trizol法提取外泌体的rna
怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA
1、将组织在液氮中磨成粉末后，再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨；每2E6个细胞加入1mLTrizol。注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。2、研磨液室温放置5min，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒，静置5min，12,000rpm离心5min。3、...
用trizol法提取RNA时,要如何才能防止空气中RNA酶的污染,所用一切物品...
Trizol本身就有一定保护RNA的作用，在研磨时，器具要用酒精棉消毒，研钵灭菌，研钵要预冷，保证液氮挥发干的时间不能太长，十秒左右就是极限了。Trizol量要足够100~200mg的组织量1mlTrizol就好，视组织类型和状态酌情补加，溶化后形成的液体要澄清，以没有肉眼可见的碎屑为宜。Trizol溶化后要及时收取，...
手把手教学——RNA提取的实验步骤&注意事项
深入探索RNA提取的艺术：实验步骤详解与关键注意事项 RNA的珍贵特性使其在分子生物学中举足轻重，但其易降解的特性要求在无RNase污染的环境中进行操作。我们以两种常见方法——Thermo Fisher的TRIzol法（氯仿版，需谨慎处理）和Vazyme的FreeZol法（无氯仿，环保安全）为例，为你揭示RNA提取的细致步骤和注意...
trizol法提取rna 如何去除dna
trizol法提取rna 如何去除dna 1,裂解组织或者细胞使用的TRIzol量偏少； 2，使用的组织材料中含有大量的有机溶剂（如：乙醇\/异丙醇等）、高纯度的Buffer、碱性溶剂等； 3，如果提取的RNA中含有DNA时，也可以使用DNase I进行DNA消化。这个如果你做反转录的话，只能是用PCR检测了。电泳基本检测不出来。象...
想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是 ...
我这边刚好在做，给你说下：贴壁细胞的话去培养液，PBS洗一遍，加Trizol吹打下来。组织的话，在液氮里面捣碎，然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎（超声每3秒，停10秒冷却，直到看不见组织碎末）。（此步骤可以-80oC冻存，下面可以以后再做）每1毫升Trizol加200微升氯仿（氯仿需饱和，可以在氯仿加一...
trizol法提取rna 需要在冰上做吗
有些步骤需要在冰上操作，有些可以在室温进行。不能笼统地说所有步骤都要在冰上进行。
TRIzol法提取的总RNA加DEPC水后无法回溶,以前没出现过问题,现在就是加...
里面有杂质，是不是现在提取样品比原来放的多。你可以把沉淀涡旋混匀，溶解10分钟后再离心，去上清，里面应该有你要的RNA，沉淀呢，里面还是有RNA的，看你需要的量选择丢弃还是继续从里面抽提了。
Trizol法提取RNA\/DNA
Trizol法应该是专门开发出来提取RNA的，但是这个方法用来提取DNA，蛋白效果也很好，你所说的完整性，提取DNA的时候，只要不剧烈振荡，应该还是很好的。给你几个公司的报价：invitrogen公司，100ml，900多，进口的。全式金公司，100ml，400，国产的。
TRIzol法提取RNA每个步骤的作用是什么?
TRIzol使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性。在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，RNA在水相中。取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA；用乙醇沉淀中间层可回收DNA；用异丙醇沉淀有机相可回收蛋白质。
trizol法提取RNA分成的三相分别是什么
上层无色，接近透明色的为RNA；中层白色（很薄）的为DNA；下层红色的为蛋白质。基本的层次和颜色是这样的，但是植物材料考虑到色素的问题，颜色会有细微的差异。三相中DNA最薄，另外两相差不多，RNA相比蛋白质厚一点。
科尔沁右翼前旗哌能回答：[答案] 厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞.2、将组织或细胞的Trizol裂解液...
宣胖13840301244问： 想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是否可以共享一下,谢谢 - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答： 我这边刚好在做,给你说下: 贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来.组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末). (此步骤可以-80oC冻存,下面...
宣胖13840301244问： 为什么trizol提不出来rna - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答： trizol提不出来rna的原因有可能是以下原因: 1)你的Trizol试剂核有无问题? 2)研究材料是否新鲜,RNA容易降解,应妇80度保存. 3)如果都没问题,你的操作有无问题? trizol提取rna的步骤:(仅供参考) 用户需自备的试剂和材料 无水乙...
宣胖13840301244问： Trizol法提取RNA操作步骤? ？
科尔沁右翼前旗哌能回答： 动植物总RNA提取-Trizol法 Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染.RNA可...
宣胖13840301244问： trizol方法提取RNA过程中哪一步加DNase处理？
科尔沁右翼前旗哌能回答： 我的方法里没用DNase,效果也不错,你可以参考一下: 取约5*106个细胞,经PBS洗涤后,加入800μL TRIzol,混合后室温放置5分钟,再加入196μL氯仿,振动15至30秒,室温放置2至3分钟,以4℃,12 000*g离心15分钟,小心将上层液体转移至新管中,加入500μL的异丙醇,轻弹使其混匀,室温放置20分钟,以4℃,12 000*g离心15分钟,此时RNA沉淀于管底形成胶状小球,弃掉上清,用75%的乙醇清洗RNA沉淀,以4℃,8 000*g离心5分钟,弃掉上清,快速干燥RNA,加入30至50μL无RNA酶的水溶解RNA,用紫外分光光度计测量RNA浓度及OD260与OD280的比值.
宣胖13840301244问： TRIzol法提取RNA每个步骤的作用是什么?其实自己多多少少知道,但是又不是很确定.希望知道的朋友告诉一下.因为自己还没有做这个实验,所以都是很模糊... - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答：[答案] TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性.在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中.取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA;用乙醇沉淀中间层可回收DNA;用异丙醇沉淀有机相...
宣胖13840301244问： TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答： 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
宣胖13840301244问： 怎么提取RNA? - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答： 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
宣胖13840301244问： trizol法提取RNA分成的三相分别是什么 - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答：[答案] 上层无色,接近透明色的为RNA;中层白色(很薄)的为DNA;下层红色的为蛋白质.基本的层次和颜色是这样的,但是植物材料考虑到色素的问题,颜色会有细微的差异.三相中DNA最薄,另外两相差不多,RNA相比蛋白质厚一点.
宣胖13840301244问： Trizol法提取流感病毒 RNA - ？
科尔沁右翼前旗哌能回答： 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管;2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀;3、13000rpm离心15min;4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...
