多克隆抗体的纯化方法都有哪些?急需高手讲解
可控性
多克隆抗体是一类抗体的总称而不是一种抗体，它们是一群有同一个抗原，但不一定是同一个抗原表位
纯化抗体的方法较多，建议用蛋白A 或蛋白G 微球纯化法作为最常用的方法。这种方法效率高，能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体，而且随着商品化的蛋白A，和蛋白G 基质的出现，能将任何来源的抗体纯化。抗体的纯化也可采用传统的色谱法，在某些情况下非常有用。这些方法包括DEAE 离子交换色谱法、硫酸镀沉淀法及其他方法。但是用蛋白G 或蛋白A 亲和柱法纯化较其他方法简单，并且纯化效果是其他方法的数倍。因此在所有方法中，我推荐这种方法。有一种情况不适于应用蛋白G 或蛋白A 亲和柱纯化抗体，即多克隆抗体需要进一步分离，且针对某种特异性抗原的组分需要分离。此时可用抗原结合的亲和柱纯化抗原恃异性抗体。
原理就是抗原抗体的结合。蛋白A和G被锚定在树脂上，IgA和IgG在过树脂柱子的时候能够被protein A和protein G捕获，留在柱子上，其他的杂蛋白会被洗掉，最后用特殊的洗脱液能够将IgA和IgG纯化下来。原理跟普通蛋白纯化的原理是一样的，只不过吸附介质不一样而已。
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检验技师考点:单克隆抗体的制备原理
单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体，PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B细胞克隆的标志，是一种独特型的抗体，它的特异性是针对一个抗原决定簇的。制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中去分离纯化得到它，而是用分离产生抗体的...
单克隆抗体时体内培养与体外培养各自的优缺点
迄今为止，通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法。优点：该法操作简便、经济。缺点：腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白（包括Ig），因此在很多情况下要提纯后才能使用，而且还有污染动物病毒的危险，故而最好用SPF级小鼠。（2） 体外培养生产单抗的方法 优点：单克隆抗体的浓缩和纯化比较方便。缺点：需要...
纯化的单克隆抗体,超滤浓缩的时候会把磷酸盐离心掉导致抗体的缓冲环境...
不会的。。。超滤浓缩对于缓冲液成分不会有任何改变的，因为PBS中的磷酸根离子也好，氯离子也好，钠离子也好都是很小的离子，可以在溶液中自由扩散，不会因为超滤离心就被甩到下层滤液中去。你可以做个简单的实验，取一定体积PBS溶液测一下pH值和电导率值，之后用超滤管去离心。取出上层未被滤完的溶液...
抗体的制备有哪些?
（1）多克隆抗体的制备。①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说，皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多；皮内免疫法所需的抗原量少，在抗原宝贵时特别适用，但与之相对的，它产生的抗体量也不多。混合免疫法的优点是抗原用量小，产生...
电洗脱纯化的蛋白可否用于单克隆抗体实验
电洗脱纯化的蛋白可以用于单克隆抗体实验，不过需要透析一下。能透析，有沉淀也可以。电洗脱的方法会使蛋白变性,这样对单克隆抗体免疫不影响吗,不会造成蛋白性质或功能的改变吗?如果免疫的蛋白变性，那么获得抗体就会针对你的变形蛋白的。也就是说你想做蛋白的结构或者功能的话，有可能出不了好的结果。
、回收目的片段时,选择切胶回收和直接纯化的主要原则是什么
就是想要的都留下来，不想要的都去掉。抗体纯化主要是根据类型和要求来纯化。比如单克隆抗体，过一下A蛋白或者G蛋白柱就是足够的纯了。1、分离提纯后的物质状态不变。2、实验过程和操作方法简单易行。即选择分离提纯方法应遵循先物理后化学，先简单后复杂的原则。3、保证酶的活性正常保持不失活，避免...
