液相色谱出现倒峰是怎么回事？

液相色谱谱图出倒峰是怎么回事~

问题太简略了点，只好来个“拉网大搜捕”：
第一，用的是什么检测器？如果是示差折光，那很正常；
第二，倒峰在什么位置？如果是溶剂峰，也很正常，要去除的话，溶剂改用流动相；
第三，如果是紫外检测器（MWD,OR DAD）,有没有加参比波长？如果有，去掉参比波长或另选合适的参比波长；
第四，如果是紫外检测器，流量池里是否有气泡产生？1.抽滤或超声去除流动相里的气泡；2.检查在线脱气机（如果有的话）；3.调节背压；
第五，流动相是否在该波长（用紫外检测器的话）有较大的背景？1.检查你用的溶剂的等级；2.检查色谱条件的合理性。
应该全了吧？

出现倒峰，，可能是样品的折光指数比基线低，换一种检测器试一试，也许就对了

用了非流动相或者与流动相不同酸度溶剂溶解样品，会出现倒峰现象。可以换个溶剂尝试。

液相色谱是其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中，为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。

经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。

分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代，发展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了经典液相色谱的缺点，发展成高效液相色谱，也称为高压液相色谱。

扩展资料

离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换，由于各组分离子的交换能力不同，从而达到色谱的分离。

离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术，已广泛用于氨基酸、蛋白质的分析，也适合于某些无机离子。

凝胶色谱法既适用于水溶液的体系，又适用于有机溶剂的体系。当所用的洗脱剂为水溶液时，称为凝胶过滤色谱，其在生物界的应用比较多；采用有机溶剂为洗脱剂时，称为凝胶渗透色谱，在高分子领域应用较多。

液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。

此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。

参考资料来源：百度百科-液相色谱

一般倒峰都出现在刚刚进样后1-2分钟，这属于正常现象，因为样品通过六通阀突然的进入流动相，流动相会因为成分的突然改变作出各种各样的反应，只要不影响你的目标产物就可以！当然倒峰要是出现在中间或尾部，就要考虑流动相和整个系统的问题了 ，一般与色谱柱关系不大！个人见解，仅供参考！

有几种可能性：1：所选用的流动相不合适，比如，紫外吸收背景较高，那么溶质的吸收低于流动相背景吸收时，就会出现倒峰。2：不知道您所用的什么色谱仪，有些仪器的设置问题也会引起倒峰。3：不知您的倒峰出现在什么位置，可以多重复几次，避免鬼峰。

还真有专家！我觉得和色谱柱也有关系。

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荆门市13947619347： 液相色谱出现倒峰是怎么回事 - ？
仇褚凯莱： 出现倒峰的原因很多,我告诉你从几个地方着手检查. 一:注意信号接收的正负极是否接反了,如果接反了,所有峰都会是倒峰. 二:不进样看看是否有倒峰,如果有可能就是系统问题,是什么检测器,有没有参比池,是不是漏液,是不是有气泡停留在检测池. 三:不进样没倒峰,进样就有倒峰,你还要注意是不是样品本身的特性.例如:紫外检测器是通过紫外吸收对样品进行检测的,如果进样里面的样品没有紫外吸收,而流动相有吸收,则样品出峰的时候,峰值会比基线低,所以出现的曲线是看起来就是负的. 四:色谱柱有没有坏,换一个好的色谱柱看看是不是还有倒峰,如果没有,那说明色谱柱可能损坏了,堵塞之类的,分离效果已经破坏了,这就需要换色谱柱了.

荆门市13947619347： 液相色谱谱图出倒峰是怎么回事 - ？
仇褚凯莱： 问题太简略了点,只好来个“拉网大搜捕”: 第一,用的是什么检测器?如果是示差折光,那很正常; 第二,倒峰在什么位置?如果是溶剂峰,也很正常,要去除的话,溶剂改用流动相; 第三,如果是紫外检测器(MWD,OR DAD),有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的参比波长; 第四,如果是紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?1.抽滤或超声去除流动相里的气泡;2.检查在线脱气机(如果有的话);3.调节背压; 第五,流动相是否在该波长(用紫外检测器的话)有较大的背景?1.检查你用的溶剂的等级;2.检查色谱条件的合理性. 应该全了吧?

