293T细胞是怎么包装病毒的

作者&投稿:离茜 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
我看有的文献上说用293A细胞包装腺病毒 而后感染的是293T细胞,请问为什么?~

首先你提的问题就问的不明白,为什么后感染的是293T细胞呢?
你到底想问什么呢?

楼主你好
如果是病毒的,建议卸载清理掉,以免感染
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慢病毒包装简要程序(以六孔板中的1孔为例):

第一天:
1.用无抗生素DMEM+10%FBS铺板293FT细胞,2ml/孔。确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度
第二天:
1.转染293FT细胞。
1. 500ul Opti-MEM稀释2ug pWPXLd-目的基因+1.5ug psPAX2+1.5ug pMD2.G
2. 500ul Opti-MEM稀释15ul lipofectamine2000
3. 5min后,将,溶液混合,室温静止30min
4. 从6孔板中吸出1ml培养基,然后滴加入1ml质粒和脂质体混合物。
2. 6-10h后,移除含有DNA-脂质体复合物的培养基,代之以正常培养液DMED+
10%FBS(从此刻开始算时间)。
第三天:
3.转染24h后,荧光显微镜下观察,转染效率应达到70%以上
第四天:
4. 48h收获含病毒的上清,0.45um滤膜过滤, 同时再往6孔板中加入2ml完全培养基
4. 感染细胞:用一份病毒液+2份完全培养基感染目的细胞。
第五天:
5. 72h后再次收获病毒上清。将昨天感染的细胞离心去除上清,然后再次感染目的细胞。
6. 一般感染48h后,就能见到明显的荧光。

说句实话我是复制过来的,希望可以帮你。。。


293A和293T细胞以及293细胞有什么区别吗
1. 养293细胞和293T一样。以293T为例,预先准备3个T150瓶的293T细胞,培养基为DMEM + 10% FBS,1% Glutamax ,1% 青霉素-链霉素。2. 将细胞分到12分到12个T150瓶中,每瓶的细胞密度是8×106个。3. 第二天,镜下检查细胞。细胞融合度应大致为30-40%,分布均匀。4. 转染前1小时,取出细胞...

什么是293t细胞?
293T细胞是一种永生化的人肾上皮细胞系。以下是详细的解释:1. 293T细胞的来源 293T细胞是通过基因操作技术从人的肾组织中衍生而来的永生化细胞系。这些细胞具有连续增殖的能力,因此被广泛用于生物学研究和实验室应用中。它们提供了一个方便的模型来研究各种生物学过程,如病毒复制、基因表达和蛋白质...

HEK-293T人体肾脏细胞系(STR鉴定)
HEK-293T细胞是293T(293tsA1609neo)细胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。细胞持续表达SV40抗原,该细胞常用于转染实验,转染效率较高。(转染一般以50%密度铺板,待细胞刚刚贴到皿壁上后(一般8-10小时),即可进行转染操作)2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长 3) 含量:>1x106 个\/mL 4) 污染...

293t是什么细胞?
293T细胞是一种人造的细胞系。以下是关于这种细胞的 一、细胞定义与来源 293T细胞是从一名健康成年女性的肾细胞中提取并转化的永生细胞系。这种细胞被广泛用于生物学研究,特别是在病毒学、疫苗开发和基因功能研究等领域。由于它具有易于培养和无限增殖的能力,使其成为实验室中非常有用的工具。二、细胞...

293T细胞培养要点
探索293T细胞培养的秘密:高效与稳定的黄金法则 293T细胞,以其卓越的基因表达能力和广泛的应用在科研领域,成为了生物学家的得力助手。作为HEK293的衍生品,293T细胞具有独特的特性,如人胚胎肾来源、上皮样外观,以及在富含L-谷氨酰胺和NEAA的DMEM高糖培养基中,于37℃、5%二氧化碳条件下贴壁生长。值得...

hek293t细胞是什么?
HEK293T细胞是一种人类胚胎肾细胞。HEK293T细胞是从人类胚胎肾脏组织中分离出来的细胞系。这是一种常用于生物学和医学研究中的细胞株。它具有肾细胞的典型特点,并且能够在实验室条件下进行大量培养和繁殖。由于HEK293T细胞具有良好的生长特性,它们经常被用作基因功能研究、病毒复制研究以及药物开发的实验...

293t细胞是什么细胞
293T细胞是一种来源于人胚胎肾细胞的细胞系。以下是 一、细胞系概述 293T细胞是一种经过基因改造的细胞系,源自人胚胎肾细胞。这些细胞被广泛用于生物学和医学研究,特别是在病毒生产和基因功能研究方面。由于其易于培养和操作的特点,它们成为了实验室中的常用工具。二、细胞特点 这些细胞具有快速生长和...