单克隆抗体制备的杂交瘤细胞可以纯化到100%吗
理论上是可以的。因为在最后的检测阶段是一个孔中只培养一个细胞，呈阳性的才是产生特定抗体的杂交瘤细胞。
单克隆抗体应用
在蛋白质提纯方面，单克隆抗体在亲和层析中扮演着关键角色。通过将抗体固定在惰性固相基质上，形成层析柱，样品中的目标抗原能与抗体结合，从而实现分离。通过调整洗脱条件，可以有效纯化抗原。在治疗领域，单克隆抗体被用于肿瘤导向治疗，通过将抗体与化疗药物或放射性物质连接，让药物或放射能定向到达肿瘤细胞...
免疫学技术知识总结 第二章
(1) 完全抗原的提取:细胞破碎法、抗原提取、抗原的纯化 (2)半抗原与载体的交联:载体的选择、半抗原与载体偶联的方法、偶联复合物的鉴定 (3)合成肽抗原:免疫原性肽的选择、肽的合成和纯化 2. 免疫动物的选择: 3. 佐剂的准备: 佐剂的种类:无机佐剂、有机佐剂、合成佐剂、油剂 三、多克隆抗体制备的基本方法 1...
简述单克隆抗体的制备过程。
是单克隆抗体。单抗的制作过程大体分为抗原的制备，动物的免疫，b细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，筛选杂交瘤细胞，筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的克隆化，体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆，单抗的纯化及鉴定。
镇军牛黄： 纯化抗体的方法较多,建议用蛋白A 或蛋白G 微球纯化法作为最常用的方法.这种方法效率高,能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体,而且随着商品化的蛋白A,和蛋白G 基质的出现,能将任何来源的抗体纯化.抗体的纯化也可采用传统的...
华亭县13656109450： 多克隆抗体的分离纯化 - ？
镇军牛黄： 多克隆抗体的提取纯化 一、批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡.将水分抽干,或用布氏滤斗...
华亭县13656109450： 抗体蛋白纯化有什么好的方法? - ？
镇军牛黄： 纯化抗体的方法较多,建议用蛋白A 或蛋白G 微球纯化法作为最常用的方法.这种方法效率高,能为常用的实验方法提供足够纯化的抗体,而且随着商品化的蛋白A,和蛋白G 基质的出现,能将任何来源的抗体纯化.抗体的纯化也可采用传统的色谱...
华亭县13656109450： 抗体蛋白质纯化的好方法 - ？
镇军牛黄： 抗体纯化分了几种类型,根据用途决定选择哪种方法进行纯化: 1. 粗纯:将制备抗体的血清或是腹水,细胞上清,直接用盐析法进行处理,这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉,获得蛋白的成分,但是由于是粗纯,里面会混有大量的其他...
华亭县13656109450： 多克隆抗体的制作步骤用疫苗制备抗体,剂量怎么算 - ？
镇军牛黄： 一、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:1、制备抗原.2、选择实验动物.3、动物免疫.4、试取血进行测试,看看是否成功免疫.5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清.6、纯化出抗体.7、鉴定抗体.包括纯度以及特异性...
华亭县13656109450： 多克隆抗体的制作需要准备什么? ？
镇军牛黄： 多克隆抗体的制备抗原制备动物免疫血清采集与检测多抗纯化与保存单克隆抗体的制备概述B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性...
华亭县13656109450： 多克隆的抗体和单克隆的抗体的区别? - ？
镇军牛黄： 区别有很多呀,定义、制备的过程、应用的范围都是不同的.定义:由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体.而由多个B淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合...
华亭县13656109450： 兔多克隆抗体的制备流程有哪些啊? - ？
镇军牛黄： 睿星生物制备流程:多肽抗原与KLH耦连,免疫2只新西兰白兔;耳动脉采血测效价;颈动脉放血收集血清. 睿星生物制备结果:提供20ml~30ml的多抗血清和3ml免疫前血清, 鉴定报告包括间接ELISA法测定的效价.项目服务时间3~4个月.
