96孔板每个孔铺多少细胞

作者&投稿:市维 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

BMDM小鼠骨髓源性原代细胞培养 生物实验 研究生
在操作中,先收集单核细胞的上清,1700 rpm的离心机将它们送回原地。接着,调制出神秘配方:0.22微米过滤的10毫升L929细胞与35毫升1640培养基、5毫升BI血清、500微升p\/s和100微升支原体清除剂交织融合。将离心后的细胞温柔地重悬,如同给新生细胞赋予生命,注入每个孔板的怀抱,6孔板每孔2毫升,12孔板则...

12孔板一个孔多少细胞
六孔板细胞长至80%-90%confluence , 一孔约为5-8x105 细胞, 按1:6传,三天长满。如果想快点,就1:3传吧。 要想达到你想要的生长时间和状态,建议根据一定范围分几个密度摸一下,再确定。 在传代时,一般一个孔接种密度为1-2 x10000每平方厘米。12孔的底面积为4.5平方厘米。不知道这个细胞...

6孔版,24孔板,96孔板培养细胞加培养液多少
6孔板底面积9.6cm2,加培养液的量2.5ml。12孔板底面积4.5cm2,加培养液的量2ml。24孔板底面积2cm2,加培养液的量1ml。96孔板底面积0.32cm2,加培养液的量0.1ml。无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内,解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的...

用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是多少?加多少培养液合适?成...
个人经验,仅供参考。用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是每空7-10万,不能太少了。一般每空加2ML培养液。成纤维细胞接种8万每孔的话一般3-4天可以长满。

6孔板和10cm培养转换
一个6孔板大约相当于4个10cmdish。6孔板和10cmdish都是生物实验室中常用的培养皿,6孔板是一种用于细胞培养和实验操作的多孔板,有6个孔,每个孔的直径为约1.9cm,而10cmdishsh则是一种圆形培养皿,直径为约10cm,因为6孔板和10cmdish的形状和大小不同,因此无法直接进行比较,但是,根据实验室常用...

细胞铺板有什么技巧吗?力求均匀
4、细胞要尽量打散,大部分呈单个状态。离心后,要充分悬浮!还有转移到六孔板后,是要晃得!晃的时候最好不要让那个细胞液转圈,不然细胞就全被带到中间去了,就会不均匀!5、一瓶细胞长满后,正常处理,在培养瓶里吹匀,然后铺6孔板,每孔2毫升,铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭,然后放到培养...

6孔版,24孔板,96孔板培养细胞加培养液多少
6孔板底面积为9.6平方厘米,加入培养液的量为2.5毫升。12孔板底面积为4.5平方厘米,加入培养液的量为2毫升。24孔板底面积为2平方厘米,加入培养液的量为1毫升。96孔板底面积为0.32平方厘米,加入培养液的量为0.1毫升。在体外培养细胞时,无毒和无菌的环境是至关重要的。细胞在活体内拥有解毒系统...

毫无保留,教你2种细胞集落形成实验
一、平板集落形成实验(适用于贴壁细胞)1. 前期准备: 确保所有工具如6孔板、吸管、枪头等在超净工作台上消毒30分钟,包括血球计数板和基质胶。2. 步骤一:细胞准备 - 取出贴壁率大于90%的对数生长期细胞,消化离心后,重悬并计数。3. 步骤二:接种与培养 - 实验分组,每个孔中加入1000个细胞,放入...

