96孔板细胞铺板多少细胞
悬浮细胞病毒转染铺6孔板要多少细胞
1、慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞以1×10^5\/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5\/孔左右。2、第二天，用含有6 μg\/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育。3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polyb...
铺到6孔板的想要铺24孔板怎么办呢
进行替换。铺板24孔板是先在每个孔里面加1mL的培养基，晃动使之铺匀整个孔底，然后加入1mL的细胞悬液，铺到6孔板的想要铺24孔板可以进行全面替换。
如何将细胞接种到六合板
加药的话，我一般是铺板24小时或48小时后预处理细胞12小时或24小时，再加药刺激18到24小时，算下来要三四天的周期，以上是实验室的传统，当然也会根据文献，细胞种类不同而改变。我这是条很非常十分特别极其宝贵自己摸索绝对有效的经验：针对12孔板和6孔板，沿着孔一周边缘均匀接种，切记：不要接种孔中...
问题:有目的基因,293t细胞,如何用慢病毒载体整合入293t细胞,求详细过...
第一天：1.用无抗生素DMEM+10%FBS铺板293FT细胞，2ml\/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天：1.转染293FT细胞。1. 500ul Opti-MEM稀释2ug pWPXLd-目的基因+1.5ug psPAX2+1.5ug pMD2.G 2. 500ul Opti-MEM稀释15ul lipofectamine2000 3. 5min后，将，溶液...
12孔板一个孔多少细胞
六孔板细胞长至80%-90%confluence , 一孔约为5-8x105 细胞, 按1：6传，三天长满。如果想快点，就1：3传吧。 要想达到你想要的生长时间和状态，建议根据一定范围分几个密度摸一下，再确定。 在传代时，一般一个孔接种密度为1-2 x10000每平方厘米。12孔的底面积为4.5平方厘米。不知道这个细胞...
小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养
2.7 细胞铺板至100 mm 培养皿(每皿最多10ml)或6 孔培养板(2m\/孔)。 2.8 37℃,5% CO2 培养箱继续培养1-2 天; 2.9 收集悬浮细胞,即为较成熟的BMDC。 3. BMDC 的完全成熟 注:步骤2 中获得的BMDC 并非完全成熟的DC,若想得到完成成熟的DC,还需LPS,CD40L 或TNF-a 等的诱导。 3.1 步骤2.4 或2.9 中...
六孔板加80微不能覆盖板底
铺板的均匀有两种，一种是孔间的均匀，一种是孔内的均匀。为了做到孔间的均匀，建议楼主采用多通道移液器有人叫排枪，配合相对应的加样槽。每孔逐一添加非常难以作到均匀。关于孔内的均匀我没有什么秘诀，经验是细胞悬液加入后不要晃动或敲打板，而是直接放入孵育箱让它自己贴壁。6孔板，采用将第一...
细胞铺板有什么技巧吗?力求均匀
5、一瓶细胞长满后，正常处理，在培养瓶里吹匀，然后铺6孔板，每孔2毫升，铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭，然后放到培养箱里，轻微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈。基本上24小时之后观察 每孔的细胞都会很均匀。6、计算好所需要的全部液体量和细胞量，混匀后，加到六孔板里，六孔板按横8字...
六孔板加1.5ml培养液会怎么样
会造成污染。所加培养液的液面不宜太深，一般在2-3mm范围，结合孔的底面积就可算出适宜加液量，若加液量过多会影响气体（氧气）交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。六孔板铺板在摇匀时千万不要只沿着一个方向做圆周运动，要十字交叉摇，即前后晃几下，左右晃几下，这样细胞才不至于集中在孔中央...
96孔板每个孔铺多少细胞
96孔板每个孔铺有100微升个细胞。一、细胞数：96孔板每一孔250μl。通常每一孔不少于100μl，每毫升不少于100个细胞。所以每一孔≥26个细胞，具体放多少根据自己需求，有的是每一孔放一个细胞。二、培养版优点：96孔细胞培养板，适宜于细胞和培养中初期实验条件摸索和优化等实验。三、如何铺均匀：...
