检验技师考点：单克隆抗体的制备原理
检验技师考点：单克隆抗体的制备原理
单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体，PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B细胞克隆的标志，是一种独特型的抗体，它的特异性是针对一个抗原决定簇的。制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中去分离纯化得到它，而是用分离产生抗体的B细胞克隆的方法得到它。为了使B细胞克隆能在体外人工培养下长期存活并产生完全均一的MAb，G.KÖ;hler合Milstein于1975年创立了杂交瘤方法。所以制备单克隆抗体的技术又称杂交瘤技术(hybredoma technique)。
基本原理
其原理是：B淋巴细胞能够产生抗体， 但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代， 但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的.杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。
步骤：
一.提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。
二.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性
三.对杂交瘤细胞进行细胞培养，选出所需要的细胞群，体外或体内培养，从培养液或动物腹水中提取单克隆抗体
单克隆抗体的提纯
一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。
单克隆抗体的保存 由腹水中获得的抗体,经离心去除细胞成分，再经冷冻超速离心,取上清液加0.1%NaN3，少量分装，冷冻于-70℃可保存几年。 但应避免反复冻融,否则抗体失活，特别是IgM抗体。提纯的单克隆抗体,冷冻干燥保存于2～8℃，取出时溶解后，保存于2～8℃，至少一个月内可保持稳定。腹水抗体也可冷冻干燥低温(4℃)保存两年，融化后放置4℃下保存一个月。短期使用的腹水抗体，4℃3～4 个月仍保持稳定, 培养上清加0.1%NaN3，贮于-20℃，两年不失活性。
;目前我国检验科还没有检验医师的培养体系
由于机械制造业、信息产业、单克隆技术、分子生物学和医学本身在世界范围内有革命性的发展促进了检验医学的提高；有这样一批前辈、 同仁高瞻远瞩，兢兢业业，无不怀抱十年磨-剑的毅力和信仰从检验人才的教育培养， 学科建设，继续教育和开拓进取等方面投入了毕生的心血；最为可喜的是检验科在硬件环境不断...
以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列正...
用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为SARS病毒，不是单克隆抗体，杂交瘤细胞产生的抗体才是单克隆抗体，故B错。单克隆抗体特异性强，灵敏度高，与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合，故C正确。融合后的细胞可能是B细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞，要经过筛选，故D错。考点：本题考查单克隆...
下列有关单克隆丙种球蛋白病发病特点的叙述中,不正确的是
【答案】：C 考点：单克隆丙种球蛋白病发病机制。[解析]M蛋白是B细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白。
有高中生物知识小总结吗?谢谢!
11.生物膜、细胞的生物膜系统、细胞工程、植物组织培养、植物体细胞杂交、细胞的全能性、愈伤组织、脱分化、再分化、动物细胞培养液、原代培养、传代培养、细胞株、细胞系、单克隆抗体 12.微生物、菌落、衣壳、核衣壳、囊膜、刺突、碳源、氮源、生长因子、选择培养基、鉴别培养基、初级代谢产物、次级代谢产物、组成酶...
高中生物知识点:85个经典生物考点
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跪求!跪求!本人马上就要结业水平考试了。我是高中生,麻烦大家帮我总结生...
单克隆抗体。皮肤补偿。检测有毒物质。动物细胞融合 单克隆抗体 生物导弹(抗体)区别 细胞工程克服远源杂交不亲和障碍;扩大可杂交的亲本组合范围;定向改变生物...各个省份的考点是不一样的。对你也不一定有帮助; 其次,要想在短期内把这些学科提上来,在电脑上看材料效率是十分差的。你需要的是一本实实在在的书,...
单克隆抗体的制备过程应用了克隆培养技术
且其中含有动物血清(5)不是 卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状 （2分） (6)D 解析 分 析： 本题考查单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程。(1)图甲单克隆抗体制备过程，图乙克隆羊培育过程，都必须用到的动物细胞工程技术手段是动物细胞培养。(2)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个杂种...
国际生物奥林匹克竞赛的复习提纲
复习参考书：中学生物课本（高二生物上下册、高三选修本、生理卫生及初中生物四册）普通生物学——陈阅增主编奥赛竞赛书：金牌之路、王正询主编、广西师范大学出版社（指导思想：以高中教材为主，用普通生物学拓展内容）一、 细胞生物学和生物化学1．细胞结构、功能、分裂（细胞周期：可用放射性标记物进行研究...
生物竞赛复赛哪些部分出题几率大(即热点)还有13天就考了
农业生态系统） e．酸雨的形成及危害 3．环境污染问题 八、生物技术 1．胚胎移植技术、克隆技术、胚胎切割、干细胞 2．单克隆抗体 九、其他方面 1．离子的运输（透过细胞膜的运输：自由扩散、协助扩散和主动运输） 2．酶、激素的区别 3．生物的分界学说（两界学说、五界学说、六界学说）
高中生物考点汇总
5.内环境的稳态（神经：反射，体液：激素调节）6.免疫过程。7.基因工程。（目的基因，筛选过程）8.细胞工程。（杂交瘤细胞，单克隆抗体，培养基成分）9.生态工程。（原理，生活应用）10.微生物培养（无氧呼吸，发酵）？中心法则穿插其中。。。以上为生物考题大体，你可以问老师，每个都覆盖大量知识点。
曹采伊维：[答案] 原理: B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力.B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的.将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形...
团风县18419826583： 单克隆抗体的制备原理是什么 - ？
曹采伊维： 要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长.而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞.这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体
团风县18419826583： 单克隆抗体技术原理是什么?？
曹采伊维： 制备单克隆抗体的方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与脾脏的B细胞融合.采用HAT选择性培养基(培养基中加次黄嘌呤HyPoxanthine H,氨基喋呤Aminoopterin A及胸腺嘧啶核苷Thymidine T),在这种...
团风县18419826583： 单克隆抗体制备原理 - ？
曹采伊维： 首先取几只健康的老鼠,让它感染,然后从它的血液中提出效应淋巴细胞 然后用电击法让他们融合. 然后把这些细胞放在选择培养基上培养.这就得到了相应的细胞 最后把这些细胞防在小老鼠体内.就可得到干扰素单克隆抗体这种细胞有效应淋巴细胞与骨髓瘤细胞的基因,所以即能分泌干扰素,又能无限繁殖.
团风县18419826583： 单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义? - ？
曹采伊维： 哈哈~我们刚考到这题 原理: B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力.B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的.将这种B细胞与...
团风县18419826583： 如图是单克隆抗体制备的过程,请据图回答下列问题.(1)单克隆抗体制备的技术原理有___和___.(2)从小鼠体内提取B淋巴细胞之前,需对小鼠___.(3)... - ？
曹采伊维：[答案] (1)单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,它们的原理依次是细胞膜的流动性和动物细胞增殖. (2)从小鼠体内提取B淋巴细胞之前,需对小鼠注射特异性抗原,使小鼠发生免疫反应产生相应的B淋巴细胞. (3)诱导原生质...
团风县18419826583： 单克隆抗体制备的原理是什?单克隆抗体制备的原理是什么 ？
曹采伊维： 将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤细胞的无限分裂的能力,又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力
团风县18419826583： 如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图.请据图回答下列问题:(1)生产单克隆抗体的基础技术是______.制备单克隆抗体依据的基本原理是______.(2)... - ？
曹采伊维：[答案] (1)单克隆抗体制备的技术涉及动物细胞融合和动物细胞培养,基础是动物细胞培养,原理是B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力;(2)据图分析,给小鼠注射流感病毒,...
