单克隆筛选原理
单克隆抗体的两次筛选剂 以及原因
惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的“S途径”，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。B 第二次筛选的原理和方法:通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一...
基因克隆中蓝白斑筛选法筛选阳性克隆的原理.
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法： 是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数...
单克隆抗体制备过程中经过两次筛选
单克隆抗体制备过程中经过两次筛选单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选的原理和方法是不相同的。第一次筛选的原理与方法：细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的...
单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法
2、通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。
基因克隆有哪些步骤,如何筛选阳性克隆
简单的说一下：扩增目的基因，比如通过PCR的方法。PCR扩增的序列可以通过酶切或者TOPO TA的方法插入到载体质粒。转染大肠杆菌 筛选阳性克隆一般常采用蓝白克隆方法，就是在载体上，序列的插入位置本来是一个完整编码β-gal这个酶的序列，如果不被破坏，产生的酶可以降解细菌培养盘上的底物，形成蓝色产物。
什么叫阳性克隆筛选法? 请打击帮帮忙!!
所以要同时导入一个报告基因（目的基因和报告基因位于同一个载体上）。导入了报告基因的大肠杆菌在含抑制性物质的培养基上就可以生长，而不含报告基因的大肠杆菌（就是转化失败的）就不能生长。这样过了两三天后，在培养基上看见的菌落就是阳性科隆。这一过程就是阳性科隆筛选。一般选用的报告基因像青霉素...
单克隆抗体制备两次筛选的方法和目的?
在终次筛选中，可以通过检测抗体的亲和力、特异性和功能活性等指标来评估克隆细胞产生的单克隆抗体质量。初次筛选和终次筛选是单克隆抗体制备过程中的重要步骤，通过这两次筛选可以选择出高质量的单克隆抗体，从而应用于生物医学研究、诊断和治疗等领域。
采用质粒载体克隆目的基因,请问如何准确筛选出带有目
如果是做基因克隆的话,可以直接用蓝（兰）白斑筛选.一般的克隆载体上有Lac Z基因,在IPTG和X-gal作用下能产生蓝斑,而此基因中间有多克隆位点,当你的片段基因插入时,把这个基因给破坏了,不能产生兰斑,而只是产生白斑.这样就区别开来,象PUC18\/19,PBR322等最常用的质粒都有Lac Z基因.对载体的要求：①...
直接针对目的dna进行克隆筛选的方法是?
分子杂交。直接针对目的dna进行克隆筛选的方法是分子杂交。不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。
定位克隆的筛选方法
用候选区域基因组DNA作为探针与总RNA杂交，切下阳性条带，反转录为cDNA并克隆，即可获得位于此基因组片段中的转录子。上述方法都各有其优缺点，必须根据原材料及要达到的目的，选择适当的一种或多种方法组合来达到研究目的。此外，其它方法还很多，如微切割和微克隆法、减法cDNA杂交法、重组筛选法等。
云溪区复方回答： 原理是把细胞放到HAT选择培养基中培养,未融合的细胞不能合成核酸,就会死亡.未融合细胞次黄嘌呤转移酶和胸腺苷酶活性正常,不能合成核酸.融合细胞可以通过旁路合成核酸,从而存活.
阙钟18367172522问： 单克隆的原理? - ？
云溪区复方回答： 你说是单克隆抗体吧,是利用单一细胞快速培养时能产生纯度高,特异性强,灵敏度大的单一抗体的过程.
阙钟18367172522问： 单克隆抗体两次筛选的理由? - ？
云溪区复方回答： 第一2113次:筛选出AB型细胞(A:浆细胞,B:骨髓瘤细胞),不要AA、5261BB型. 第二次:筛选出有特异性的4102杂交瘤细胞,检验阳性.单克隆细胞特点:1653灵敏度高、特异性强、可大量制备 杂交瘤细胞特点:能体外大版量繁殖....忘记了...详细请看人教版生物权选修三
阙钟18367172522问： 1.生产单克隆抗体时,在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,该试剂的作用是 - ？
云溪区复方回答： 1、作用 能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制.2、原理 在这个单克隆抗体生产过程中,因为普通B淋巴细胞是不能体外生长的,所以必须将其与骨髓瘤细胞杂交才能实现体外生长,在这里骨髓瘤细胞只是相当于一种培养母体,我们并不需要其DNA的复制,而我们要生产的是专一抗性B淋巴细胞抗原,所以这种药剂要具有选择性,既不能影响淋巴细胞的DNA复制,又要抑制骨髓瘤细胞的DNA复制.
阙钟18367172522问： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
云溪区复方回答： 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述
阙钟18367172522问： 关于单克隆抗体的不正确叙述是() - ？
云溪区复方回答： B 单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体.(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
阙钟18367172522问： 什么叫单克隆抗体? - ？
云溪区复方回答： 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体. 1、单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术. 2、单克隆抗体是亲...
阙钟18367172522问： 质粒转染的大肠杆菌为什么要挑选单克隆? - ？
云溪区复方回答： 因为我们挑的是菌落,而一般我们认为一个菌落就是又一个细菌繁殖产生的.所以菌落内的细菌都是同一基因型(也就是说要不然都带有质粒,要不然都没有或者是其他质粒),也就是说要挑单克隆. 如果挑的不是单克隆,那么菌落内的细菌的种类就会不同,有的有质粒,有的没有,有的带其他质粒.这样的话,我们做后续的实验就不好做了.
阙钟18367172522问： 单克隆抗体的问题 - ？
云溪区复方回答： 两次筛选:第一次是筛选出杂交瘤细胞(同种细胞间的融合就不是如淋巴B细胞-淋巴B细胞)第二次是为了筛选出具有特异性抗体的杂交瘤细胞)望采纳~~祝你学习进步.
阙钟18367172522问： PCR扩增产物的克隆的原理及应用 - ？
云溪区复方回答： PCR在扩增的过程中可能会出现突变的情况,测序结果中就可能会出现套峰之类的情况,而克隆之后测序理论上每个单克隆里面只会出现一种PCR产物的插入片段,可以挑选不同的克隆进行测序,直到找到自己想要的那个.
