cdna文库的构建方法是用某种生物发育的某个时期的mrna逆转录产生的cdna片段与

作者&投稿:保聂 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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(1)cDNA属于部分基因文库,构建方法是利用某种生物发育的某个时期的mRNA通过逆转录产生cDNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中.
(2)切割DNA分子的工具是限制性核酸内切酶,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,形成黏性末端或平末端.
(3)DNA连接酶根据来源分为两类:T 4 DNA连接酶和E•coliDNA连接酶,其中E•coliDNA连接酶只能连接双链DNA的黏性末端,而T 4 DNA连接酶既可以连接双链DNA的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA的平末端.
(4)将目的基因导人植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用Ca 2+ 处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子.
故答案为:
(1)部分   mRNA   载体
(2)限制性核酸内切酶   磷酸二酯键
(3)T 4
(4)农杆菌转化法   Ca 2+




何谓基因组DNA文库?如何构建?
基因组DNA文库涵盖了基因组全部基因信息,也包括我们感兴趣的基因。建立基因文库后,需结合适当筛选方法,选出含有某一基因的菌落,再进行扩增,将重组DNA分离、回收,获得目的基因的无性繁殖系——克隆。

DNA文库的基本途径
3.将DNA重组体导入宿主细胞。注意:因为转入过程是随机的,因此宿主细胞要有一定的数量,以确保能够获得所有类型的DNA重组体。4.经克隆后,这些cDNA片段就贮存在一个受体细胞的群落中,其中每个受体细胞都含有一种或几种cDNA,而整个群落则含有这个生物全部的cDNA,这个群落就构成了这种生物的cDNA文库。

dna文库名词解释
一、DNA文库的作用 在基因研究方面,DNA文库可以包含一个生物所有的可表达基因片段,因此可随时筛选出需要的目的基因片段,无需再通过PCR制备,可以节省时间和成本,提高效率。在基因功能研究方面,通过建立特定生物的cDNA文库,可以研究基因的功能以及寻找特定基因的克隆。二、DNA文库的建立方式 DNA文库的建立...

基因组文库构建的方法与过程分别是什么?!
方法:限制性酶切法、机械剪切法 过程:1.载体DNA片段的制备 .2. 供体DNA片段的制备 细胞中总DNA分离纯化 机械剪切法 分离特定大小DNA片段 限制性酶切 分离特定大小DNA片段 3. 供体与载体DNA连接 4. 重组DNA分子的转移和基因组文库的扩增 利用转化或感染方法将连接DNA分子导入宿主细胞,让...

Cdna文库与部分基因文库的关系
二、 DNA文库和cDNA文库的构建原理 DNA文库:用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为...

NGS|文库构建全流程,从片段化到PCR扩增
cDNA合成,则是从无到有的逆转过程。RNase Inhibitor保护下的RNA,被逆转录酶转化为cDNA的第一链,接着RNase H和DNA聚合酶Ⅰ合力构建出完整的双链,这是构建cDNA文库的最后一环。每个步骤都如同基因的乐章,严谨而富有节奏,共同编织出基因文库的壮丽乐章,等待着科学的解读与探索。

什么叫亚基因组文库?
基因组DNA文库构建是先从生物体中制备基因组DNA,并用限制性内切酶切割产生一定长度范围的DNA片段,然后在体外将这些DNA片段与适当的λ噬菌体载体或柯斯载体连接成重组的DNA分子,并转化到大肠杆菌受体细胞中,从而完成构建。 基因组文库的建立要比cDNA基因文库的建立来的简单多,而且不容易造成基因遗漏。但...

比较分析基因组DNA文库和cDNA文库。
(1)构建过程不同 ①基因组DNA文库 a.用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,制备大小合适的随机DNA片段。b.将这些DNA片段与与适当的载体连接成重组子。c.将重组子转化到细菌中,让宿主菌长成克隆,整个克隆群体包含基因组的全部基因片段总和,即成为基因组DNA文库。②CDNA文库 a.以mRNA为模板,经反...

基因工程中为什么要建立基因文库?基因文库是如何建立的?
目的:当我们要对某一基因结构和功能进行研究时,首先要获得此基因,最简便的方法就是直接从基因文库中获取。构建过程:将纯化的细胞基因组DNA用限制性内切酶消化,获得一定大小的DNA片段,将这些片段克隆到载体中,从而获得含有不同DNA片段的噬菌体,这就是基因组文库。打个比方让你建图书馆,你就得把...

基因组DNA文库要怎样分离目的基因?
基因文库构建后,从文库中筛选基因的方法主要有核酸杂交法、免疫学检测法、DNA同胞选择法、PCR筛选法等。应用λ噬菌体载体构建基因组DNA文库的一般操作程序主要包括(link:xlinkhref=i011902图4-20link):(1)用适当的限制性内切酶消化基因组DNA,以得到约20kb的大片段。(2)用限制性内切酶切割载体DNA...

阿拉善左旗13972309933: cDNA文库构建的方法与过程分别是什么? -
吉俗普罗:[答案] cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合.经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头,连接...

阿拉善左旗13972309933: cDNA文库构建的方法与过程分别是什么? -
吉俗普罗: cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合.经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头,...

阿拉善左旗13972309933: 基因工程的正确说法是() - 上学吧
吉俗普罗: 1 cDNA 文库的构建 1.1 cDNA 文库构建的基本原理与方法 cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合.经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物,...

阿拉善左旗13972309933: [紧急求助]cDNA文库的概念是什么? -
吉俗普罗: 以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库. 详情见http://baike.baidu.com/view/60324.htm

阿拉善左旗13972309933: 什么是cDNA文库?它和基因文库的差别有哪些 -
吉俗普罗: cDNA文库: 以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细...

阿拉善左旗13972309933: 如何构建一个物种的cdna文库 -
吉俗普罗: 当反转录,或随机引物与聚T合成第一链互补的mRNA,mRNA和第二条链是相同的. 中国因此,如果对基因的RNA 5' - 3',所述第一链反向,第二链是阳性.

阿拉善左旗13972309933: 基因工程中为什么要建立基因文库?基因文库是如何建立的? -
吉俗普罗: 基因文库是指一个包含了某一生物体全部DNA序列的克隆群体. 目的:当我们要对某一基因结构和功能进行研究时,首先要获得此基因,最简便的方法就是直接从基因文库中获取. 构建过程:将纯化的细胞基因组DNA用限制性内切酶消化,获得一定大小的DNA片段,将这些片段克隆到载体中,从而获得含有不同DNA片段的噬菌体,这就是基因组文库. 打个比方让你建图书馆,你就得把所有书分门别类放,以便于找.这么多书你一个人又搞不定,所以你的找一群人,一个人负责一部分,各自干各自的,然后最后一汇总就行了.

阿拉善左旗13972309933: 什么是 cdna文库?同基因组文库有何差别 -
吉俗普罗: (1)cDNA文库是指细胞全部mRNA通过逆转录得到cDNA后被克隆的总和.cDNA的组成特点是片段中不含基因的内含子和其他调控序列.cDNA文库构建基本步骤:①制备mRNA:全RNA提取与mRNA的分离提纯;②合成cDNA:oligo dT与mRNA3...

阿拉善左旗13972309933: cDNA文库的标准化与非标准化有什么区别? -
吉俗普罗: 在构建均一化的 cDNA 文库中至少有2种主要的观点:一种是基于复性动力学的原理,高丰度的 cDNA 在退火条件下复性的速度快,而低丰度的 cDNA 复性要很长时间,从而可以通过控制复性时间来降低丰度;另一种是基于基因组 DNA 在拷贝...

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