细胞上清trizol提取rna
收集些RNA实验文献资料,为论文做准备。。酵母RNA的提取,确定RNA质量等...
12000×g高速离心5min弃上清，用75％乙醇洗涤RNA沉淀2次，用30μlDEPC－H2O溶解RNA沉淀。产物用于电泳分析或在－20℃保存。1．2TRIZOL试剂盒改进方法提取酵母菌总RNA 在收集菌体之前加入1％的蜗牛酶30℃温育20min（对照组温育50min），然后进行菌体离心收集加入1mlTRIZOL，混匀，振荡，冰浴5min，加入...
TRIzol法提取的总RNA加DEPC水后无法回溶,以前没出现过问题,现在就是加...
里面有杂质，是不是现在提取样品比原来放的多。你可以把沉淀涡旋混匀，溶解10分钟后再离心，去上清，里面应该有你要的RNA，沉淀呢，里面还是有RNA的，看你需要的量选择丢弃还是继续从里面抽提了。
qpcr实验流程
G实验进行的过程中或观看实验时没有带口罩不要在超净台前讲话。二、总 RNA 抽提 1)细胞培养皿中细胞样品用 1*PBS 洗两次后，用1m 枪将 PBS 吸净，加入lml Trizol(invitrogen)溶液，吹打混匀，并吸至 1.5ml RNase free EP 管中使细胞充分裂解，室温静置 5min;组织样品用液氮充分研磨，加入 ...
rna稀释后可以震荡混匀吗
每5-10×106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml Trizol。加Trizol前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪处理）?2）1ml Trizol Reagent，震荡混匀?3）将匀浆样品在15-30℃放置5mim，使得核酸蛋白复合物完全分离。?4）可选步骤:4 ℃ 12 000rpm离心10min，取上清...
trizol rna提取 加入氯仿离心后 上清红色的原因
不要用枪混匀，直接上votex,没有仪器就盖紧了，使劲的晃，知道发白，变成粉红色，分不出层，为止 实在不行，换个试剂好了，我给你换我们厂家的试剂，绿色的，哈哈，上层肯定不会是红色。
为什么用trizol试剂提取玉米胚乳时,在加入氯仿,离心后,上清是冻状的...
冻状是什么意思？果冻状的？我用trizol提取过很多类型的RNA，但是没碰到过这种情况。不过你先加入氯仿后有没有剧烈震荡？或者是你的样品量太多了，1ml的trizol不要超过100ug样品
提取RNA相关
标准 Trizol 提取步骤为 液氮研磨--加入 Trizol 裂解--加入氯仿抽提--离心--加入氯丙醇沉淀--离心--酒精洗涤--离心。因为提取的组织，在加入 Trizol 后增加了一步简短的离心，可以帮助去掉一些无法降解的组织，比如纤维和杂质之类，然后取上清再加入氯仿，可以帮助提高氯仿的效率。然后就是在加入 Trizol...
请问用TRIzol提取总RNA蛋白质除不尽的原因及解决办法?
吸上清400uL足矣，不要贪多，呵呵，这是我刚开始犯的错误
rna提取108ng\/ul做反转录可以吗
RNA 。（匀浆器 180 °，120min ）1.加 Trizon 裂解细胞：加入适当量的 Trizol 至细胞中（直接加入去培养液平板中后用枪吸 出，亦可细胞刮下后离心去上清再加，用量约 1ml Trizol 每 3× 10 6 、cells ）。贴壁细胞在遗 弃培养基后，可以直接加入 Trizol （按 10cm 2 \/ 1ml Trizol ...
提取RNA为什么选幼嫩
3. 可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。4. 每使用1ml TRIzol加入0.2m...
资中县丹七回答：[答案] 厚百提供:1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞.2、将组织或细胞的Trizol裂解液...
毕葛18832639587问： Trizol法提取RNA操作步骤? ？
资中县丹七回答： 动植物总RNA提取-Trizol法 Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染.RNA可...
毕葛18832639587问： 想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是否可以共享一下,谢谢 - ？
资中县丹七回答： 我这边刚好在做,给你说下: 贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来.组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末). (此步骤可以-80oC冻存,下面...
毕葛18832639587问： 怎样用TRIzol 法提取动物血清总RNA - ？
资中县丹七回答： 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%.2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...
毕葛18832639587问： 动物组织如何提取总RNA? - ？
资中县丹七回答：[答案] Trizol法 1、将组织在液氮中磨成粉末后,再以50-100mg组织加入1ml的Trizol液研磨;每2E6个细胞加入1mLTrizol.注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%. 2、研磨液室温放置5min,然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿,盖紧离心管...
毕葛18832639587问： Trizol法提取流感病毒 RNA - ？
资中县丹七回答： 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管;2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀;3、13000rpm离心15min;4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...
毕葛18832639587问： 怎么提取RNA? - ？
资中县丹七回答： 我们实验室用的是TRIZOL试剂盒,原理就是先组织匀浆,然后将RNA与蛋白质等分离,这个用的是戊二醇,然后再用柱子加各种溶剂,各种12000r/min离心,多次离心之后,经过洗涤干燥,再溶于DEPC水就可以冷藏了. 整个实验中要注意尽量避免实验材料与空气接触,以免被RNA酶降解其中的RNA,要知道RNA酶可是无处不在啊,还有DEPC是有毒的(一般分子实验所用的都多多少少有毒...),所以要小心~
毕葛18832639587问： TRIzol法提取流感病毒RNA每个步骤详细注意事项? - ？
资中县丹七回答： 三、Trizol法提取法(这是提禽流感病毒的步骤,供参考) Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克.1、取鸡胚尿囊液,加入5-10倍体积Trizol液,混匀;2、室温放置5分钟,然后以每1ml Trizol液加...
毕葛18832639587问： 用trizol提取rna时,为什么dna不会溶解在水相 - ？
资中县丹七回答： 提取RNA时如何去除DNA的污染的方法: 注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有 问题.发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度 离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体...
毕葛18832639587问： trizol法提取RNA分成的三相分别是什么 - ？
资中县丹七回答：[答案] 上层无色,接近透明色的为RNA;中层白色(很薄)的为DNA;下层红色的为蛋白质.基本的层次和颜色是这样的,但是植物材料考虑到色素的问题,颜色会有细微的差异.三相中DNA最薄,另外两相差不多,RNA相比蛋白质厚一点.
