流式细胞仪补偿原理
流式数据不调补偿会怎么样
流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。流式细胞仪由三部分构成：1、液流系统，包括流动室和液流驱动系统。2、光学系统，包括激发光源和光束收集系统。3、电子系统，包括光电转换器和数据处理系统。流式细胞仪的工作原理是使悬浮在液体中分散的...
如何选择适合的流式抗体(五):举例
三、补偿微球 流式细胞仪的荧光补偿隔一段时间之后需要调整到适合的位置。如果荧光补偿没有调节好,会导致细胞分群不明显或者流式检测得到的结果图非常不漂亮,而且会影响到检测结果的不真实。荧光补偿的调节对初学者来说非常不容易掌握,同时,补偿调节是流式细胞术中比较难掌握的操作。尤其是一些不常见的标志检测时,需...
一文讲清楚:Annexin V凋亡实验注意事项
单阳对照必须使用已知具有凋亡性质的细胞，以确保补偿准确。若细胞具有自发荧光，确保单阳对照和空白对照使用不带自发荧光的细胞，并增加一管未经染色的细胞以做单阳对照。不同细胞发光颜色，如GFP或mcherry\/RFP，应选用对应的试剂盒，以确保数据的准确性和可比较性。流式细胞仪的DAPI通道将决定是否选择...
流式细胞仪的原理和操作过程
原理：流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度...
流式细胞术:原理、操作及应用目录
流式细胞术：原理、操作及应用目录 序 前言 2 流式细胞仪的原理 流式细胞仪基于液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统，实现了对细胞进行实时、高精度分析。液流系统负责将样品以单细胞为单位通过管道流动；光路系统利用激光光源对样品进行激发，同时通过检测器收集细胞散射和荧光信号；检测分析系统对...
用流式细胞仪检测各个象限的意义
单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液，一般限制液流速度υ<10m\/s。由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体，受到振荡信号可发生振动。以上内容参考：百度百科-流式细胞仪 ...
流式细胞仪 FITC-PI双染HEK293T细胞 空白组细胞凋亡率很高
PI的染色看起来很弱 第三，Annexin V单染没有强阳性，而且这个细胞群都有右移，这个提示很可能是你处理细胞过头导致的假阳性。第四，你没有贴FSC-SSC的图。真有凋亡发生，那个图也会有变化的。第五，你的单染对照因为设置的电压过低，没有做对双色补偿，所以你这个实验数据时无效的。
如何用流式细胞仪分析荧光强度
荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生，发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长，激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片，可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的...
请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么?
离心洗涤，再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测。应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例，增加早期凋亡细胞比例。3、由于Annexin-V为钙离子依赖的磷脂结合蛋白，只有在钙离子存在的情况下与PS的亲和力才大，因而在消化细胞时，建议一般不采用含EDTA的消化液。4、必须设置阴性对照和补偿对照（分别单染）。
流式细胞术:原理、操作及应用内容简介
在原理部分，着重阐述了流式细胞仪的液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统的工作原理。接下来，流式图部分详细介绍了流式通道、流式直方图、流式散点图和流式等高线图的特性及应用。操作部分涵盖了样品制备、荧光素偶联抗体及标记、光电倍增管电压设定、对照设置、补偿调节、阈值设定、死细胞问题处理...
盈江县力能回答： 原理: 流式细胞仪可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号.测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点.液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射会向立体角...
朝符15629414887问： 请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么? - ？
盈江县力能回答： 一、原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧.Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高...
朝符15629414887问： 流式细胞仪的原理是什么? - ？
盈江县力能回答： 流式细胞仪(flow cytometer,FCM)是进行流式细胞分析的仪器,它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论、细胞荧光化学技术及单克隆抗体技术于一体,被誉为实验室的“CT”. 流式细胞术则是一种在功能水平上对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析和分选的检测技术,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术.自1969年第1台流式细胞仪问世,流式细胞术已经发展成为日益完善的细胞分选和分析技术. 生物帮上面有更加详细的介绍,sds-page视频 http://v.bio1000.com/show-844.html
朝符15629414887问： 流式法检测细胞凋亡时怎样体调补偿 - ？
盈江县力能回答： 流式细胞检测凋亡的原理和染色方法有好多种呢,有的只要单色,不需要设置补偿.只有使用PI+Anexin V 这种双色实验才需要.不过这个实验特异性很差,不建议使用,因为健康细胞结果刮取或者胰酶消化后很容易出现假阳性.调节补偿,和其他多色流式的方法一样,需要一管无染色,一管肯定有PI阳性的,一管肯定有Anexin V阳性的,分别做相应的染色.再上机调节.特别要注意的是很多人用健康细胞来做这个调节,但是健康细胞是不会被染色的,所以一定要使用确定死亡和正在发生凋亡的细胞来做调节补偿的单色阳性对照
朝符15629414887问： 流式细胞术的原理在哪些检验仪器或技术平台中还有应用 - ？
盈江县力能回答： 血细胞分析仪和尿沉渣分析仪都有应用,可以形成连续的单细胞液柱,对每一个细胞逐个分析
朝符15629414887问： 流式细胞仪是怎么“看见”光的 - ？
盈江县力能回答： 一般常规bai的流式细胞仪都是采用荧光激发和探测来检测信号的.基本的原理如下:1. 荧光的产生.荧光素du再受到光线(激发光,一般是激光)的照射后,会释放出波长较长的光线.2. 发出的释放光通过光纤维传到检测区域.3. 检测区域,不同的机器构造有所差异.基本的原理就是先zhi通过各种滤镜的组合,来控制相应波长dao的光线可以到达指定的检测器.流式机器的检测器一般都是光电倍增管(PMT).PMT可以有效的把微弱的光信号转回变为电信号,并且放大,这样最终变为计算机可以读取的数据.4. PMT是不能区分颜色的.那种颜答色的光到达哪个PMT,由滤镜组合来决定.
朝符15629414887问： 简述流式细胞仪,酶免疫自动分析系统的基本原理 - ？
盈江县力能回答： 流式细胞仪的原理
朝符15629414887问： 流式细胞仪怎么用? - ？
盈江县力能回答： 流式细胞仪的结构 流式细胞仪是进行流式细胞分析的仪器,集电子、计算机、激光、流体理论于一体,被誉为试验室的“CT”.流式细胞术(Flow CytoMeter, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手...
朝符15629414887问： 请问一下用流式细胞仪检测细胞凋亡的试验中,为什么要用PBS洗涤两次呢?用PBS洗涤的原理是什么呢? - ？
盈江县力能回答： PBS是一种缓冲液,他的渗透压与一般细胞的相同,在做细胞试验或者活体组织实验中,一般就把PBS当做水来用,各种冲洗的过程什么的都是用它.这样不会改变细胞形态~
朝符15629414887问： 流式细胞仪的各个通道都有什么作用,分别对应什么参数呢??? - ？
盈江县力能回答： 流式细胞仪(Flow cytometry )是对细胞进行自动分析和分选的装置.它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来.多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少.也就是说,它的细节 分辨率为零.
