pcr时模板dna加的量
多顺反子应用前景
在已发表的相关序列基础上，研究人员设计引物，通过PCR技术构建了一系列水稻质体多顺反子定点整合表达载体，包括质体核糖体RNA操纵元启动子（Prrn）、psbA基因3'端终止子（psbA3'）、氨基糖苷3'-腺苷酰基转移酶基因（aadA）、水稻质体基因组高频同源重组片段（psbC\/trnG）等元件，如crDNA、甘露聚糖酶基因...
关于电吉它效果器的问题
RP50使用的Audio DNA 音频DSP芯片带来的强大运算 能力提供了放大器、音箱、 拾音器模拟以及录音级别的 ...•Cr:Cry Wah是一种哇音的经典声音。 •Bo:精致的Wah,扫描频带更宽更具现代感的声音。 •Fr...它可以把输入进来的信号做弯曲处理,或是在原信号上加一个可弯曲的和声。当踏板上下踩动时,音调也会...
木霉中糖类代谢
当优先选择的碳源存在时,其他碳源的代谢会被一种复杂而严谨的过程抑制,这就是所谓的碳代谢阻遏。为了研究木霉中碳代谢阻遏,利用兼并引物从里氏木霉(T.reesei)和哈茨木霉(T.harzianum)中克隆获得了葡萄糖阻遏基因 cre1,cre1 编码包含锌指的C2H2型DNA结合蛋白,CRE1蛋白与构巢曲霉(A.nidulans)中葡萄糖阻遏基因creA...
病毒复制循环可分为哪几个阶段?各个阶段的主要过程是什么?
水磨石病毒的细胞表面受体是含唾液酸（N-乙酰神经氨酸）的糖蛋白，它与流感病毒表面的血凝素剌突（受体连结蛋白）有特殊的亲和力，如用神经氨酸酶破坏该受体，则流感病毒不再吸附这种细胞。 此外，HIV受体为CD4；鼻病毒的受体为细胞粘附分子-1（1CAM-1）；EB病毒的受体为补体受体-2（CR-2）。病毒...
悬赏50分!大家帮帮忙!有几道肿瘤学的名词解释和简答题帮忙答一下!谢...
? 生化学监控,检测接触的生化学终点,如DNA或蛋白质加合物,它能反央对接触相同的周围浓度起反应时人的上体差异。Biomarker? 生物标志物,任何用来检测接触致癌作用或预测癌倾向的不同生物学或生化学指标。生物标志物是预后或诊断的参数,或用于临床干预度验的中间终点。Blocking agent? 阻断剂,任何在致癌剂处理过程中...
同源重组!在线等!～～～
同源重组（Homologus Recombination) 是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化，如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等；以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常...
跪求请问谁知道大肠杆菌在保健食品中的标准值是多少?我可以向那里咨询...
由于存在同源序列,随意设计的引物链,其PCR产物在电泳分析时可能出现多条链,因此在设计引物链时应充分考虑引物特异性。引物长度一般为15-30个碱基,G+C含量为40- 60%,浓度0.1-1umol\/L 。 TaqDNA聚合酶:浓度为1-4ul\/100ul。TaqDNA聚合酶单位用量增长可能导致非特异DNA扩增 。 模板DNA:应避免混有任何蛋白酶、...
同源染色体非姐妹染色单体之间,发生基因交叉互换,叫做基因重组么...
真核生物,重组发生在减数分裂期同源染色体的非姊妹染色单体间,细菌可发生在转化或转导过程中,通常称这类重组为同源重组(homologous recombination),即只要两条DNA序列相同或接近,重组可在此序列的任何一点发生。然而在原核生物中,有时基因重组依赖于小范围的同源序列的联会,重组只限于该小范围内,只涉及特定位点的同源...
皮克斯凝胶美国皮克斯皮肤医学实验室
美国PIX皮肤医学实验室汇集了各国权威皮肤医药专家，历经十年的潜心研究，针对世界各地频发的皮肤顽疾，如皮炎、湿疹、牛皮癣、生化癣等，成功研发出CR-DNA纳米除癣分子。2008年初，武汉祥顺生物药业有限公司独家取得了美国PIX皮肤医学实验室的技术并获得了授权生产。祥顺生物深入研究亚洲地区的气候和皮肤特性，...
