用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,可在HAT选择培养基长期存活的是(  )。

作者&投稿:阎彩 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
~ 【答案】:C
HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶,其中氨基蝶呤可阻断DNA合成的主要途径。主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸苷激酶)作用下,利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA,缺少其中一种,DNA合成不能发生。由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的杂交瘤细胞,其合成DNA的主要途径虽然被甲氨蝶呤阻断,但由于与脾细胞融合,可获得其HGPRT,利用次黄嘌呤合成嘌呤碱,最终与嘧啶一起合成DNA。因此,只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖。


单克隆抗体的制备过程高中生物
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤。(1)抗原制备。(2)免疫动物。(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备。(4)细胞融合。(5)杂交瘤细胞的选择培养。(6)杂交瘤细胞的筛选。(7)杂交瘤细胞的克隆化。(8)单克隆抗体的检定。(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立。(10)单克隆抗体的大量制备。

如何利用杂交瘤技术制备单克隆抗体
在细胞融合后选择性培养过程中,由于大量骨髓瘤细胞和脾细胞相继死亡,此时单个或少数分散的杂交瘤细胞多半不易存活,通常必须加入其他活细胞使之繁殖,这种被加入的活细胞称为饲养细胞。饲养细胞促进其他细胞增殖的机制尚不明了,一般认为它们可能释放非种属特异性的生长刺激因子,为杂交瘤细胞提供必要的生长条件;也可能是为了...

单克隆抗体的特点
特点为特异性强纯度高单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一仅针对某一特定抗原表位的抗体通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤hybridoma抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞。第二章 抗体制备技术 抗体的基本概念多克隆抗体多个淋巴细胞克隆所分泌的抗体和单克隆抗体单个...

单克隆抗体的制备步骤
在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。

制备单克隆抗体时注入小鼠腹腔比用培养液培养有何优点
单克隆抗体制备有两种方法。第一种方法是:增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。第二种也是最普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法。选用BALB\/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔...

什么是杂交瘤?
杂交瘤技术的基本原理 一 单克隆抗体的制备 1975年kǒhler和milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞(srbc)免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个b细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗srbc的单克隆抗体(monlclonalantibody,mcab)。迄今世界已研制成数以千计的mcab。单克隆抗体的理化性状...

大量单克隆抗体的制备方法?
目前制备大量单克隆抗体的方法主要有两种:一种是动物体内诱生法;另一种是体外培养法。背景 BACKGROUND 困惑 PUZZLED 体外培养法有哪几种培养方式?何谓无血清培养?探索 在体外培养法中,目前各个实验室普遍采用细胞单层法,就是将杂交瘤细胞加入培养瓶中,用完全培养基培养,细胞浓度以1.0X100~2.0X106...

单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
抗体制备有两种方法。一是增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。选用BALB\/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射,一周后将杂交瘤细胞接种到...

...单克隆抗体时为什么要分别在体内和体外培养杂交瘤细胞? 为什么不是...
体外培养方法制备的单抗量极为有限,无疑是不适用于单抗的大规模生产。要想在体外大量制备单抗,就必须进行杂交瘤细胞的大量(高密度)培养。单位体积内细胞数量越多,细胞存活时间越长,单抗的浓度就越高,产量就越大。外培养生产单抗的方法仍处在发展之中;随着研究的不断深入和技术的完善,它们将会在...

为何单克隆抗体均为鼠源性?
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经...

壤塘县17086418689: 科学家通过杂交瘤细胞培养生产单克隆抗体的过程如图所示.请回答:(1)生产单克隆抗体一般不直接培养B淋巴细胞,主要原因是___.(2)图①中将___注... -
解元蓝芩:[答案] (1)B淋巴细胞不能无限增殖,因此需要将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合生成杂交瘤细胞,使其具有在体外大量繁殖并产生特异性抗体的特性.(2)一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体.图中将抗原注入小鼠体内,而后从小鼠...

壤塘县17086418689: 利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体的流程如图所示.请根据图回答问题:(1)通过过程①得到的B淋巴细胞在从小鼠体内分离出之前,需对小鼠___.... -
解元蓝芩:[答案] (1)通过①过程得到的B淋巴细胞从小鼠体内分离出之前,应对小鼠进行的处理是注射相应抗原,获取的是能产生抗体的B淋巴细胞. (2)②过程将B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,运用的原理是细胞膜具有一定的流动性. (3)过程...

壤塘县17086418689: 描述杂交瘤技术生产单克隆抗体的主要技术过程 -
解元蓝芩: 把受抗原刺激过的B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞进行融合,得到的细胞既能无限增殖,还可以产生专一性抗体.用细胞培养技术将这个杂交瘤细胞培养得大量子细胞,产生大量的专一性抗体.

壤塘县17086418689: 利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体的流程如图所示.回答下列问题:(1)通过①过程从小鼠体内分离B淋巴细胞之前,对小鼠进行的处理是___.(2... -
解元蓝芩:[答案] (1)通过①过程得到的B淋巴细胞从小鼠体内分离出之前,应对小鼠进行的处理是注射相应抗原.(2)过程②是诱导细胞融合,运用了细胞膜结构特点,即具有一定流动性的.原生质体融合的方法是物理和化学法,但动物细胞...

壤塘县17086418689: 制备单克隆抗体过程中要用到那些技术 -
解元蓝芩:[答案] 制备单克隆抗体主要是要得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞是免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交得到的,所以这里利用了动物细胞培养、动物细胞融合,然后就是对杂交瘤细胞的筛选,这里就没有什么技术了!

壤塘县17086418689: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
解元蓝芩: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

壤塘县17086418689: 请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题.(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂___作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与... -
解元蓝芩:[答案] (1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂灭活的(仙台)病毒作介导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的克隆培养,获得纯系细胞,同时还要进行抗体检验,...

本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网