荆门市13947619347： 高效液相图谱的倒峰的问题 - ？
仇褚凯莱： 应该是溶剂峰吧,甲醇在一些波长处可能出现倒峰.其实只要走一针溶剂就知道了.要保证溶剂比例和你溶样的时候是一样的哦!溶剂峰的可以扣除的,对结果影响不会很大,除非出现在主峰或其他重要组分附近.如果不是溶剂峰,还有可能是以下原因:1 信号线极性接反了或是参数设置成倒峰的; 2 走梯度走出来的; 3 氘灯老化,流通管道或池不通畅; 4 样品和流动相中含有小颗粒,气泡等; 5 参比波长设置的不合适,如果在出峰位置的另一化合物参比波长附近的某一范围内有吸收,那么就可能出现倒峰.LZ可以结合自己的实验情况加以分析.

荆门市13947619347： 液相分析有倒平峰是什么原因引起 - ？
仇褚凯莱： 倒峰可能是检测器的极性接反了,改正后即可变成正峰.用示差折光检测器时,如果组分的折光指数低于流动相的折光指数,也会出现倒峰,这就需要选择合适的流动相.如果流动相中含有紫外吸收的杂质,使用紫外检测器时,无吸收的组分就会产生倒峰,因此必须用高纯度的溶剂作流动相.在死时间附近的尖锐峰往往是由于进样时的压力变化,或者由于样品溶剂与流动相不同所引起的.

荆门市13947619347： 求助:液相色谱紫外检测器分析时出现倒峰的问题 - ？
仇褚凯莱： 液相色谱紫外检测器分析时出现倒峰的问题 把检测波长设定为一定的范围,比如200--300,系统会自动记录这一段的谱图,然后你自己通过改变波长,就可以找到峰比较好的,多进几个样品,看一下,峰叫好的就是那个表准品的最大吸收波长处

荆门市13947619347： 液相色谱测试中用示差折光检测器,测试结果为倒峰,请问这是为什么? - ？
仇褚凯莱： 流动相的背景吸收高于待测物质造成的.

荆门市13947619347： 高效液相色谱法测定食品中山梨酸,苯甲酸为什么会出现倒峰 - ？
仇褚凯莱： 出现你说的倒峰就是负峰,有可能是你的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰 有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰 .流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.

荆门市13947619347： 安捷伦1100液相色谱DAD检测器出现倒峰现象怎么解决 - ？
仇褚凯莱： 倒峰是偶尔一个,还是所有的,,,如果是所有的都倒,一般是刚开始的时候检测器氘灯未正确校正.或信号线接反,如果正常分析过程中出现,则可能是流动相与进样稀释剂极性相差较大引起的,建议使用模拟流动相溶解样品!

荆门市13947619347： 为什么色谱中流动相的紫外吸收大于样品的溶剂的紫外吸收就产生倒峰 - ？
仇褚凯莱： 这么说吧,液相就是一堆的液体流动相,带着少量的液体样品从紫外氘灯前流过. 那么一般情况,流动相的紫外吸收小于样品的时候呢,可以想象,是一帮小矮子,簇拥着一个高个子走过氘灯.那么紫外就可以检出是一个色谱峰了.这些矮子的身高,就是基线.这个高个子和矮个子之间的身高差,就是你的峰高.可以理解吗?反之,如果流动相吸收大狱样品的话,那么就是一堆的高个子里面有个小矮子.紫外检测自然就是倒峰了,因为样品的吸收低,个子矮嘛!

荆门市13947619347： 液相色谱出现倒峰 - ？
仇褚凯莱： 在积分参数里有一个参数:禁止/开始积分. 比如负峰的RT是3.5min,你可以从4min开始积分. 在Agilent的ChemStation里是:Integrate off=0;Integrate On=4.0 在Chromtek里是:Integrate Off 0.0,4.0; 大致是这个样子,具体记不太清楚. 顺便说一句,负峰是可以积分的,参数是Negative. 你可以试一试,你用的工作站应该有类似的参数.