顺反子的多顺反子的应用前景
分别设计引物，通过PCR技术克隆了一系列构建水稻质体多顺反子定点整合表达载体所需的元件：质体核糖体（16S)RNA操纵元启动子（Prrn）、质体psbA基因3′端终止子（psbA3′）、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因（aadA）、水稻质体基因组高频同源重组片段（psbC\/trnG，大小3362bp），命名为crDNA、甘露聚糖酶...
城口县欣坦回答： 【注意】(1)测序所用模板DNA的量一般按下面要求加入:模板种类/长度模板量200bp(PCR产物):16ng(120fmol)3000~5000bp(超螺旋质粒DNA):4mg(2pmol)48000bp(λ,粘粒DNA):1mg(31fmol)由于超螺旋质粒产生的信号比松弛的线性双链DNA弱,因此使用超螺旋质粒作为模板时其用量要比其它模板大一些
邢媚18971045256问： 我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大?加多少? - ？
城口县欣坦回答： 我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测. PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μl. 不要低于0.5μl,也不要高于3μl.选择几个梯度做一下看看哪个效果好就用哪个.有时候为了省钱,就直接用1μl上去P,一般问题不大,出了问题再回头做梯度也不迟. 总而言之,使得模板量在1μl左右最好.
邢媚18971045256问： 关于PCR溶液体系的配制每个PCR反应包括25 ng模板DNA,0.5 μmol/L正反向引物,0.2 mmol/L dNTP mix,0.5个单位的Taq DNA聚合酶和1*PCR buffer(... - ？
城口县欣坦回答：[答案] 加入量和浓度有关,只要知道每一个要加入物质的浓度就可以算出来了:模板的体积=25ng/模板的浓度 (这个值需要测定,如果实在不知道模板浓度,就加0.1-0.5ul左右吧)引物的体积=0.5umol/1000uL * 10uL / 引物浓度 (根据自己配制的情况,...
邢媚18971045256问： 土壤细菌总DNA pcr模板量一般多少??? - ？
城口县欣坦回答： 2ng左右,还高或过低pcr效果都不好,特别是模板量过高pcr是很难成功的,楼主可以测一下模板浓度,一般是25ul的反应体系中含有2ng左右的DNA效果比较好.
邢媚18971045256问： PCR时人模板DNA的量加到5μg会不会有点多? 用的是TaKaRa Taq,50ul的反应体系 - ？
城口县欣坦回答： 5μg的确有点多,看来你的DNA原液的浓度很高,一般PCR需要的模板量是有一定范围的,也是根据你要做的分子实验所需的PCR情况而不同的,模板量太高也许会有拖带或变性不完全现象,50ul你可以试着DNA终模板量为1μg或做几个不同模板量的梯度PCR,看看哪种效果最好,得以优化DNA模板量!
邢媚18971045256问： 20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少？
城口县欣坦回答： 10*扩增缓冲液 2ul, 4种dNTP混合物 各200umol/L 2ul, 引物各10~100pmol 0.5ul, 模板DNA 0.1~2ug,Taq DNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L 1.5ul,加双或三蒸水至20ul.
邢媚18971045256问： RAPD实验PCR需要加多少模板 - ？
城口县欣坦回答： 最好不要太低,否则条带不清晰,一般我们会加50~100ng/体系,但是DNA样品实在有限的话可以通过适当提高循环数来得到清晰的条带. 不过模板越少,PCR效果会打折扣的. 还有,模板少,另外其它组分的用量不变的话,引物二聚体会增多,引物非特异性结合的概率会小小增高,当然,最主要的还是影PCR产量. 刚才看了,你是做RAPD,模板少的话条带会比较少的,多态性也不太容易出来,要么你再提DNA,要么你降低退火温度,提高循环数试试
邢媚18971045256问： 实时定量PCR的结果分析 - ？
城口县欣坦回答： Sybergreen可以和所有核酸结合,没有特异性.所以要保证特异性的话,最好用其他的方法.扩增体系中加入模板DNA的体积,比如同时10微升的体系,对照组加1微升DNA,实验组加2微升DNA,则实验组的加样量是对照组的2倍.看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据,CT值一般在35左右就失去参考价值了,平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右
邢媚18971045256问： PCR反应中DNA模板的量比原计划多加了会怎样 - ？
城口县欣坦回答： 没什么影响~但是不能太多~模板正常量要尽量少~毕竟PCR是指数扩增~
