9％生理盐水中漂洗样品，以去除血渍和污物。5. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织，迅速投入液氮冷却。6. 把样品袋（纱布袋等）放入液氮中冷冻一下，而后将液氮冷却的组织放入...
提取RNA的血液怎样保存
传统的提取新鲜全血RNA方法是把先把有核细胞从全血中分离出来，需要加白细胞分离液、离心等步骤，比较繁琐，在临床医院往往难以实施。作为RNA提取的领先公司，北京艾德莱的研发人员在05年国内首家研发成功液体样本RNA提取试剂RN01 TRIpure LS(LS 意思是Liquid Sample。可以直接裂解全血提取RNA，避免了先裂解白...
请问血流变中全血黏度中的低,中,高切代表什么意思。
(2)高粘滞型:全血粘度增高、血浆粘度增高,全血还原粘度增高、纤维蛋原含量增高、Hct增高。VJNm (3)红细胞聚集型:红细胞沉降率变快,血沉方程K值增高,红细胞电泳变慢。%0wU (4)红细胞刚性升高型:红细胞刚性指数增高、TK值增高、变形。3 (5)高凝固型:纤维蛋白原含量增高、血小板粘附率增高、血小板聚集增高,体外...
紫苏有何用途
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用Blood这单词写几个英文短语!
whole blood 【医】直接从活人身上抽血, 以便输血 泛指没有提取任何成分的全血 同父同母的关系 young blood 年青人 青春的活力 新鲜血液; 新成员 B-and Entrails 英国商船旗 blood and iron 【史】铁血主义; 战争政策 blood and soil 鲜血与祖国(纳粹口号)blood and thunder 凶杀情节 充满凶杀情节的...
提取RNA的血清如何冻存
用消毒镊子将组织从存贮溶液RNAlater 中取出,浸泡在RNA 提取溶液中。一旦将组织放入RNA提取溶液中,匀浆一定要迅速进行。细胞 从存贮在RNAlater 中的细胞中提取RNA 有两种操作方法可供选择:去除RNAlater 或者从细胞与RNAlater 的混合物中直接提取RNA。5. 从RNAlater 中取出样品去除RNAlater 因为RNAlater 的浓度比典...
血清应在什么条件下保存
负二十度冰箱保存
牢狐因瑞：[答案] 方法与细胞组织提RNA基本相同.具体有以下几种方法.A:分离淋巴细胞群再提取1.新鲜血液2ml,肝素钠抗凝,D-HANK'S对倍稀释.2.将稀释液轻置于4ml淋巴细胞分离液上层.3000rpm x 20min,4度.3.取淋巴细胞层,PBS对倍稀释,300...
翠云区19171849216： 怎样提全血RNA - ？
牢狐因瑞： 方法与细胞组织提RNA基本相同.具体有以下几种方法. A:分离淋巴细胞群再提取 1. 新鲜血液2ml,肝素钠抗凝,D-HANK'S对倍稀释.2. 将稀释液轻置于4ml淋巴细胞分离液上层.3000rpm x 20min, 4度.3. 取淋巴细胞层,PBS对倍稀释,3000...
翠云区19171849216： 从全血里提取RNA的方法? - ？
牢狐因瑞： 10月13日 13:35 RNAgents总RNA提取系统 1)Promega有哪些系统用于提取总RNA及poly(A)+RNA? 2)RNAgents®总RNA提取系统的工作原理怎样? 3)RNAgents®总RNA提取系统的一般得率是多少? 4)RNAgents®总RNA提取系统的各组分的...
翠云区19171849216： trizol法提取血中的RNA,怎样做量会更多 - ？
牢狐因瑞： 或再适当延长一点时间.迅速离心,少加些血.混匀之后放置10分钟左右,混匀再去离心. 可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷1 血要新鲜,之后加75%乙醇.只洗一遍. 3 每个步骤操作要快,用的时间药短些,防止降解 4 异丙醇沉淀的时候,放-20°C的冰箱半个小时.一般我都加的30.如果需要浓度高点可以少加水. 6 提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存,洗2遍易损失部分RNA.如果是冻存的,在解冻时要完全,之后再加Trizol. 2 可以稍多加一些Trizol,直接加三氯甲烷.干燥一会就迅速加DEPC水少量. 5 不要过分干燥,管内稍有点残余的乙醇也没关系
翠云区19171849216： 怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA - ？
牢狐因瑞： 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...
翠云区19171849216： 如何选择最佳的全血DNA,RNA提取方法 - ？
牢狐因瑞： 如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法?从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了,提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析,可供选择的方法非常多,乱花渐欲迷人眼,如何选择最适合的方法,成了很多人实验...
翠云区19171849216： 如何提取血RNA - ？
牢狐因瑞： 都应该是可以的.不过提取RNA一般都用kit(试剂盒),RNA和DNA不一样,杂质多,易降解,所以基本上不用自己配的溶液提. 虽然我个人没有做过,但是全血和血清中提取RNA都是可以的,只是用的trizol和提取组织细胞中的不一样. 你尝试搜索一下Trizol LS,看看是不是你需要的.
翠云区19171849216： RNA提取用什么方法,具体的步骤?？
牢狐因瑞：1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积不应超过TRIzol体积10℅. b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用...
翠云区19171849216： 抽全血做二代测序抽rna用什么方法 - ？
牢狐因瑞： 提取RNA是吧,可以用酚氯仿提取,也可以用凯杰生物的RNA提取试剂盒的
翠云区19171849216： RNA的提取步骤是什么 - ？
牢狐因瑞： 去买生物公司的RNA提取试剂盒,这样比自己配试剂提取出来的要纯净的多,量也多,还方便.买了不同量的提取试剂盒后,上面会有操作步骤
