24孔板细胞铺板步骤
96孔板细胞铺板公式
1乘于10的5次方。96孔板是一种用于测量流量的差压产生装置。96孔板细胞铺板公式是1乘于10的5次方,可与各种差压表或差压变送器配套使用,测量管道中各种流体的流量。设备采用特殊工艺制作,使细胞达到适宜吸附状态,所有产品均经过伽马射线灭菌。
24孔板培养细胞的问题,很困扰,请高手指点!
博凌科为解答:吹细胞时注意不要把枪头打空,不要吸进空气,一般就不会有泡沫了,少量泡沫也不会影响很大。中间细胞多可能是由于你摇匀细胞时,板子是圆周运动的,这样细胞就会聚集到中间。最好用十字运动摇匀,注意用力均匀。
如何将细胞接种到六合板
加药的话,我一般是铺板24小时或48小时后预处理细胞12小时或24小时,再加药刺激18到24小时,算下来要三四天的周期,以上是实验室的传统,当然也会根据文献,细胞种类不同而改变。我这是条很非常十分特别极其宝贵自己摸索绝对有效的经验:针对12孔板和6孔板,沿着孔一周边缘均匀接种,切记:不要接种孔...
求大神讲解一下单克隆筛选的原理,最好通俗一点哈
细胞单克隆筛选是根据细胞所具有的特性将单个细胞从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,是抗体制备细胞株优化、稳转细胞株构建、药物靶点筛选等应用中重要的一环,优质的单克隆细胞能够更好地为不同领域科学研究和药物研发提供支持。通俗的讲:就是将混合细胞通过3D打印技术(更精准高效)\/直接用96孔板分离...
脾淋巴细胞增殖实验
不知楼主的问题解决了没有,我最近做脾细胞增殖实验,用2*10^6铺板,72小时培养,MTT作用4小时后加DMSO几乎没有颜色显示,看到楼主的帖子,才想到也有可能是细胞死亡的原因。不知楼主后来是怎么解决的,求教~
IL-2活性测定问题
实验步骤贴壁细胞:1.收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2.5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度...
贴壁后的巨噬细胞还可以铺板到6孔板中吗
1、将细胞消化下来(胰酶消化的方法),离心、收集细胞沉淀、用PBS洗,再离心、收集细胞;计数后即可接种在各种规格的培养板;2、是啊。
细胞消化接种到24孔板之后,老是每孔的中间部分长不满
并且这样会改变了培养液的成分浓度,造成渗透压过高。个人经验认为这是物理问题:24孔板小,细胞接种进去后是很难摇均匀的,结果导致细胞重贴壁后呈现四周密中间稀的状况.至于中间较多死细胞,如果是悬浮状的话,也一样是物理问题。接种后比较粗暴的碰撞,似乎对摇均匀细胞有一定效果.在为多孔板培养的细胞...
293T细胞是怎么包装病毒的
慢病毒包装简要程序(以六孔板中的1孔为例):第一天:1.用无抗生素DMEM+10%FBS铺板293FT细胞,2ml\/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天:1.转染293FT细胞。1. 500ul Opti-MEM稀释2ug pWPXLd-目的基因+1.5ug psPAX2+1.5ug pMD2.G 2. 500ul Opti-MEM稀释15ul lipofectamine...
96孔板铺板一般多少细胞
不同的细胞体积大小会不一样,一般的会按1*10^5\/ML加 每孔10000个左右
衡阳市益母回答: 做细胞生物学实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了.但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀: 要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶.现分享我的实验技巧.一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入...
毕波13250434350问: 如何使用超速离心机浓缩慢病毒 - ?
衡阳市益母回答: 你好,慢病毒转染细胞的操作步骤如下: 1、慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1*10^5/孔铺到24孔板中.使细胞在慢病毒转染时的数量为2*10^5/孔左右. 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病...
毕波13250434350问: 关于细胞铺板 - ?
衡阳市益母回答: 24:0.5-1X10^5 细胞, 0.5ml 48:0.25-0.5x10^5, 0.25ml.具体数量根据你培养的细胞生长速度及实验需要决定.
毕波13250434350问: 细胞铺完板可以直接转染吗 - ?
衡阳市益母回答: 悬浮细胞病毒转染铺6孔板要多少细胞 1、慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1*10^5/孔铺到24孔板中.使细胞在慢病毒转染时的数量为2*10^5/孔左右. 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬...
毕波13250434350问: 细胞爬片如何固定? - ?
衡阳市益母回答: 师姐推荐用的晶安生物24孔板细胞爬片,爬片取出后,一般用PBS洗2遍,然后再做固定.当然,根据研究目的,PBS洗也不是一定要做的,比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗,因为凋亡的细胞在洗的过程中有可能会脱落.
毕波13250434350问: 菜鸟求教PC12细胞24孔板爬片方法 - ?
衡阳市益母回答: 晶安生物多聚赖氨酸盖玻片常用的规格:圆形(φ24mm、φ20mm、φ14mm、φ8mm).分 别对应6孔板配套用细胞爬片、12孔板配套用细胞爬片、24孔板配套用细胞爬片 、48孔板配套用细胞爬片.
毕波13250434350问: 如何用transwell进行细胞迁移实验 - ?
衡阳市益母回答: Transwell法的步骤: 先把小室擦干净后在超净工作台照紫外过夜.如新的小室省略此步.下一步将小室倒扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟.这是将细胞消化下来,调浓度.拿出24孔板加600ml的含...
毕波13250434350问: 24孔板培养细胞的问题,很困扰,请高手指点!?
衡阳市益母回答: 博凌科为解答:吹细胞时注意不要把枪头打空,不要吸进空气,一般就不会有泡沫了,少量泡沫也不会影响很大.中间细胞多可能是由于你摇匀细胞时,板子是圆周运动的,这样细胞就会聚集到中间.最好用十字运动摇匀,注意用力均匀.
毕波13250434350问: 细胞总RNA怎样提取??
衡阳市益母回答:操作步骤: 将Trizol、氯仿、冷PBS、EP管、灭酶枪头、一次性手套、EP管架、吸管等物品带入细胞室. 1、 取出EP管、做好标记 2、 取出细胞、收集上清保存备用 3、 用冷PBS冲洗细胞两次 4、 加入1ml Trizol (24孔板每孔加0.5ml即可),调小刻度用移液器吹打细胞至液体澄清(生化:摇动混匀后室温孵育10min) 详细的操作步骤,生物帮上面有的, http://www.bio1000.com/zt/cell/46213.html 细胞因子,干扰素的作用,白介素价格,肿瘤坏死因子功能
毕波13250434350问: 6、12、24、96孔板的底面积、高度及体积是多少?一般应用时加? ?
衡阳市益母回答: 6孔板底面积9.6cm2,加培养液的量2.5ml,12孔板底面积4.5cm2,加培养液的量2ml,24孔板底面积2cm2,加培养液的量1ml,96孔板底面积0.32cm2,加培养液的量0.1ml,