一般pcr时dna浓度
pcr引物浓度一般选多少?
2. 若引物浓度过低，则可能降低PCR的敏感性，导致目标产物的产量减少。因此，选择合适的引物浓度对于获得理想的PCR结果至关重要。四、注意事项 除了引物浓度，PCR反应的其他参数如模板DNA的浓度、能量参数、缓冲液的选择等也会影响PCR结果。因此，在进行PCR实验时，需要根据实际情况优化反应条件，以获得最佳...
基因组DNA一般稀释多少倍用于PCR?
一般DNA总量用的是50-100ng为佳。稀释多少倍要看你你DNA原液的浓度。
ffpe 提取dna 一般浓度和纯度是多少
首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆 特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的...
引物浓度
引物浓度在PCR（聚合酶链式反应）实验中是一个关键参数，其设定直接影响到PCR产物的生成效率和特异性。通常，引物浓度的选择范围在0.1至1.0微摩尔（μM）之间，但具体最佳浓度取决于多个因素，包括引物的长度、GC含量、序列复杂性以及模板DNA的浓度和纯度等。引物浓度过低可能导致PCR产物量不足或无法...
PCR引物浓度一般选多少
引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，第一纯度...
PCR扩增PCR反应系与反应条件
标准的PCR反应体系包括以下成分：10×扩增缓冲液10ul，4种dNTP混合物各200umol\/L，引物各10～100pmol，模板DNA0.1～2ug，Taq DNA聚合酶2.5u，Mg2+ 1.5mmol\/L。PCR反应五要素涉及参加反应的物质主要有五种，即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+。引物设计时需遵循特定原则，包括引物长度、扩增跨度、碱基...
pcr过程中如果产生突变,对基因产物有什么影响
如果PCR过程中发生了突变，会导致扩增出来的DNA产物与原始DNA序列有差异，这可能会影响后续实验的结果。例如，如果PCR产物被用于测序，突变可能会导致序列缺失、替换或插入，从而影响基因型分析的准确性。此外，PCR产物的突变还可能影响实验的结论和解释。因此，在PCR实验中，保持反应体系的稳定性，选择合适的...
pcr引物浓度一般选多少
二、高浓度引物的潜在问题 当引物浓度过高时，可能出现以下问题：1. 非特异性扩增：高浓度的引物可能导致与模板DNA非特异性结合的位点增多，从而产生非特异性的扩增产物。2. 竞争抑制：高浓度的引物之间可能发生自配对的竞争，抑制与模板的结合，降低PCR反应的扩增效率。三、低浓度引物的潜在问题 当引物...
pcr时dna浓度过低会扩不出来吗
有可能会，但一般模版浓度不是主要因素。你可以试着改变条件多扩几次。
基础实验重新认识(5)——PCR相关
那个时候对PCR有一个大概的影响,其实在操作方面是没什么问题的。但是仔细想起来,和其他实验一样,都是一知半解,对PCR亦是如此。因此,我觉得有必要重新学习一下PCR相关的各种技术和原理。 【进入正题】 PCR (polymerase chain reaction)聚合酶链式反应,又称体外DNA扩增技术,在1985年由美国Cetus公司的Kary Mullis首创...
祁县迷清回答： rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千.如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也...
宰父思17067635096问： 基因组DNA一般稀释多少倍用于PCR? - ？
祁县迷清回答： 一般你提取出来后,按照说明书溶解,浓度正好.50μlPCR体系取1μl就可以作为模板了.
宰父思17067635096问： 我想问PCR扩增时使用的DNA模板浓度一般多大?加多少? - ？
祁县迷清回答： 我们一般不去特意检测提取的得到的模板浓度,纯度倒是要注意一下,紫外分光达到1.8即可,不过我们一般也不去检测. PCR的时候可以设置梯度,分别加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μl. 不要低于0.5μl,也不要高于3μl.选择几个梯度做一下看看哪个效果好就用哪个.有时候为了省钱,就直接用1μl上去P,一般问题不大,出了问题再回头做梯度也不迟. 总而言之,使得模板量在1μl左右最好.
宰父思17067635096问： PCR复制n次,至少需要加入多少引物? - ？
祁县迷清回答： 10uM浓度的引物,加个1ul足矣.在PCR反应中,经过n次循环,理论上DNA链的数目扩增了2的n次方.PCR的一个循环,一个DNA模板被复制为2个DNA片段. PCR循环次数通常就是30左右.循环数太多了,虽然在一定程度上能够提高产物量...
宰父思17067635096问： PCR产物测序要求最低的浓度是多少 - ？
祁县迷清回答： PCR产物测序要求最低的浓度是多少主要看的是PCR产物的量,已纯化一般要求总量500ng以上,未纯化1ug以上,这个量是一般情况,还要看你的产物长度,短的话可以少一些,长的话可能还要多送一些,供你参考.具体最好咨询你要送测序...
宰父思17067635096问： 土壤细菌总DNA pcr模板量一般多少??? - ？
祁县迷清回答： 2ng左右,还高或过低pcr效果都不好,特别是模板量过高pcr是很难成功的,楼主可以测一下模板浓度,一般是25ul的反应体系中含有2ng左右的DNA效果比较好.
宰父思17067635096问： DNA测序时,一般需要DNA的浓度为多少,总量为多少 - ？
祁县迷清回答： PCR产物 20ng/ul,30ul 已纯化产物 20ng/ul, 20ul华大基因
宰父思17067635096问： 刚刚提的DNA,怎么样,能用于PCR吗 - ？
祁县迷清回答： 一,可以pcr.纯化的本质是去除蛋白质和一些其他物质,使你的dna纯度更高,所以当然可以pcr,而且有的时候由于dna不纯,甚至会干扰pcr. 二,纯化的时候会损失一些dna,只能说纯度提高,但是本质上dna含量会减少,至于浓度在于你溶解dna的液体体积吧~ 三,至于提的dna浓度不高,一般在于自己的操作(如果同样情况下,别人可以提好),也有可能是因为材料的特殊性等,可以考虑试剂盒
宰父思17067635096问： 模板的浓度对PCR有什么影响,一般要多大浓度? - ？
祁县迷清回答：[答案] 那要看你用的是什么模板了. pcr的灵敏度很高,几pg的DNA就能检测出来了.一般用pcr产物或者质粒做模板,只需要1ng左右就可以了,如果是基因组或者cDNA做模板,模板量可适当增加.
宰父思17067635096问： 真菌dna做pcr条带总是很浅该怎么办? - ？
祁县迷清回答： 您应考虑以下几个方面: 首先是样品DNA质量,你应测下样品DNA的OD值,在1.8-2.0为宜,纯度或pH不对也会使PCR效果不佳.然后测下浓度,我们这用50-300ng/ul,PCR上样1-2微升,DNA浓度过高反而会抑制PCR反应.另外,最好跑个电...
