用高效液相的方法做有关物质时出现倒峰怎么办

液相色谱出现倒峰是怎么回事？~

用了非流动相或者与流动相不同酸度溶剂溶解样品，会出现倒峰现象。可以换个溶剂尝试。
液相色谱是其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中，为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。
经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。
分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代，发展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了经典液相色谱的缺点，发展成高效液相色谱，也称为高压液相色谱。

扩展资料
离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换，由于各组分离子的交换能力不同，从而达到色谱的分离。
离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术，已广泛用于氨基酸、蛋白质的分析，也适合于某些无机离子。
凝胶色谱法既适用于水溶液的体系，又适用于有机溶剂的体系。当所用的洗脱剂为水溶液时，称为凝胶过滤色谱，其在生物界的应用比较多；采用有机溶剂为洗脱剂时，称为凝胶渗透色谱，在高分子领域应用较多。
液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。
此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。
参考资料来源：百度百科-液相色谱

出现倒峰的原因很多，我告诉你从几个地方着手检查。
一：注意信号接收的正负极是否接反了，如果接反了，所有峰都会是倒峰。
二：不进样看看是否有倒峰，如果有可能就是系统问题，是什么检测器，有没有参比池，是不是漏液，是不是有气泡停留在检测池。
三：不进样没倒峰，进样就有倒峰，你还要注意是不是样品本身的特性。例如：紫外检测器是通过紫外吸收对样品进行检测的，如果进样里面的样品没有紫外吸收，而流动相有吸收，则样品出峰的时候，峰值会比基线低，所以出现的曲线是看起来就是负的。
四：色谱柱有没有坏，换一个好的色谱柱看看是不是还有倒峰，如果没有，那说明色谱柱可能损坏了，堵塞之类的，分离效果已经破坏了，这就需要换色谱柱了。

出现倒峰的情况在液相色谱中也是常见的，其原因是样品中有的物质的响应比流动相的响应还要低。出现这种情况有以下几种：1，一般的液相色谱在死时间的时候，也就是掰阀时，容易出现一个基线的跳动，一上一下，或有时只上或只下，这是正常的，一般通过空白能看出来。2，溶剂的使用。有好多时候，溶剂和流动相不一样，容易产生这种情况，比如用乙腈做流动相时，用甲醇配样容易产生这种情况，所以配样时选择流动相是最佳的。3，检测器出现异常，这时，可通过重新启动或是进行检测器的检测来判断是不是检测器的问题。4，流动相本身吸收过大，比如用乙醇溶液做流动相时，有些物质容易出现倒峰。这种情况可把倒峰直接积分，做为出峰物质。

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东辽县13480827110： 高效液相色谱法测定食品中山梨酸,苯甲酸为什么会出现倒峰 - ？
仇习觉觉： 出现你说的倒峰就是负峰,有可能是你的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰 有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰 .流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.

东辽县13480827110： 高效液相图谱的倒峰的问题 - ？
仇习觉觉： 应该是溶剂峰吧,甲醇在一些波长处可能出现倒峰.其实只要走一针溶剂就知道了.要保证溶剂比例和你溶样的时候是一样的哦!溶剂峰的可以扣除的,对结果影响不会很大,除非出现在主峰或其他重要组分附近.如果不是溶剂峰,还有可能是以下原因:1 信号线极性接反了或是参数设置成倒峰的; 2 走梯度走出来的; 3 氘灯老化,流通管道或池不通畅; 4 样品和流动相中含有小颗粒,气泡等; 5 参比波长设置的不合适,如果在出峰位置的另一化合物参比波长附近的某一范围内有吸收,那么就可能出现倒峰.LZ可以结合自己的实验情况加以分析.

东辽县13480827110： 高效液相色谱 出现负峰是什么原因 - ？
仇习觉觉： 有可能是进样阀的问题,污染或有残留,另外请说明使用的检测器型号,因为分析肌醇六磷酸可选多种检测器.

东辽县13480827110： 高效液相色谱仪做有关物质的检验时自身对照为何峰面积不成比例? - ？
仇习觉觉： HPLC自身对照法做有关物质是最常用的方法,峰面积不成比例是指你的自身对照主峰与供试品主峰间的比例吗? 这种情况也很多见,主要看供试品浓度的设计是否超载,如果浓度过大,造成超载则跟自身对照不成线性,但是这并不影响你的定量计算,因为自身对照法的优点就是缩小了对照与杂质见的线性范围,也就是说自身对照的浓度及更低浓度物质间的线性范围.如果你要使呈线性,最简单的方法是减小供试品浓度

东辽县13480827110： 高效液相色谱法常出现的故障及解决的方法 - ？
仇习觉觉： 高效液相色谱仪使用中常见故障及解决方法 1 概述.高效液相色谱仪系统液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱 温箱、检测器、数据处理系统组成.对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核 心部件同时也是易出问题的主要部位. ...

东辽县13480827110： 在有关物质检查中,应重点注意哪些因素 - ？
仇习觉觉： 液相色谱中影响色谱峰扩展的因素有:样品池体积、连接管体积、时间常数(包括放大器及记录仪的时间常数)等.样品池体积大,使样品被流动相稀释,不仅会降低检测灵敏度,还使峰展宽.池的结构特点(几何形状)和池内的流动特性(从...

东辽县13480827110： 用高效液相做含量有关物质的检测时,样品和对照品所用流动相的不是一次配的,对检测结果影响大吗? - ？
仇习觉觉： 原则上样品和对照品一切条件都应该是一样的才行.如果流动相是分两次配的,两次配制的误差总是不可避免的,而且放置时间较长的话这种误差还会加大,对结果会有一定影响的,这全看你配制溶液的能力了,如果误差比较小,也是可以得到可信结果的,但如果毛手毛脚的,两次的溶液配得很不准,那可比性就很差了,可能要重新做.不管怎么说,也只能打进去跑一下看看结果再说吧.

东辽县13480827110： 【高效液相色谱】请问样品出现这样的峰算拖尾吗?怎么解决? - ？
仇习觉觉： 你是测药吗?第二张图是你的标品峰吗?这个看起来只有一点点的拖尾,主要问题是有杂质峰没分开.如果你试过流动相配比不能将杂质峰分开的话,要考虑更换流动相或者在流动相中加入一定的改性剂,达到完全分离的目的.发文的话看你要发哪种,一般老外会比较严格,国内期刊的话就不一定了.

东辽县13480827110： 用高效液相色谱法分离某物质, 两种物质的峰交叉怎么处理 - ？
仇习觉觉： 呵呵,这个问题要根据具体情况来判断了,笼统的说有这样几种办法: 1,流动相改变.可能改变流动相的PH,也可能改变流动相的配比,或用梯度来分离,还有可能用其它的流动相替换,这样根据样品结构及具体性质,还有实验结果来判断. 2,改变色谱柱.可以用柱效更高的色谱柱来分离,也可能直接更换其它极性的色谱柱,也要看之前分离情况判断. 3,对样品进行前处理.可能进行衍生,也可能进行萃取或其它方法. 4,如果最终还是无法分离,可以考虑诸如气相色谱等其它分析方法. 希望对你有所帮助.

东辽县13480827110： 高效液相有包峰怎样处理 - ？
仇习觉觉： 一般来说有三种可能性,也是三种解决方法. 1. 确实是两种物质,极性相近,保留时间相近.如果是这样的话只能是调整试验方法,把他们分开.比如调整有机相比例,调整水相pH值等.不行的话还需要跑梯度或者更换色谱柱. 2. 色谱柱不行...