基因文库的三种构建方法
构建基因文库的方法又称
DNA文库。构建基因文库是获取目的基因的方法之一又叫做DNA文库。指用克隆方法将一种生物全部基因组以重组体的方式长期保持在适当的宿主中。
如何从基因文库中调取目的基因 详细些
不需要模板,但需要知道其序列,以构建探针去捕获目的基因。补充回答:为了更形象地解答你的问题,我又去搜索了些参考资料。看到了一个不错的比喻,我现在试着借用来解答你的疑惑。如果把基因文库看作一座图书馆,那么目的基因就是一本你感兴趣的书。上面回答的是借书的流程,而你现在的补充问题则属于...
高中生物。构建基因组文库方法??
用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段
基因文库是通过克隆方法保存在适当寄主(如大肠杆菌)中的某种生物、组织...
并作为模板控制合成子代噬菌体的DNA和蛋白质,同时将两者组装成完整的新噬菌体颗粒.(4)基因文库包括基因组文库和部分基因文库(如cDNA文库),基因组文库的插入片段是基因组DNA,cDNA文库的片段是以mRNA为模板合成的互补DNA片段.故答案为:(1)a 酶切使之成为一定大小的DNA片段 20kb的DNA片段...
什么是人类基因组计划和基因工程。
答;构建基因文库、通过PCR方式从含有该基因的生物的DNA中,直接获得,也可以通过反转录,用PCR方式从mRNA中获得9、试述人类对基因的认识过程。谈谈人类基因组计划及其意义。 答;1)。人类对基因的认识过程 孟德尔第一次明确提出了遗传因子的概念,并且提出了遗传因子控制遗传性状的若干规律,还提出了杂交、自交、回(测)...
PCR技术只是对已有基因进行扩增,又怎么算是获取目的基因的方法?
首先了解你需要的目的基因存在于哪种生物内,用试剂盒提取总基因,查找目的基因序列,设计引物,就可以用PCR扩增了
酵母双杂交文库构建和筛选-宝吉生物
9.1.如何选择合适的文库构建方法进行建库? ※ 我们是市场上唯一可以同时提供3种文库构建方法的公司,这也足以看出我们公司的技术实力。 ※ 3种方法的比较如下: 1) Clonetech 的SMART方法,该方法基本是被淘汰的,我们上文有详细的技术比较,其唯一的好处就是RNA的起始量可以很小,一般只需要几ug即可,该方法成本很低,...
基因工程中获取目的基因的方法
从文库中获取是可以,不过很少这样。基因文库的构建是随机的,并没有把基因分类储存。说白了就是把整个基因组DNA用限制酶随机切割,然后混合转入受体菌。你根本不知道某个基因在哪个菌株上,也不知道这个基因有没有被切割掉。限制性酶就更不用了,基因组中的位点太多了,切割出来很多片段,你根本不知道...
基因文库是以菌落为载体,那么保存菌落的方法是?存活时间是否有限?_百度...
于37度过夜。(2):在琼脂平板上生长的细菌培养物:从琼脂平板表面刮下细菌放入装有2mlLB的无菌试管内,再加入等量的含有30%灭菌甘油的LB培养基,振荡使甘油完全分布均匀后,分装于无菌保存管内,密封,再按前述方法冰冻保存。这一方法的优点在于可用于保存在质粒载体上建立的cDNA文库。
...文库是获取目的基因的方法之一.图甲表示cDNA(互补DNA)文库构建...
(1)PCR扩增DNA时要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物,引物不能过短,否则没有一定的特异性,容易导致配对错误.(2)图甲中②过程是以mRNA为模板合成DNA链过程,该过程需要逆转录酶,过程③是以DNA一条链为模板合成双链DNA过程,需要DNA聚合酶.两个过程都是合成DNA链,所以需要四种...
南召县丽珠回答: 1 抗性筛选.利用培养基中的药物进行筛选.重组子可获得抗性. 2 影印筛选.利用核酸探针对具有目的DNA片段的宿主进行筛选. 3 营养缺陷筛选.宿主是营养缺陷型,重组子可使宿主获得营养补偿能力,从而起到筛选效果.
