国标中大肠菌群检测什么情况下加样量为1mL和10mL

食品中大肠菌群、细菌总数检测多少为合格，我是做快餐的~

食品微生物学检验中菌落总数和大肠菌群等标准（包括2010年版）都是微生物的检测方法，而不是微生物指标（合格个数）的执行标准，食品微生物多少个算合格的标准是按照相关产品的国家标准制订的，比如冰棍的执行标准是SB/T10016-2008，食用冰的执行标准是SB/T10017-2008，甜味冰的执行标准是SB/T10327-2008，这三个标准里面对相应产品的卫生指标（包括总砷、铅、铜、菌落总数、大肠菌群、致病菌）都是规定的应符合GB2759.1，GB2759.1里面对微生物指标规定分四种，1、含乳蛋白冷冻饮品菌落总数应小于25000cfu/ml，大肠菌群小于450MPN/100ml； 2、含豆类冷冻饮品菌落总数应小于20000cfu/ml，大肠菌群小于450MPN/100ml；3、含淀粉或果类冷冻饮品菌落总数应小于3000cfu/ml，大肠菌群小于100MPN/100ml；4、食用冰块菌落总数应小于100cfu/ml，大肠菌群小于6MPN/100ml。GB2759.1里面的菌落总数和大肠菌群指标才是菌落总数多少为合格大肠菌群多少为合格的标准，而不是由2010版的食品卫生微生物学检验方法来解释的或制订的。执行标准和检验标准你应该区分清楚。
我的回答里面涉及到的标准你可以在食品伙伴网里面下载，食品伙伴网的网址是http://down.foodmate.net/standard/

一、大肠菌群介绍
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
二、大肠菌群检验方法：
由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。
目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。
（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。
乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。
证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。
报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。
具体操作参见GB4789.3-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定》
（二）原国家商检局制订的行业标准，等效采用美国FDA的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。本方法采用两步法：
推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值。
具体操作参见 SN0169-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》
三、说明：
1．MPN检索表：
MPN 为最大可能数(Most Probable Number)的简称。这种方法，对样品进行连续系列进行稀释，加入培养基进行培养，从规定的反应呈阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中菌数最近似的数值。
MPN检索表只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。注意国家标准和行业标准中所附MPN表所用稀释度是不同的，而且结果报告单位也不相同。
2．初发酵和证实试验：
无论是国家标准的三步法还是行业标准的两步法，都利用了乳糖发酵管进行了两次发酵试验，培养基的配制略有不同，但都是为了证实培养物是否符合大肠菌群的定义，即“在37℃分解乳糖产酸产气”。
初发酵阳性管，不能肯定就是大肠菌群细菌，经过证实试验后，有时可能成为阴性。有数据表明，食品中大肠菌群检验步骤的符合率，初发酵与证实试验相差较大。因此，在实际检测工作中，证实试验是必需的。
3．产气量与倒管：
在乳糖发酵试验工作中，经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡（有时比小米粒还小），有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。实验表明，大肠菌群的产气量，多者可以使发酵倒管全部充满气体，少者可以产生比小米粒还小的气泡。如果对产酸但未产气的乳糖发酵如有疑问时，可以用手轻轻打动试管，如有气泡沿管壁上浮，即应考虑可能有气体产生，而应作进一步试验。
4．挑选菌落：
国家标准中，需要对初发酵阳性培养物接种伊红美蓝平板分离，对典型和可疑菌落进行观察和证实试验。由于大肠菌群是一群细菌的总称，在平板大肠菌群菌落的色泽、形态等方面较大肠菌更为复杂和多样，而且与大肠菌群的检出率密切相关。国家标准方法规定伊红美蓝平板为分离培养基，在该平板上，大肠菌群菌落呈黑紫色有光泽或无光泽时，检出率最高；红色、粉红色菌落检出率较低。
另外，挑取菌落数与大肠菌群的检出率有密切关系，只挑取一个菌落，由于机率问题，尤其当菌落不典型时，很难避免假阴性的出现。所以挑菌落一定要挑取典型菌落，如无典型菌落则应多挑几个，以免出现假阴性。
5．抑菌剂：
大肠菌群检验中常用的抑菌剂有胆盐、十二烷基硫酸钠、洗衣粉、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等。抑菌剂的主要作用是抑制其它杂菌，特别是革兰氏阳性菌的生长。
国家标准中乳糖胆盐发酵管利用胆盐作为抑菌剂，行业标准中LST肉汤利用十二烷基硫酸钠作为抑菌剂，BGLB肉汤利用煌绿和胆盐作为抑菌剂。
抑菌剂虽可抑制样品中的一些杂菌，而有利于大肠菌群细菌的生长和挑选，但对大肠菌群中的某些菌株有时也产生一些抑制作用。有些抑菌剂用量甚微，称量时稍有误差，即可对抑菌作用产生影响，因此抑菌剂的添加应严格按照标准方法进行。

国标说的很清楚。做-1，-2，-3的家1ml，做原液，-1，-2的加10ml，1ml，1ml，不过-1的应该是双料的。我是这么理解的。

国标方法中不是有说吗,将水样充分混匀后，根据水样污染的程度确定水样接种量.

