单克隆抗体的制备步骤
1、免疫动物的选择：
免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合：
采用二氧化碳气体处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养：
选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化：
在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。
5、单克隆抗体的大量制备：
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。
扩展资料：
单克隆抗体的优点：
1、杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
2、可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。
3、由于可能得到“无限量”的均一性抗体，所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法。
4、由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
参考资料来源：百度百科-单克隆抗体
抗体的制备有哪些?
（1）多克隆抗体的制备。①免疫方法：对多克隆抗体，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说，皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多；皮内免疫法所需的抗原量少，在抗原宝贵时特别适用，但与之相对的，它产生的抗体量也不多。混合免疫法的优点是抗原用量小，产生...
简述单克隆抗体的制备过程及原理。
过程：将上述骨髓瘤细胞与免疫的B细胞融合后，用含HAT(黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))的选择培养基进行培养，未融合的脾细胞因不能在体外无限增值而死亡，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏此黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)，不能利用此黄嘌呤而死亡。融合成功的杂交瘤细胞经筛选和克隆化建...
单克隆抗体的制备流程是怎样的
6.最后,将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,这样,从细胞培养液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的单克隆抗体了!
下列关于单克隆抗体的制备过程及原理的叙述,正确的是( )
单克隆抗体的制备过程中，首先要给实验动物注射抗原，以获取相应的B淋巴细胞。将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，以获得杂交瘤细胞。最后需经专一抗体检验，筛选出特定杂交瘤细胞，才能获取能产生单一抗体的细胞群。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。
单克隆抗体制备过程
单克隆抗体的制备过程分为几个关键步骤:首先，进行免疫动物。选择6-8周龄雌性Balb\/c小鼠，通过免疫注射，使用目的抗原刺激其产生致敏B淋巴细胞。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，激活并增殖B淋巴细胞，形成致敏细胞。接着，进行细胞融合。小鼠经眼球摘除放血法处理后，无菌取出脾脏，与同系骨髓...
多克隆抗体抗 Ig 抗体制备
多克隆抗体的制备过程包含一系列精细步骤：首先，抗原的制备是关键，免疫球蛋白（Ig）因其异种性，能够作为优质的抗原，激发异种动物产生针对Ig的血清反应。经过提取处理后，这将生成抗Ig抗体，也就是我们熟知的第二抗体或抗抗体。这种抗体在许多间接标记实验中起着重要作用。在材料和试剂准备方面，需要以下...
单克隆抗体是什么
2、制备单克隆抗体的方法制备单克隆抗体的方法通常包括以下几个步骤：首先，通过免疫动物（如鼠、兔）注射目标抗原，激发其免疫系统产生多种抗体。其次，将淋巴细胞从免疫动物的脾脏或淋巴结中分离出来，融合到一种称为骨髓瘤细胞的恶性细胞上，生成“杂交瘤（hybridoma）”细胞株。这些细胞株同时具有淋巴...
单抗制品单克隆抗体制备方法
单克隆抗体的制备方法主要有两种：首先，增量培养法是通过体外培养杂交瘤细胞实现。在这个过程中，关键步骤是在特定的无血清培养基中进行，以优化单克隆抗体的浓缩和纯化过程。这种技术需要专业的仪器设备支持。其次，最常用的制备方法是小鼠腹腔接种法。通常选用BALB\/c小鼠或者其亲代，首先通过降植烷或液体...
将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人类的...
分析：1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．2、生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的...
简述单克隆抗体的制备过程。
是单克隆抗体。单抗的制作过程大体分为抗原的制备，动物的免疫，b细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，筛选杂交瘤细胞，筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的克隆化，体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆，单抗的纯化及鉴定。
佼寒参苓：[答案] 1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的B淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只...
青白江区13313507275： 单克隆抗体的制备方法 - ？
佼寒参苓： 常用方法:从经特定抗原刺激的动物体内抽取浆细胞,再与骨膸瘤细胞融合,经两次筛选即可获得杂交瘤细胞,然后进行克隆化培养,即可获得细胞产物----单克隆抗体.
青白江区13313507275： 下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图 - ？
佼寒参苓：[答案] 抗原制备——动物免疫——细胞融合——筛选建株——抗体生产
青白江区13313507275： 如图表示单克隆抗体的制备过程,据图回答下列问题:(1)制备单克隆抗体的步骤:a.将__ - 注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞.b.通过图中②过... - ？
佼寒参苓：[答案] (1)制备单克隆抗体的步骤:a.将特异性抗原注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞.b.通过图中②过程获得的细胞为骨髓瘤细胞,其特征为:无限增殖、形态结构发生显著变化、细胞膜上糖蛋白等物质减少.c.将诱...
青白江区13313507275： 单克隆抗体制作步骤?？
佼寒参苓： 单克隆抗体制作简要步骤:1,抗原准备;2,动物免疫;3,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合;4,杂交瘤细胞的筛选;5,阳性杂交细胞克隆化;6,大规模单克隆抗体的制备.
青白江区13313507275： 制备单克隆抗体的技术流程是怎样的呢? ？
佼寒参苓： (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗... 次日一般即为对数生长期细胞. 图11-2杂交瘤技术制备单克隆抗体的流程 在体外培...
青白江区13313507275： 简述人工制备单克隆抗体的方法? - ？
佼寒参苓： 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...
青白江区13313507275： 生产单克隆抗体通常涉及三个筛选过程: ①选出杂交瘤细胞 ②选出能产生特定抗体的B淋巴细胞 ③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群 这三个过程的... - ？
佼寒参苓：[选项] A. ②③① B. ③①② C. ②①③ D. ①③②
青白江区13313507275： (8分)下列是制备分泌抗X抗体的过程,根据图解回答问题: (1)制备单克隆抗体的步骤: ①将 注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得淋巴细胞,其中至... - ？
佼寒参苓：[答案] (1)① 抗原 ②灭活的病毒③ 选择性 ④ 产生专一抗体又能无限增殖⑤体内培养 体外培养(2)B淋巴 异物性
青白江区13313507275： 单克隆抗体的制备过程 - ？
佼寒参苓： 魔域,,QQ三国