贸保18913735368问: 有比鸟枪法效率更高的方法吗??
南召县丽珠回答: 额?楼主问的是构建基因文库的方法乎? 有三种①鸟枪法②反转录法③根据已知的氨基酸序列合成DNA法. 按效率来说 ③最大
贸保18913735368问: 高中生物.构建基因组文库方法??? - ?
南召县丽珠回答: 将某种生物体内的全部DNA提取出来,用适当的限制酶将DNA切成一定范围大小的DNA片段,然后将这些DNA片段分别与载体连接起来,最后导入到受体菌的群体中储存.这个群体就包含了这种生物的所有基因,被称为这种生物的基因组文库.
贸保18913735368问: 基因工程中为什么要建立基因文库?基因文库是如何建立的? - ?
南召县丽珠回答: 基因文库是指一个包含了某一生物体全部DNA序列的克隆群体. 目的:当我们要对某一基因结构和功能进行研究时,首先要获得此基因,最简便的方法就是直接从基因文库中获取. 构建过程:将纯化的细胞基因组DNA用限制性内切酶消化,获得一定大小的DNA片段,将这些片段克隆到载体中,从而获得含有不同DNA片段的噬菌体,这就是基因组文库. 打个比方让你建图书馆,你就得把所有书分门别类放,以便于找.这么多书你一个人又搞不定,所以你的找一群人,一个人负责一部分,各自干各自的,然后最后一汇总就行了.
贸保18913735368问: 在基因工程中,获取目的基因的方法有哪些? - ?
南召县丽珠回答:[答案] ..刚好学到 基因工程流程的第一步就是获得目的DNA片段,如何获得目的DNA片段就成为基因工程的关键问题.所需目的基因的来源,不外乎是分离自然存在的基因或人工合成基因.常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法...
贸保18913735368问: 如何从细菌培养中构建一个基因组文库 - ?
南召县丽珠回答: 构建基因组文库有好几种方法,比如pcr,人工合成......从细菌培养中,我想就是1.挑取细菌2.溶解细胞壁,破坏细胞膜3.把基因随机打断4.两端加粘性末端5.选择合适载体6.目的基因连接载体7.转导进入大肠杆菌等8.培养基培养得到基因组文库
贸保18913735368问: 基因文库的构建方法和获取目的基因的方法有什么区别 - ?
南召县丽珠回答: 基因文库中有很多的基因片段 基因文库是大面积 无针对性的 获取目的基因的是有针对性的 鸟枪法的本质是随机截取源基因的片段,以获得目的基因,序列保存完整.而人工合成法仅是通过氨基酸序列逆向合成出已表达的碱基序列,不表达的内含子自然无法合成.都是用来获取目的基因
贸保18913735368问: 基因文库是怎么回事? - ?
南召县丽珠回答: 基因文库简单说就是将细胞中的所有DNA用酶切成小片段,并将每一段利用载体转入宿主细胞中,这样经过培养后,每一个菌株都含有一小段DNA,再利用特殊方法将要检查的目的基因挑选出来菌株,提取DNA后进行测序, 之所以用基因文库是因为,直接测基因组DNA,太大了,测不准,而利用载体进入宿主细胞之后,DNA片段可以随宿主细胞一起复制,可以得到很多相同的拷贝,方便检查
贸保18913735368问: 为什么构建基因文库 - ?
南召县丽珠回答: (1). 质粒文库 质粒是最早用于基因克隆的载体.现已有各种适用于不同工作的如克隆、表达、测序等专用商品质粒.但在构建基因文库上,由于质粒相对较小并只能容纳比自身更小的片段,因此它不能用于构建核基因组文库,通常只用来构建短...
贸保18913735368问: cDNA文库必须满足什么条件?其构建包括哪些步骤? - ?
南召县丽珠回答: 条件:1 、要使用mRNA经过反转录PCR产生cDNA.2 、要进一步获得cDNA全长3 、加适当接头,连接到适当的载体内.4 、转化受体细胞,构建为cDNA文库. 基本步骤包括:RNA 的提取(例如异硫氰酸胍法,盐酸胍—有机溶剂法,热酚...