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南沙群岛19430531854： 国标中大肠菌群检测什么情况下加样量为1mL和10mL - ？
第到奥维： 国标说的很清楚.做-1,-2,-3的家1ml,做原液,-1,-2的加10ml,1ml,1ml,不过-1的应该是双料的.我是这么理解的.

南沙群岛19430531854： 大肠菌群检测双料单料各加多少培养基 - ？
第到奥维： 在多数情况下,双料使用十毫升的培养基,加十毫升的样品;单料使用九毫升的培养基,加一毫升的样品,当然,这是根据实验的需求,是可以自行设计的.

南沙群岛19430531854： 测试大肠菌群时国家检测标准最低检测量为3mpc/g,而产品国家标准要求为0.3mpc/g,需要如何进行检测. - ？
第到奥维： 纠正你的一个错误,单位应该是MPN/g,标准是GB4789.3-2010 应该按照国家标准进行检测,现在的食品检测标准为强制标准,如果卫生标准是0.3,那么在检测过程中将不得有阳性管,即阴性,否则为不合格.

南沙群岛19430531854： 微生物实验 水体中细菌总数的测定和大肠菌群的测定. - ？
第到奥维： 3倍乳糖胨液体培养基(三倍料)是用来接种100ml或者10ml的水样,而普通浓度的乳糖蛋白胨液体培养基(单倍料)是用来培养接种1ml及以下体积的水样.这是为了保证在接种完水样之后,其浓度接近于单料的浓度.而单料的浓度是最适宜大肠菌群生长的.例如:100ml水样+50ml三倍浓缩料,最后体积是150ml,三料被稀释了3倍,最后的浓度恰好是单倍料.10ml水样可以加5ml单料也可以加10ml双料1ml水样对浓度影响不大,就直接加单倍料里了.

南沙群岛19430531854： 大肠菌群mpn表是看lst肉汤管数量还是bglg管数量 - ？
第到奥维： 根据现行国标《GB 47893-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》规定——6.3 复发酵试验:用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环, 移种于煌绿乳糖胆盐肉汤( BGLB)管中, 36 ℃±1℃培养48 h±2 h,观察产气情况.产气者,计为大肠菌群阳性管. 然后根据BGLB产气泡的管数,对应去查MPN.所以是看BGLB的数量.

南沙群岛19430531854： 请问大家,大肠杆菌的检测有以下几个标准,什么情况下选用哪个标准来测定啊,我会追加悬赏 - ？
第到奥维： 如果是你的单位自检,就用传统的国标方法,GB的 如果是你的单位所属监管单位检查,就按照监管单位的行标来检,SN的 如果是你的单位产品需要出口,需要提供相关检测报告的,就用进出口的 推荐使用快速测试片的方法,方便,快捷,准确,国内外认证

南沙群岛19430531854： 我国卫生部门对自来水的微生物总菌量和大肠杆菌量有何规定 - ？
第到奥维： 微生物总量100个/mL;大肠杆菌总量3个/L.

南沙群岛19430531854： 关于大肠杆菌的测定及查表？
第到奥维： 首先你的检样必须按标准7.1的要求进行稀释,即称取检样25g(液体吸取25ml),用225ml灭菌生理盐水稀释成为1:10的均匀的稀释液.再以1:10为基准液稀释成1:100、1:1000……等稀释液. 国标的MPN表是用1:10液1ML,1:100液1ML和1:...

南沙群岛19430531854： 水质检测中大肠菌群11MPN/ml超标了吗? - ？
第到奥维： 在《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)中,指标限值中明确表示:总大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出 耐热大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出 大肠埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出 菌落总数(CFU/mL) 100 你这个每毫升检出11,这样的水最好别喝.

南沙群岛19430531854： 双歧杆菌为什么在国标中要被检测 - ？
第到奥维： 国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准.两个标准方法在检测程序上略有不同.(一)国家标准:国家标准采用三步法,即:乳糖发酵试验、分离培养和证实试验.乳糖发酵试验:样品稀释后,...