双峰县参茸回答：[答案] 不同的细胞生长速度也不一样,为了在测定期间细胞不致于长满全孔,最好以较少量的细胞接种.建议先做个预试验,以不同密度梯度的细胞数量接种细胞板孔,看多大接种密度细胞会在测定期内长满细胞板孔,选择比此密度稍低的接种量就可以了....
隐功17853341086问： 96孔细胞培养板每孔的使用面积是多少 - ？
双峰县参茸回答： 各培养器皿的面积、培养液量及细胞量分列如下: 培养器皿 面积(cm2) 培养液量(ml) 细胞量 96 孔培养板 0.32 0.1 10^5 24孔培养板 2 1.0 5*10^5 12孔培养板 4.5 2.0 10^6 6孔培养板 9.6 2.5 2.5*10^6 3.5 cm 培养皿 8 3.0 2*10^6 6 cm 培养皿 21 5.0 5.2*10^6 10 cm 培养皿 55 10.0 13.7*10^6 25cm2 培养瓶 25 5.0 5*10^6 75cm2 培养瓶 75 15~30 2*10^7
隐功17853341086问： 96孔板包被加50微升可以吗,会不会少,对后续实验结果有影响吗 - ？
双峰县参茸回答： 总结下各种孔板细胞接种量 仅供参考细胞培养瓶(板)生长面积容量与细胞数(大约)96孔板 4~5X10 4 35mm培养皿 1X10 6 48 孔板 1.3X10 5 60mm培养皿 2.6X10 6 24孔板 2.5X10 5 100mm培养皿 7X10 6 12孔板 5X10 5 150mm培养皿 1.8...
隐功17853341086问： 胃癌7901细胞计数24孔板每孔应该接种多少个细胞呀 - ？
双峰县参茸回答： 根据细胞生长的速度来决定,96孔板的每孔体积100~200ul,种细胞数一般都是2000~10000个/孔,最好不要超过10000个/孔. 同理,24孔板每孔大约500ul,那么细胞数一万为佳.
隐功17853341086问： 做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少? - ？
双峰县参茸回答：[答案] 博凌科为我觉得细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平.比如我做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较.后来我换用 10000/ml,结果就很好....
隐功17853341086问： 如何把细胞铺的更均匀 - ？
双峰县参茸回答： 做细胞生物学实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了.但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀: 要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶.现分享我的实验技巧.一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入...
隐功17853341086问： 做SKOV3和SMMC - 7721的MTT实验,请问MTT实验中96孔板中的合适细胞数或者浓度. - ？
双峰县参茸回答： 博凌科为解答:调整细胞浓度至1*105/ml,分别加入96孔板,每孔加200μL使每孔细胞数目是2*104个.
隐功17853341086问： 关于细胞铺板 - ？
双峰县参茸回答： 24:0.5-1X10^5 细胞, 0.5ml 48:0.25-0.5x10^5, 0.25ml.具体数量根据你培养的细胞生长速度及实验需要决定.
隐功17853341086问： 96孔板周围孔细胞死亡,但是中间的孔细胞长的还可以,很奇怪,为什么? - ？
双峰县参茸回答： 也有可能是因为脱水渗透压改变而造成的死亡.因为板的外围孔较容易蒸发失水.培养细胞要求板既能透气,又不能被水分迅速蒸发流失.如果板的质量问题造成培养液内水分蒸发掉较多,则培养液会变咸,细胞失水死亡.如果还是用同样的板,可以试试外围不种细胞,每孔加点无菌水,也有助于保护中间孔的细胞.另外也有可能是楼主加的培养液本身量不够.我都用两到三百微升,楼主如果用比较少,可以试试加多些.
隐功17853341086问： 我做的MTT为什么同一组的两孔差别那么大呢?做了两次都是这样! - ？
双峰县参茸回答：[答案] 博凌科为产生差别的原因有多种1.在加细胞时,细胞沉淀下来,导致两孔细胞数不同.我们通常用磁力转子对细胞缓慢搅拌,时刻保持细胞处于悬浮状态.2.96孔板在培养箱中,由于湿度不够,而培养箱由于具有一定的温度,使得边缘的孔水分蒸发较快...