请问一瓶25平方厘米的小培养瓶,长满了一般有多少细胞?
一瓶25平方厘米的小培养瓶,长满了一般有5000000000000000个细胞;25平方厘米的培养瓶约可收获细胞5乘10的6次方,75平方厘米的培养瓶约可收获细胞2乘10的7次方。铺6孔板得看接种密度和铺几块板,如接种密度为每毫升10的5次方,每孔加2毫升,一个25平方厘米的培养瓶可铺4块6孔板。

6孔板转染质粒用量
预计11微升。六孔板转染不需要太多质粒,(1-2微克)质粒转一个孔,预计用11微升就够了,细胞要达到70-80%丰度(占孔的面积比),6孔板每孔加入的转染体系,总250uL。

源于17072248770问: 测生长曲线,96孔细胞培养板每孔加多少细胞合适 -
辉南县复方回答:[答案] 不同的细胞生长速度也不一样,为了在测定期间细胞不致于长满全孔,最好以较少量的细胞接种.建议先做个预试验,以不同密度梯度的细胞数量接种细胞板孔,看多大接种密度细胞会在测定期内长满细胞板孔,选择比此密度稍低的接种量就可以了....

源于17072248770问: 96孔细胞培养板每孔的使用面积是多少 -
辉南县复方回答: 各培养器皿的面积、培养液量及细胞量分列如下: 培养器皿 面积(cm2) 培养液量(ml) 细胞量 96 孔培养板 0.32 0.1 10^5 24孔培养板 2 1.0 5*10^5 12孔培养板 4.5 2.0 10^6 6孔培养板 9.6 2.5 2.5*10^6 3.5 cm 培养皿 8 3.0 2*10^6 6 cm 培养皿 21 5.0 5.2*10^6 10 cm 培养皿 55 10.0 13.7*10^6 25cm2 培养瓶 25 5.0 5*10^6 75cm2 培养瓶 75 15~30 2*10^7

源于17072248770问: 胃癌7901细胞计数24孔板每孔应该接种多少个细胞呀 -
辉南县复方回答: 根据细胞生长的速度来决定,96孔板的每孔体积100~200ul,种细胞数一般都是2000~10000个/孔,最好不要超过10000个/孔. 同理,24孔板每孔大约500ul,那么细胞数一万为佳.

源于17072248770问: 如何把细胞铺的更均匀 -
辉南县复方回答: 做细胞生物学实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了.但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀: 要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶.现分享我的实验技巧.一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入...

源于17072248770问: 96孔板周围孔细胞死亡,但是中间的孔细胞长的还可以,很奇怪,为什么? -
辉南县复方回答: 也有可能是因为脱水渗透压改变而造成的死亡.因为板的外围孔较容易蒸发失水.培养细胞要求板既能透气,又不能被水分迅速蒸发流失.如果板的质量问题造成培养液内水分蒸发掉较多,则培养液会变咸,细胞失水死亡.如果还是用同样的板,可以试试外围不种细胞,每孔加点无菌水,也有助于保护中间孔的细胞.另外也有可能是楼主加的培养液本身量不够.我都用两到三百微升,楼主如果用比较少,可以试试加多些.

源于17072248770问: 做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少? -
辉南县复方回答: 博凌科为解答:我觉得细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平.比如我做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较.后来我换用 10000/ml...

源于17072248770问: 如何建耐药细胞株? -
辉南县复方回答: 一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株. 脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,...

源于17072248770问: 做SKOV3和SMMC - 7721的MTT实验,请问MTT实验中96孔板中的合适细胞数或者浓度. -
辉南县复方回答: 博凌科为解答:调整细胞浓度至1*105/ml,分别加入96孔板,每孔加200μL使每孔细胞数目是2*104个.

源于17072248770问: 实验结果 多少抑制率算比较合适 -
辉南县复方回答: ⒈选择适当的细胞接种浓度.一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞.但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确...

源于17072248770问: 六孔板可以每孔加入不同的细胞?一共加五个孔? -
辉南县复方回答: 你要进行细胞计数的~~用胰酶消化好后,把细胞悬浮在1ml培养基里,吸取5微升至1ml离心管中,加入45微升提前配好的含有台盼蓝的pbs,吹打均匀,然后用20微升的枪吸10微升至细胞计数板,显微镜下计数,计数后乘以10,此时的细胞数是1ml细胞培养皿中.


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