293细胞组织来源
293细胞是一种特殊的细胞组织来源,它起源于人肾上皮细胞,经过特定基因E1A的转染过程,形成了293T细胞。这种细胞的一个显著特征是它们同时表达SV40大T抗原,并且能够承载含有SV40复制起始点和启动子区的质粒,这使得它们在复制过程中表现出高效性。使用Ca3(PO4)2进行转染,效率可高达50%。293T细胞的...

293t多久贴壁
2小时。根据分析测试百科网查询显示,293T细胞传代后的细胞在2小时内就能贴壁,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。293T细胞是人肾上皮细胞系,有多种衍生株,比如HEK293,293T\/17等,来源都是人胚胎肾细胞。293T细胞经过基因技术派生出的细胞系,是经过腺病毒E1A基因的转染,能表达SV40大...

293T细胞培养求助
这个我就比较有发言权了。我猜想你的问题是这个细胞比较容易脱落,然后细胞吹不散。我的方法是,首先胰酶就不要加EDTA了,其次浓度为0.05%。传代时,瓶子轻拿轻放,小心的吸走培养基(不要直接倒掉,这样细胞会脱落),然后加入PBS,轻轻的把瓶子放平,不要摇动了,再吸走PBS。接着就是加胰酶了,小...

常熟市15380856354: 293T细胞是怎么包装病毒的我是新手,来实验室听师兄说将要过量表达的基因转入293T细胞,可以通过293T细胞包装病毒来收集,我想问下293T细胞是怎样... -
帅伏盐酸:[答案] 慢病毒包装简要程序(以六孔板中的1孔为例): 第一天: 1.用无抗生素DMEM+10%FBS铺板293FT细胞,2ml/孔.确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度 第二天:\x09\x09\x09 1.转染293FT细胞. 1.500ul Opti-MEM稀释2ug pWPXLd-目的基因+1.5...

常熟市15380856354: 什么是293细胞? -
帅伏盐酸: 腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体.293细胞是腺病毒载体的包装细胞. 利用腺病毒载体在包装细胞293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径. 因此充分认识293细胞尤为明智. 上面的内容是我从生物帮剪切的,具体的你自己去看吧. http://www.bio1000.com/zt/cell/222827.html 希望能帮到你?

常熟市15380856354: 293T细胞培养求助 -
帅伏盐酸: 293T细胞的培养 :293T细胞是由293 细胞派生, 表达SV40 大T抗原的人肾上皮细胞系, 被广泛应用于瞬时转染以过表达各种目标蛋白, 或是用以包装病毒. 293T 为贴壁细胞, 这种细胞对培养基的营养成分要求并不高.培养条件为:完全培...

常熟市15380856354: 慢病毒包装的原理 -
帅伏盐酸: 病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒.腺病毒扩增,也只能在293A里扩增,其他的细胞不行.慢病毒载体多是由HIV改造的,野生型的慢病毒载体是可以复制的,但是用于实验室就只能通过改造使其变为...

常熟市15380856354: 三质粒转293t构建慢病毒需要消化细胞吗 -
帅伏盐酸: 含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化,提取慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等.3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液.4)病毒的纯化和浓缩.5)分装、-80℃保存.6)滴度测定目的基因检定,并出具检测报告.

常熟市15380856354: 腺病毒是否能在293细胞中复制?
帅伏盐酸: 腺病毒可以在293A细胞中进行转录,表达并可进行包装复制出大量高滴度病毒.293T是一种逆转录包装表达细胞,我做过也可进行表达,但还没有具体鉴定表达后的病毒是否可用.293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5)DNA的永...

常熟市15380856354: hek293t细胞制备抗体属于什么技术 -
帅伏盐酸: 你好,293T细胞事先转染了Cas-9酶,Cas-9是存在于细菌中的一类防御外源DNA 污染的酶类,能够准确切除整合在细菌DNA上的外源DNA,利用这一原理,HEK-293细胞转染Cas-9酶成为293T细胞,具备了切除基因的能力,然后引入设计好的基因,293T细胞内的Cas-9酶就能够将引入的基因当做外源基因连同自身基因一并切除,因此想敲除基因,只需要将设计好的靶序列转染进293T细胞就好了,另外293T细胞因为事先已经转染过一次病毒,细胞对嘌呤霉素是有抵抗性的,因此用嘌呤霉素筛选病毒感染的细胞不适用于293T

常熟市15380856354: T293细胞是什么细胞 -
帅伏盐酸: 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制.

常熟市15380856354: 293细胞怎样培养与选择? -
帅伏盐酸: 用含血清的培养基培养即可.293细胞包括293,293T,293FT细胞,要根据具体使用来选择.比如一般的瞬转实验就三种基本都可以用,如果要进行病毒包装,最好选用293FT或者293T细胞.

常熟市15380856354: 包装细胞293,293T,GP2 - 293,Phoenix有什么不同 -
帅伏盐酸: 293细胞株插入SV40T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T,它已被广泛地用于逆转录病毒生产,基因表达和蛋白生产,细胞中含有腺病毒,需在二级生物安全柜中进行操作

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